초음파 화상 진찰에 의하여 마우스에 있는 폐 종양 진행의 탐지

이 프로토콜의 중요성은 종양 개시에서 종양 진행에 이르기까지 이 마우스 모델에서 자발적으로 개발된 폐 종양의 실시간 검출가능성에 있습니다. 이 기술의 장점은 비침습적이며 기본적인 기술만 필요하며 약물과 관심의 치료의 효과를 직접 모니터링 할 수 있습니다. 폐종양 진행은 또한 관심 있는 유전자의 존재 또는 부재에서 평가될 수 있다.

이 분석을 사용하여, 새로운 처리 전략은 잠재적으로 진료소로 확장될 수 있습니다. 렌티바이러스 삽관 후 7주와 18주 후, 초음파 젤과 온도 모니터용 가열 펌프를 켜고 섭씨 33도의 인큐베이터를 설치합니다. 3D 모터를 통합 레일 시스템에 배치하고 모터 및 트랜스듀서 장착 시스템이 제자리에 고정되어 있는지 확인합니다.

40 헤르츠 주파수 트랜스듀서를 3D 모터에 연결하고 초음파 소프트웨어에서 새로운 연구를 엽니다. 새 학습 창에서 학습 이름을 입력합니다. 시리즈 이름 창에서 시리즈 이름 및 기타 관련 정보를 입력합니다.

완료한 후 트랜스듀서 유형을 선택합니다. 프로그램이 B 모드로 변경됩니다. 가열 램프를 동물 플랫폼 위에 편리한 위치에 놓고 마취 실험 마우스에서 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인합니다.

동물 플랫폼에 마우스를 큐비투스 복부에 넣고 동물의 눈에 연고를 바침합니다. 테이프로 팔다리를 플랫폼에 단단히 고정하고 따뜻하게 된 초음파 젤의 얇은 층을 동물의 가슴에 바하십시오. 높이 제어 노브를 사용하여 마우스 가슴의 표면에 닿을 때까지 획득 프로브를 낮추고 마우스의 심장이 약 중심이 될 수 있도록 프로브를 배치합니다.

그런 다음 마이크로 노브를 사용하여 횡방향의 두 사지에서 전체 가슴의 이미지를 얻습니다. 마우스당 500프레임을 이상적으로 수집하는 것이 좋습니다. 모든 이미지가 캡처되면 마우스 가슴에서 젤을 청소하고 동물을 온난화 인큐베이터에 넣습니다.

초음파 이미지의 2D 분석을 위해 초음파 소프트웨어에서 획득 된 프레임을 열고 종양에 대한 프레임을 수동으로 스캔하십시오. 작은 종양을 시동하는 경우, 획득한 500프레임의 전체 길이에 대해 주기적으로 10프레임마다 벨린 수를 계산합니다. 큰 종양의 2D 측정을 위해 선형 도구를 사용하여 존재하는 종양의 폭과 길이를 측정한 다음 수식을 사용하여 종양의 부피를 계산합니다.

기관 내 감염 후 7주 후, 초음파 이미징은 주사 후 실험 마우스 모델에서 발생하는 다양한 유형의 전구체 병변을 시각화하기 위해 수행됩니다. 이 비린 확인 전구체 병변은 눈에 의해 계산될 수 있고 폐의 표면에 작은 종양을 나타낼 수 있습니다. 이러한 데이터의 분산 플롯은 동물 당 상대종양 수의 추정을 허용하는 실험 마우스 내의 종양의 정량화를 허용한다.

감염 후 18주 에서, 큰 종양은 초음파 소프트웨어 내에서 측정될 수 있는 복수표면을 방해하는 깊은 갈라짐으로 나타난다. 상대적인 종양 부피는 통계 분석을 위해 정량화될 수 있다. 혈소클린과 에신은 감염 후 20주 동안 수확된 폐 구간에서 염색되어 큰 종양의 형성뿐만 아니라 선종과 아데노시종의 형성을 확인합니다.

동적인 폐 종양을 정적인 거짓 긍정과 혼동하지 않는 것이 중요합니다. 이 방법에서 부피의 종양 수의 검증이 상대적이기 때문에, 페트리 염색과 같은 추가 방법을 사용하는 것이 좋습니다. 이 모형은 마우스에 있는 폐암 발달에 유전 수차 또는 처리 전략의 효력의 직접적인 평가를 허용합니다.