이 새로운 대동맥 밴딩 기술은 분산이 적고 재현성이 높은 마우스에서 압력 과부하 심장 비대를 유도 할 수 있습니다. 대동맥 주위에 고정 된 직경의 고무 링을 배치하면 횡 대동맥에서 일관된 유속 증가를 유도하여 재현 가능한 심장 비대를 생성합니다. 이 절차는 설치류에서 이미 마취 및 미세 수술 기술을 경험했거나 안내 할 수있는 경험이있는 사람이 수행해야합니다.
대동맥 주위에 배치할 수 있도록 가위 또는 메스를 사용하여 현미경으로 O-링을 한 번 절단하는 것으로 시작합니다. 8-0으로 연결된 바늘로 컷에 가까운 각 링 측면을 뚫습니다. 비 흡수성 봉합사, 실을 당깁니다. 자르고 한쪽에 2-3 센티미터, 다른쪽에 2 센티미터를 남겨 두어 마지막 단계에서 대동맥 주위에 O- 링을 고정시킵니다.
수술 전에 결찰 보조기구를 가져 와서 결찰 보조기구의 구멍을 통해 한쪽 링면의 실 끝을 당깁니다. 부착된 O-링이 있는 결찰 보조 장치를 배치를 위해 옆에 두십시오. 마취 된 마우스의 왼쪽 흉부에있는 모피를 면도하십시오.
그런 다음 삽관 전에 충분한 진정 작용을 위해 마우스를 이소플루란으로 채워진 챔버에 다시 넣습니다. 동물의 체온을 섭씨 37도로 유지하기 위해 수술 전에 가열 패드를 켜십시오. 가열 패드를 직장 프로브에 연결하여 마우스의 체온을 자동으로 유지합니다.
가열 패드 주위에 고무 밴드를 펴서 마우스를 플레이트의 앞니에 고정합니다. 마취 된 마우스를 앙와위 자세의 가열 패드에 놓습니다. 동물의 앞니 위에 고무 밴드를 놓아 접시의 목을 확장합니다.
기관 내 삽관을위한 기관의 개구부를 잘 볼 수 있도록 목구멍에 광원을 집중시킵니다. 한 손으로 입을 부드럽게 열고 다른 손과 작은 집게로 삽관 보조제를 놓습니다. 혀를 부드럽게 움직여 기관의 개구부를 청소하십시오.
기관 내 튜브를 기관에 도입하고 다른 한편으로는 삽관 보조기구를 계속 잡으십시오. 3방향 스톱콕을 통해 기관 내 튜브 위치를 생쥐용 인공호흡기에 연결하여 올바른 기관 내 튜브 위치를 확인합니다. 제조업체의 지침에 따라 올바른 환기를 모니터링하십시오.
발가락 꼬집음 반사 검사로 충분한 마취 깊이를 확인하십시오. 수술 중 건조를 피하기 위해 눈에 안과 연고를 바르십시오. 시중에서 판매하는 소독액을 사용하여 수술 부위를 소독하십시오.
가위를 사용하여 xiphoid 돌기와 왼쪽 겨드랑이 사이의 선 중간에 0.5-1cm 길이의 피부 절개를하십시오. 집게를 사용하여 밑에있는 갈비뼈에서 근육층을 분리하고 두 개의 5mm 견인기를 절개 부위에 넣어 흉곽을 노출시킵니다. 왼쪽 개흉술을 시작하려면 마이크로 스프링 가위를 사용하여 두 번째와 세 번째 갈비뼈 사이의 늑간근에서 1-2mm 절개를 수행하십시오.
흉강을 열고 45도 각도의 집게로 절개를 펼칩니다. 시각화를 개선하기 위해 흉강을 열기 위해 3 개의 흉부 견인기를 절개 부위에 배치하십시오. 대동맥 궁을 노출시키려면 45도 각도의 미세한 포셉으로 흉선과 지방 조직을 아치에서 들어 올려 부드럽게 분리하십시오.
