Para começar, coloque os tubos contendo 25 mililitros de mídia DMEM/F-12 avançada a frio preparada no gelo. Adicione as matrizes descongeladas a cada tubo. Misture a suspensão, garantindo que não se formem grumos.
Agora pipete 250 microlitros das matrizes diluídas em cada poço de uma placa de 24 poços. Incline a placa para espalhar a solução de revestimento uniformemente. Após a incubação, use uma pipeta sorológica para remover suavemente o excesso de solução sem arranhar as superfícies revestidas.
Pipete imediatamente 250 microlitros de meio de células-tronco completo quente em cada poço. Para revestir as placas de cultura de tecidos com hidrogel sem xenol Matrix 4, primeiro aqueça o hidrogel à temperatura ambiente. Adicione dois volumes do hidrogel a um tubo contendo um volume de meio de cultura de células-tronco 3x.
Pipete a solução para cima e para baixo para misturá-la bem. Transfira 250 microlitros do hidrogel para os poços de uma placa de cultura de tecidos de 24 poços. Em seguida, incline a placa para espalhar o hidrogel uniformemente.
Após 10 a 15 minutos, as placas revestidas estão prontas para a cultura de células-tronco pluripotentes induzidas.
