A Wellcome Trust para a concessão de financiamento de Acesso Aberto para a Universidade de Oxford. Robert Deacon é um membro do grupo Oxion Oxford, financiado pelo Wellcome Trust concessão WT084655MA.

1. Método 1.1 Aparelho O aparelho de becos sucessiva é constituído por quatro pistas linearmente ligados sucessivas de putativamente aumentando carácter ansiogénico e é feita de madeira pintada (ver Figura 1 e, para comparação, a Figura 2 de um labirinto em cruz). Os detalhes são apresentados na Tabela 1: <table border="1"><tbody><tr><td> Beco </td><td> Comprimento </td><td> Largura </td><td> Altura da parede </td><td> Cor </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 25,0 </td><td> 8.5 </td><td> 25,0 </td><td> Preto </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 25,0 </td><td> 8.5 </td><td> 5 </td><td> Cinzento </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 25,0 </td><td> 3.5 </td><td> 0.8 </td><td> Branco </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 25,0 </td><td> 1.2 </td><td> 0,2 </td><td> Branco</td></tr></tbody></table> Tabela 1. Detalhes de construção para o aparelho becos sucessivos. Todas as dimensões estão em cm. O aparelho é elevada aproximadamente 50 cm, fixando o piso back-prolongado de uma pista para um banco de laboratório, prateleira ou outro suporte. A extremidade aberta de uma pista deve ser de pelo menos 10 cm de distância a partir do suporte para evitar que os ratos que tentam subir sobre a mesma. Fornecer o preenchimento adequado e suficiente sob as vielas no caso de um rato cai. A razão para as diferentes alturas de parede foi: aqueles de um beco precisa ser alta para maximizar suas propriedades não-ansiogênicas. Também paredes altas criar um ambiente escuro, enquanto a fonte de luz do laboratório não está imediatamente acima. As paredes do beco dois foram julgados a partir da experiência de aparecer menos seguro do que um beco para ratos, mas ainda fornecer algum grau de proteção. Becos 3 e 4 tiveram altura apenas o suficiente para maximizar a ansiedade, mas aindafornecer um aperto se o rato estava em perigo de cair. Na prática, as quedas são raras, e não mais frequente do que no labirinto. O aparelho deve ser manuseado com cuidado, pois o beco estreito 4 é particularmente suscetível a danos. Se bem apertados, o aparelho não deve vibrar como o mouse se move sobre ela. Para minimizar estes problemas de ambos os potenciais, o aparelho pode ser dado um reforço extra &quot;coluna&quot; que mede o seu comprimento sob o piso. Um aparelho de becos sucessiva para ratos também podem ser feitas. Os detalhes são apresentados na Tabela 2: <table border="1"><tbody><tr><td> Beco </td><td> Comprimento </td><td> Largura </td><td> Altura da parede </td><td> Cor </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 45,0 </td><td> 9 </td><td> 29,0 </td><td> Preto </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 45,0 </td><td> 9 </td><td> 2,5 </td><td> Cinzento </td&gt; </tr><tr><td> 3 </td><td> 45,0 </td><td> 6,7 </td><td> 0.5 </td><td> Branco </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 45,0 </td><td> 3.5 </td><td> 0.3 </td><td> Branco </td></tr></tbody></table> Tabela 2. Detalhes de construção para o aparelho becos sucessiva para ratos. Todas as dimensões estão em cm. 1.2 Procedimento * Levar os ratos para a sala experimental 5-20 min antes de testar para garantir que eles são adaptados para o quarto e estão em um nível moderado de excitação. * Tal como acontece com todos os experimentos onde os animais são testados uma vez por comportamento espontâneo em um aparelho novo, é uma boa prática para os becos de ser dadas pela primeira vez um odor mouse; lugar camundongos não-experimentais sobre o aparelho por alguns minutos, em seguida, limpe o aparelho como durante o experimento principal. O objetivo é garantir uma ligeira mas uniforme fundo do rato odor, com base no que é imposvel para remover totalmente o odor de animais (e muito menos provar que este tenha sido alcançado). * Colocar um rato na extremidade fechada de uma pista de frente para a parede. Comece timers 1) para o comprimento total do teste + latência para entrar braços, e 2) o tempo gasto em um beco. Quando o mouse coloca todos os quatro pés para a próxima pista é considerado de ter entrado. Grave tempo total gasto em cada beco (quatro pés) e o número de entradas (tanto para a frente e para trás). Anote o número de boli fecal e se ocorreu qualquer micção. * Duração do ensaio: 5 min. (Este é o tempo normal; se você souber ou suspeitar que os animais que você está testando não vai ser muito ansioso, encurtando a duração do teste de 3 min pode ser vantajoso