명확한 세포 신장 세포 암 또는 CCRCC는 신장암의 일반적인 특수형입니다. CCRCC를 국소화하는 것은 수술과 함께 유리한 결과를 가지고 있습니다. 그러나 CCRCC 환자의 1/3은 폐에 먼 전이를 개발할 것입니다.
이는 환자를 위한 아주 나쁜 결과로 이끌어 냅니다. 불행히도,이 치명적인 단계에 대한 치료법은 없습니다. 전이의 분자 메커니즘은 암시적으로 남아 있기 때문에.
이 프로토콜의 목적은 최근 전이성 CCRCC에 대해 확립된 두 가지 동물 모델을 도입하고 비교하는 것입니다. 첫 번째 모델은 주제 이식의 마우스입니다. 이 마우스 모델에서, 이질적인 CCRCC는 마우스의 신장 캡슐에 이식된다.
종양 성장 및 전이는 10 주 후에 자산입니다. 두 번째 모델은 닭 초리알란토이드 멤브레인 모델 또는 CAM 모델이다. 이 닭 모델에서 이질적인 CCRCC는 계란에 이식됩니다.
종양 성장 및 순환 종양 세포는 태아 부화 전에 이식 10 일 후에 자산입니다. 폐 전이는 이식 24일 후에 자산입니다. 부화 후 2 주입니다.
이 두 가지 새로운 모델은 CCRCC의 전이 뒤에 분자 메커니즘을 더 연구하는 데 유용할 것이다. CAM 절차는 이 비디오에 는 적용되지 않습니다. CAM 모델에 대한 자세한 프로토콜은 슈로우 외에 의해 다른 트로브 기사에서 설명및 촬영된다.
마우스를 마취한 후 마우스 뒷면을 포비단 요오드로 완전히 소독하여 세 번 이나 소독합니다. 한 번 70%에 의해 따라, 멸균 면 봉면으로 건조 닦아. 그런 다음 3개의 멸균 의료 드레싱을 순차적으로 덮어 수술장을 만들고 마우스를 고정시한다.
작동 전에 작업자는 포비도오요오드로 손가락을 소독해야 합니다. 마우스를 경향이 있는 위치에 놓습니다. 그리고 손가락을 사용하여 왼쪽 왼쪽 신장을 왼쪽 측면 바로 아래에 배치합니다.
무딘 집게와 가위를 사용하여 지정된 위치에서 피부와 근육 층을 열어 두습니다. 멸균 면봉과 집게를 사용하여 왼쪽 신장을 복부 밖으로 부분적으로 외부화하십시오. 인슐린 주사기 또는 종양 세포 현탁액이 별도로 준비된 맞춤형 해밀턴 주사기를 적재한다.
신장 캡슐 아래에 세포 현탁액의 20 마이크로 리터를 주입. 여분의 세포 매트릭스 용액을 고화시키기 위해 천천히 바늘을 당깁니다. 뿐만 아니라 출혈이나 종양 세포 누출을 방지 할 수 있습니다.
그리고, 멸균 면봉을 사용하여 신장을 복부로 다시 밀어 넣습니다. 봉합사를 사용하여 근육 층을 꿰매습니다. 포비도요오드로 피부를 소독합니다.
그리고 상처 자동 클립으로 피부를 닫습니다. 정형소 포심 종양 세포는 BLI에 의해 확인된 마우스 신장에서 성공적으로 성장했습니다. 1 차적인 성장에있는 다름이 없었더라도, 만 이질성 전이성 종양은 폐에 강한 전이가 있었습니다.
전이또한 면역히스토케에 의해 확인되었다. 유사하게, 순환 종양 세포 수는 비 전이성 종양을 베어링하는 마우스에서 더 높았다. 마우스 모델과 일치하여 CAM 모델은 전이성 종양과 비전성 종양 간의 성장 차이를 나타내지 않았다.
한편, 전이성 종양을 가진 계란에서 순환 종양 세포의 수는 상당히 높았다. 부화 닭의 폐에서 조직학적으로 검출 가능한 전이가 관찰되었다. 결론적으로, 이 프로토콜은 전이성 CCRCC를 위한 2개의 새로운 동물 모형을 기술했습니다.
마우스와 닭 모델 모두 병원에서 관찰된 폐 전이를 충실하게 재구성했습니다. 이 2개의 전임상 모형은 전이의 뒤에 분자 기계장치의 이해를 확장하는 것이 유용할 것입니다. 뿐만 아니라 전이성 CCRCC에 대한 새로운 치료를 발견할 수 있습니다.