한 손에 45도 각도의 집게로 대동맥궁을 노출시킵니다. 반면에 이전에 부착된 한쪽의 나사산을 통해 결찰 보조 장치와 연결된 O-링을 배치합니다. 꼬리에서 상완 동맥과 왼쪽 총 경동맥 사이의 횡 대동맥의 두개골 쪽까지 대동맥 궁 아래의 결찰 보조 장치를 사용하여 실을 통과시킵니다.
집게로 결찰 보조기구와 대동맥궁 사이의 두 실을 조심스럽게 잡습니다. 결찰 보조장치를 제거하고 양쪽의 나사산을 당겨 아치 주위에 O-링을 부드럽게 배치합니다. 성공적으로 위치를 잡은 후 나사산과 수술 매듭으로 O- 링을 고정하십시오.
양쪽에서 열리지 않도록 추가 매듭을 만드십시오. O- 링을 결찰 한 후 절개 부위에서 3 개의 흉부 견인기를 제거합니다. 필요한 경우 따뜻한 0.9 % 등장 성 염 용액으로 채워 흉부의 잔류 공기를 제거하십시오.
봉합을 위해 흉부 절개를 노출하려면 두 개의 5mm 견인기를 다시 가져 와서 피부를 옆으로 잡으십시오. 2 개 또는 3 개의 6-0 비 흡수성 봉합사로 흉부를 닫습니다. 2 개의 견인기를 제거하고 3-5 개의 4-0 흡수성 봉합사로 피부를 닫습니다.
그런 다음 이소 플루 란을 끄고 모니터링하십시오. 폐를 다시 팽창시키기 위해 인공 호흡기의 유출을 2 초 동안 꼬집습니다. 수술 후 하루, 협착에 대한 최대 유속을 측정하여 초음파를 사용하여 협착을 확인합니다.
측정을 위해 초음파 시스템과 30 메가 헤르츠 주파수의 변환기 프로브가있는 심 초음파를 사용하십시오. 마취 된 동물을 앙와위 자세로 가열 패드에 놓고 가열 패드를 직장 프로브와 연결하여 체온을 섭씨 37 도로 유지하고 4 개의 마우스 발 센서를 사용하여 ECG로 심박수를 모니터링합니다. 성공적으로 수행 된 O- 링 대동맥 밴딩은 초음파로 측정 한 협착증에 대한 유속을 증가시킵니다.
이 측정을 위해 변환기 헤드를 오른쪽 흉부에 흉부 주위로 배치하여 2차원 이미징으로 대동맥궁의 위치를 지정합니다. 컬러 도플러를 사용하여 대동맥의 혈류를 시각화하고 협착에 대한 펄스 웨이브 도플러 혈류 속도로 측정하십시오. 2차원 영상으로 좌우 총경동맥을 시각화합니다.
트랜스듀서 헤드를 목의 왼쪽과 오른쪽에 45도 각도로 수평으로 놓고 펄스 웨이브 도플러를 사용하여 혈류 속도를 결정합니다. 대동맥 협착증의 성공적인 유도는 펄스 파 도플러 초음파로 측정 된 대동맥의 협착에 대한 혈류 속도 증가로 나타났습니다. 또한, 오른쪽과 왼쪽 총 경동맥 사이의 혈류 속도 비율은 O- 링 대동맥 밴딩의 기능적 마커로 결정되었습니다.
수술 2 주 후, 이완기에서 좌심실 후벽과 뇌실 내 중격 직경의 증가가 관찰되었다. 또한, 심장 기능의 점진적인 악화는 감소된 좌심실 박출률 측정을 통해 문서화되었습니다. 대동맥궁 주위에 O링을 고정하는 동안 최적의 결과를 얻으려면 매듭으로 양쪽의 링을 닫는 것이 중요합니다.