Observe o tempo que você faz uso.). * Um contador de evento combinado / timer é de valor inestimável para este trabalho, bem como para cronometrar o labirinto. Temos uma bateria-powered um portátil com quatro botões, cada um ass<html> ociated com um contador de eventos e um temporizador (1/10 s), construído no departamento de Psicologia. Tecla 1 registra um evento (entrada em pista 1) e inicia um timer. Soltar o botão pára o timer. Tecla 2 registra uma entrada beco dois e começa a viela 2 timer, etc, no entanto, deve-se subtrair uma entrada a partir do número total de entradas registadas no beco 1 como a primeira entrada foi iniciado pelo experimentador, não o mouse. * Para resumir, para cada registro de pista: a latência para inseri-lo (além de um beco, é claro), o número de entradas para ele e o tempo total gasto lá. * Se um rato cai, parar o relógio e substituí-lo no beco de onde ele caiu, de frente para um beco. * Todas urina e as fezes são removidos entre os animais e os aparelhos de limpeza com um pano húmido, seguido de um tecido seco. É importante limpar e desinfetar o equipamento entre cada rato testado. conteúdo &quot;&gt; * Além disso, sempre usar luvas ao manusear roedores.

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Não há conflitos de interesse declarados.

Em conclusão, o teste becos sucessivas geralmente produz resultados semelhantes ao labirinto em cruz quando as lesões do córtex pré-frontal medial ou complexo do hipocampo são feitas, mas é necessário mais trabalho para avaliar os efeitos de lesões em outras áreas do cérebro pensado para ser relacionado à ansiedade -como o comportamento. Ocasionalmente, os resultados no labirinto diferem muito daqueles nos becos sucessivas, um exemplo disso é o nosso trabalho em Kir6.2 KO 14. Quando eles foram testados em ambos os aparelhos, que nos permitiu demonstrar que KO não mostram uma mudança unidirecional geral no comportamento de ansiedade, como, uma vez que passou mais tempo do que camundongos selvagens nos braços abertos do labirinto em cruz (mostrando menos ansiedade -como comportamento), mas mais tempo na pista de um dos becos sucessivas (mostrando maior ansiedade-como o comportamento). Assim, o uso combinado dos labirinto e sucessivas becos pode eliminar resultados negativos falsos positivos ou falsos, pois os dois testes, emborasemelhante, não são funcionalmente idênticas. Como no labirinto, hiperatividade não leva a um aumento não-seletivo no número de becos introduzidos. Estudos têm mostrado que a organização do comportamento em ratinhos variam independentemente de actividade 28. Medial ratos lesionados do septo, que foram mostrados para ser marcadamente hiperativo em um teste separado em gaiolas Activity Monitoring photobeam só mostrou significativamente maiores entradas em ruas 2 e 3;. Entradas em ruas 1 e 4 não foram diferentes controles 5 Portanto, a septal menos ansiosa ratos lesionados foram idas e vindas entre as duas áreas moderadamente ansiogénicos dos becos sucessivos, mostrando que o aparelho foi projetado para detectar, ou seja, a sua posição em um espectro de ansiedade. Se eles tivessem sido ainda menos ansioso, um aumento de cruzamentos entre ruas 3 e 4, teria sido visto. Outras provas de que hiperactividade não conduza a<html> um falso positivo no teste de becos sucessivas é que os ratos com lesões no hipocampo dorsal são hiperativos, mas não mostram efeitos ansiolíticos nos becos sucessivos 7. Em um teste relacionado com aparelhos de linear, o teste de pista de preto-branco, GluRA KO camundongos fêmeas apresentam um comportamento um pouco mais de ansiedade como que os controles enquanto os machos são semelhantes aos controles, mas ambos os sexos são marcadamente hiperativo 3. Kir6.2 KO eram mais ativos em suas gaiolas que tipo de camundongos selvagens, mas mostrou les ansiedade nos becos sucessivas 14. Notavelmente, 8 KO pulou ou caiu do labirinto, mas nenhum dos becos sucessivos. Uma limitação do teste becos sucessiva como presentemente utilizado é o de que, dada a cor variando do chão, sistemas de vídeo-tracking seria difícil de utilizar. No entanto, o piso poderia provavelmente ser pintada de uma cor uniforme quanto a cor é apenas um dos factores do aparelho que gera ansiedade. nt &quot;&gt; O teste becos sucessiva é improvável, contudo, não sofrem de problemas de variabilidade associados com testes baseados ethologically similares, tais como o labirinto em cruz 10,23, mas o teste de um lote de animais, as duas tarefas pode ajudar a esclarecer um inconclusivos teste de labirinto em cruz 30,31,37; uma abordagem múltipla teste pode ter vantagens ao testar o comportamento de ansiedade-like.

