췌장 이식은 당뇨병 환자를 위한 치료 치료법입니다. 그러나 장기가 부족하고 기증자 풀을 개선하기 위한 전략이 필요합니다. Normothermic Ex Vivo Perfusion은 잠재적으로 췌장 동종 이식편의 평가 및 복구를 허용할 수 있는 다른 기관에 대해 이미 성공적이었습니다.
췌장은 이식을 위해 버려지는 가장 흔한 기관입니다. 이 기술은 복잡한 당뇨병을 앓고 있는 사람들을 위해 장기 풀을 증가시킬 가능성이 있습니다. 이 방법을 통해 허혈 재관류 손상을 더 잘 이해하고 췌장 손상의 바이오마커를 식별할 수 있습니다.
설정이 약간 복잡할 수 있으며 췌장이 매우 민감한 기관이라는 점을 고려하면 회수를 위한 연습이 필요합니다. 시작하려면 수술 부위를 소독하고 덮으십시오. 검상돌기에서 치골 결합까지 정중선 절개를 수행하고 더 나은 노출을 위해 왼쪽 측면 절개로 수술 부위를 확장합니다.
복부 대동맥에서 하대정맥을 해부합니다. 주변 조직에서 대동맥을 더 자유롭게 하고 작은 요추 대동맥 가지를 결찰합니다. 양쪽 신장 동맥 주위에 합자를 식별하고 배치합니다.
대동맥의 뒤쪽이 자유로워지면 아래쪽 합자가 결국 장골 동맥 분기점 바로 위에 묶이는 두 개의 합자를 그 주위에 통과시키고 위쪽 합자는 이전 연결보다 5cm 위에 묶습니다. 간 문턱을 해부 한 후 모든 동맥을 가능한 한 간에 가깝게 묶습니다. 그런 다음 총 담관을 확인하십시오.
두 개의 합자를 간 가까이에 놓고 구조를 나눕니다. 다음으로, 대동맥의 위 간 부분을 식별하고 해부하고 그 주위에 넥타이를 놓습니다. 다음으로, 얼음이 췌장을 식히고 플러시하기 전에 가능한 한 적게 췌장을 움직일 수 있도록 작은 자루를 엽니다.
그런 다음 중심선을 통해 기증자 체중 kg 당 500 국제 단위의 헤파린을 투여하고 경정맥 카테터를 사용하여 구연산염, 인산염, 포도당, 식염수, 아데닌, 포도당 및 만니톨 백에서 혈액 수집을 시작합니다. 하대동맥 합자를 묶은 후 장골 분기 넥타이 위의 플러시 라인으로 대동맥을 캐뉼러합니다. 상단 넥타이로 캐뉼라를 고정하고 양쪽 신장 동맥을 결찰합니다.
충분한 혈액이 수집되면 대동맥 상부 대동맥을 묶고 넥타이 위에 클램프를 놓습니다. 다음으로 University of Wisconsin Preservation Solution으로 플러시를 시작합니다. 그런 다음 환기를 위해 문맥과 카바의 개구부를 자릅니다.
1리터의 위스콘신 대학교 용액을 세척한 후 췌장 꼬리와 십이지장 C-루프를 평가합니다. 그리고 적절하게 세척되면 장간막 혈관을 식별하고 클램핑하여 해부를 시작합니다. 문맥의 확장을 위해 췌장 이식편과 카바 또는 장골 정맥의 일부를 검색합니다.
그리고 얼음으로 채워진 대야 안에 놓인 오르간 가방 안에 오르간을 넣습니다. 대동맥의 말단부에서 플러시 라인을 제거한 후 넥타이로 닫고 장기 백에 나머지 UW 용액을 채 웁니다. 다음으로, 이전에 회복된 카바 또는 장골 정맥을 6-0 Prolene으로 사용하여 문맥 확장을 수행하고 1/4 곱하기 3/8 감속기로 문맥과 근위 대동맥을 캐뉼러합니다.
그런 다음 십이지장의 말단 부분을 Malecot 카테터와 넥타이로 캐뉼라합니다. 다음으로 십이지장 내용물이 쏟아지는 것을 방지하기 위해 카테터 끝을 고정하고 4-0 Prolene으로 장간막 혈관을 감독했습니다. 이식편의 무게를 등록한 후 Ex Vivo 췌장 관류가 시작될 때까지 이식편을 정적 냉장 보관에 보관하십시오.
