超声成像对小鼠肺肿瘤进展的检测

该协议的意义在于在小鼠模型中自发发展起来的肺肿瘤的实时可检测性，从肿瘤启动到肿瘤进展。这种技术的优点是非侵入性的，只需要基本技能，并允许我们直接监测药物和治疗的兴趣的效果。肺肿瘤进展也可以在存在或没有感兴趣的基因的情况下进行评估。

利用这种分析，新的治疗策略可以潜在地扩展到诊所。扁病毒插管7周和18周后，打开超声波凝胶和温度监测仪的加热泵，并设置一个33摄氏度的培养箱。将 3D 电机放在集成轨系统上，并确认电机和传感器安装系统已固定到位。

将 40 赫兹频率传感器连接到 3D 电机，并在超声波软件中打开新的研究。在新的学习窗口中，输入学习名称。在系列名称窗口中，输入系列名称和任何其他相关信息。

单击后，选择传感器类型。程序将更改为 B 模式。将加热灯放在动物平台上方的方便位置，并确认麻醉实验鼠标对踏板反射缺乏响应。

将动物平台上的老鼠放入幼崽腹，并在动物的眼睛上涂抹软膏。用胶带将四肢牢牢地固定在平台上，并在动物的胸前涂抹一层薄薄的加热超声波凝胶。使用高度控制旋钮降低采集探头，直到它接触鼠标胸部的表面并定位探头，使鼠标的心脏大致居中。

然后使用微旋钮从横向方向的两个四肢获取整个胸部的图像。理想情况下，每只鼠标收集 500 帧。当所有图像被捕获后，清洁小鼠胸部的凝胶，将动物放入加热培养箱。

对于超声波图像的二D分析，打开超声波软件中获取的帧，并手动扫描肿瘤的帧。对于小启动肿瘤，每 10 帧定期计算一次蜜蜂计数数，计算获得的 500 帧的全长。对于大肿瘤的二次测量，使用线性工具测量肿瘤的宽度和长度，然后使用公式计算肿瘤的体积。

气管内感染七周后，进行超声波成像，以可视化注射后实验小鼠模型中发生的各类前体病变。这些蜂线识别的前体病变可以由眼睛计数，代表肺部表面的小肿瘤。这些数据的散射绘制允许对实验小鼠内的肿瘤进行定量，以便估计每个动物的相对肿瘤数。

在感染后18周，大肿瘤出现深裂，中断了可测量在超声波软件中的复数表面。然后，可以量化相对肿瘤体积进行统计分析。感染后20周收获的肺部分血氧素和青霉素染色证实大肿瘤的形成以及腺瘤和腺癌的形成。

重要的是不要混淆肺肿瘤，这是动态的，与假阳性，这是静态的。由于肿瘤体积的限定是相对的，在这种方法中，我们建议使用额外的方法，如培养染色。该模型允许直接评估遗传畸变或治疗策略对小鼠肺癌发展的影响。