Bu protokolün önemi, bu fare modelinde kendiliğinden gelişen akciğer tümörlerinin gerçek zamanlı olarak saptanabilirliğinde yatmıştır, tümör inisiyasyonundan tümör progresyonuna kadar. Bu tekniğin avantajı non-invaziv olan, sadece temel beceri gerektirir ve bize doğrudan ilaç ve ilgi tedavisi etkisini izlemek sağlar. Akciğer tümörü progresyonu da ilgi bir gen varlığı veya yokluğunda değerlendirilebilir.
Bu analiz kullanılarak, yeni tedavi stratejileri potansiyel olarak kliniğe genişletilebilir. Lentiviral entübasyondan yedi ve 18 hafta sonra ultrason jeli ve sıcaklık monitörü için ısıtma pompasını açın ve 33 santigrat derece inkübatör ayarlayın. 3B motoru entegre raylı sisteme yerleştirin ve motor ve transdüser montaj sisteminin yerinde sabitli olduğunu doğrulayın.
3D motora 40 hertz frekans lı transdüser bağlayın ve ultrason yazılımında yeni bir çalışma açın. Yeni çalışma penceresinde, çalışma adını girin. Seri adı penceresinde, seri adını ve diğer ilgili bilgileri girin.
Bitti'yi tıklattıktan sonra dönüştürücü türünü seçin. Program B moduna geçer. Bir ısıtma lambasını hayvan platformunun üzerinde uygun bir konuma yerleştirin ve anestezili deneysel farede pedal refleksine yanıt eksikliğini doğrulayın.
Cubitus ventral içine hayvan platformu üzerinde fare yerleştirin ve hayvanın gözlerine merhem uygulayın. Bant ile platforma sıkıca uzuvları güvenli ve hayvanın göğsüne ısıtılmış ultrason jel ince bir tabaka uygulayın. Fare göğsünün yüzeyine dokunana kadar edinme sondasını düşürmek için yükseklik kontrol tonunu kullanın ve sondayı farenin kalbinin yaklaşık ortalanmış olacak şekilde konumlandırın.
Daha sonra enine yönde her iki ekstremite tüm göğüs görüntüleri elde etmek için mikro knobs kullanın. İdeal fare başına 500 kare toplama. Tüm görüntüler yakalandığında, farenin göğsünden jeltemiz ve ısınma kuvöz içine hayvan yerleştirin.
Ultrason görüntülerinin 2D analizi için, ultrason yazılımında kazanılmış çerçeveleri açın ve tümörler için çerçeveleri manuel olarak tarar. Küçük başlayan tümörler için, elde edilen 500 kare tam uzunluğu için periyodik olarak her 10 kare beeline sayısını saymak. Büyük tümörlerin 2D ölçümleri için mevcut tümörün genişliğini ve uzunluğunu ölçmek için doğrusal aracı kullanın, daha sonra formülü kullanarak tümörlerin hacmini hesaplar.
İntra trakeal enfeksiyondan yedi hafta sonra, enjeksiyondan sonra deneysel fare modelinde meydana gelen çeşitli öncül lezyonları görselleştirmek için ultrason görüntüleme yapılır. Bu beeline tanımlanan öncülezyonlar göz tarafından sayılabilir ve akciğer yüzeyinde küçük tümörleri temsil eder. Bu verilerin dağılım çizilmesi, deney fareleri içindeki tümörlerin sayısallaştırılmasına izin vererek hayvan başına göreceli tümör sayısının tahmin inmesine olanak sağlar.
18 hafta sonrası enfeksiyon, büyük tümörler ultrason yazılımı içinde ölçülebilir çoğul yüzeyi kesintiye derin yarıkolarak görünür. Göreceli tümör hacmi daha sonra istatistiksel analiz için ölçülebilir. Enfeksiyon sonrası 20 hafta sonra akciğer kesitlerinde hematoksilin ve eozin boyama büyük tümörlerin oluşumunu yanı sıra adenom ve adenokarsinom oluşumunu doğrular.
Dinamik olan akciğer tümörlerini statik olan yanlış pozitiflerle karıştırmamak önemlidir. Bu yöntemde tümör sayısının niteliği göreceli olduğundan petri boyama gibi ek yöntemler kullanılmasını öneririz. Bu model farelerde akciğer kanseri gelişimi üzerinde genetik sapmaları veya tedavi stratejilerinin etkilerinin doğrudan değerlendirilmesi sağlar.