췌장실을 Mayo 테이블에 놓고 이 목적을 위한 구멍을 통해 동맥 및 정맥 튜브를 삽입합니다. 외부 히터 장치를 연결하고 켭니다. 흡입 튜브를 롤러 펌프 내부에 넣은 후 한쪽 끝을 챔버에서 나오는 튜브에 연결하여 유체를 수집하고 다른 쪽 끝을 정맥 저장소에 연결하여 관류액의 모든 장기 손실을 수집합니다.
그런 다음 산소 튜브를 탄소 혼합물과 산소 공급기가 들어 있는 가스 탱크에 연결합니다. 그런 다음 히터 펌프 장치 튜브를 산소 공급기에 연결합니다. 클램프 동맥 및 정맥 유출 라인뿐만 아니라 정맥 저장소의 유출.
정맥 저장소에 관류액을 채운 후 하나의 주사기 펌프를 사용하여 시간당 8밀리리터의 혈관 확장제를 동맥 라인에 지속적으로 투여합니다. 그런 다음 두 번째 주사기 펌프를 사용하여 효소 억제제를 정맥 저장소에 직접 지속적으로 투여합니다. 인공심폐기를 켠 후 압력, 온도 및 타이머 패널을 시작합니다.
그런 다음 히터 펌프를 켜서 관류 용액을 섭씨 38도까지 데우고 산소 이산화탄소 공급을 엽니다. 그런 다음 정맥 저장소의 유출에 놓인 튜브 클램프를 제거하고 원심 펌프를 시작하여 최대 1, 500 RPM으로 만듭니다. 그런 다음 동맥 필터를 우회하여 튜브를 고정합니다.
그리고 동맥 필터에서 공기를 방출하십시오. 그 후, 동맥 및 정맥 압력 라인을 제로화하십시오. 췌장이 보관되어있는 장기 주머니를 연 후 동맥 캐뉼라를 통해 200 밀리리터의 알부민으로 씻어냅니다.
그런 다음 얼음에서 췌장을 제거하고 장기 챔버 내부에 배치하여 동맥 및 정맥 튜브에 공기가 없는지 확인합니다. 다음으로, 동맥 측에서 클램프를 해제 한 후 동맥과 정맥 튜브 사이의 지름길을 고정하십시오. 혈액이 동맥관에서 나오기 시작하면 라인을 동맥 캐뉼라에 연결합니다.
그런 다음 원심 펌프의 속도를 조절하여 동맥압을 20-25 밀리미터의 수은으로 설정하고 정맥 캐뉼라에서 혈액이 나오기 시작하면 정맥 튜브를 연결하십시오. 다음으로, 췌장이 완전히 연결되고 측정 출혈이 관찰되지 않을 때 베라파밀 한 바이알을 동맥 측에 직접 투여하십시오. 원고에 기술된 바와 같이 다양한 파라미터를 기록한 후.
분석을 위해 샘플을 채취합니다. 관류가 끝나면 동맥 및 정맥 튜브를 분리하십시오. 장기 챔버에서 이식편을 제거한 후 차가운 University of Wisconsin 용액으로 씻어내고 무게를 잰다.
그런 다음 이식 순간까지 멸균 장기 주머니에 이식편을 얼음에 보관하십시오. 압력과 유량은 전체 관류를 통해 측정되었으며 결과는 안정적으로 유지됨을 입증했습니다. 대사 활성은 이식편의 평균 산소 소비량을 계산하여 추정했습니다.
결과는 pH, 나트륨, 칼슘 및 중탄산염 측정이 전체 관류 동안 생리학적 값 내에 있음을 보여줍니다. 젖산과 칼륨 수치는 관류 동안 감소하고 3 시간에 정상 값에 가까운 수치에 도달하는 것으로 관찰되었습니다. 회로가 폐쇄 시스템이기 때문에, 아밀라아제 및 리파아제 수준은 관류 동안 증가할 것으로 예상되었다.
그러나 수준의 증가는 이식편 손상과 관련이 없는 것 같습니다. 췌장은 플러시 전과 추출 중에 가능한 한 적게 조작해야한다는 것을 기억하는 것이 매우 중요합니다. 우리는 앞으로 이 모델이 이식에 적합하지 않은 장기를 복구하기 위한 치료적 개입을 허용할 수 있기를 바랍니다.
이 기술을 통해 연구자들은 췌장 허혈 재관류 손상, 보존, 평가 및 궁극적으로 복구를 추가로 연구할 수 있습니다.