O labirinto em cruz elevado foi obtido a partir do trabalho inicial de Montgomery 27. Ele observou que tendiam a evitar os braços abertos do labirinto, preferindo os fechados. Handley e Mithani e Arquivo et al. 22,29 realizados os primeiros estudos sobre o projeto labirinto que usamos hoje, e em 1987, Lister publicou um projeto para o uso com camundongos 25. É agora um ensaio padrão para tratamentos ansiolíticos 23, e vários protocolos têm sido publicados 36,24 <a href="http://www.jove.com/video/1088" target="_blank">http://www.jove.com/video/1088</a> ; <a href="http://currentprotocols.com/protocol/ph0538" target="_blank">http://currentprotocols.com/protocol/ph0538</a> . O labirinto em cruz elevado consiste em dois braços abertos e fechados opostos dois opostos que se cruzam em uma zona central, na forma de um plano em +. Porcentagem de tempo gasto, e as entradas em percentuais, os braços abertos são um índicede ansiedade-como o comportamento, o menor destes índices, o mais ansioso que o mouse está. Alternativamente, um rato que passa a maior parte de seu tempo nos braços fechados é classificado como ansioso. A análise fatorial mostrou que enquanto os índices de atividade aberta carga braço fortemente de um fator designado como ansiedade-como o comportamento, e entradas nos braços fechados refletem em grande parte a atividade motora, as fronteiras entre os fatores não são definitivos; também outros fatores, tais como exploração, avaliação de risco e tomada de decisão compõem o perfil de comportamento no labirinto em cruz, 12,32. Tempo na região central é mais problemático para interpretar, embora o tempo gasto aqui foi classificado como 32 &quot;tomada de decisão&quot;. Embora os ratos passam a maior parte do seu tempo nos braços fechados, e relativamente pouco tempo nos braços abertos, em muitos estudos quanto tempo é gasto na área central onde os braços participar. Embora isso possa representar a tomada de decisão de 32, é ambígua em terms de ansiedade como o comportamento, apesar de ratinhos altamente ansiosos podem ser esperados para evitar a área central, bem como os braços abertos. Uma das primeiras tentativas de eliminar esta área central ambígua era construir um labirinto circular com dois quadrantes fechados alternados com dois mais abertos 33. Neste &quot;zero-labirinto&quot; um animal é inequivocamente de uma forma aberta (ansiogênico) ou uma zona fechada (nonanxiogenic). No entanto, apesar de usado por vários grupos, ela nunca foi tão amplamente adotado como o labirinto. Em nosso laboratório, descobrimos que enquanto o labirinto (e becos sucessivas) mostrou efeitos ansiolíticos em ratos lesionados hipocampo, estes não foram vistos em um labirinto de zero construído exatamente como o do Pastor et al 13. O aparelho becos sucessiva foi, portanto, concebido com o objetivo principal de eliminar a área central do labirinto. Em segundo lugar, os elementos de outros testes de ansiedade-como o comportamento foram incorporados. Ao iniciar oanimal na pista 1 anexa, um componente de emergência foi introduzido, semelhante à da &quot;chaminé&quot; testes de pedra 34. A cor das ruas muda de preto (pista 1) a cinza (pista 2) ao branco (pistas 3 e 4). Isto origina a partir de observações que os ratos preferem áreas mais escuras, como exemplificado no teste de caixa claro-escuro 11. As paredes dos becos sucessivas também diminuir lentamente em altura, ao contrário do labirinto em cruz, onde há uma transição abrupta entre as paredes elevadas e sem paredes. A largura das pistas diminui progressivamente a aumentar gradualmente a exposição do rato para a posição elevada do labirinto, em conjunto com a redução gradual da altura da parede. Todos estes factores foram incorporadas em uma tentativa para aumentar a sensibilidade do teste e abrangem uma ampla gama de comportamento de ansiedade como a que o labirinto faz. O aparelho de becos sucessiva foi uma tentativa de suporte de uma ampla gama de linhas de base de comportamento de ansiedade, como, no mesmo way que as quatro condições iniciais do teste de interação social, como originalmente realizada pelo Arquivo 17 detecção de autorização de alterações sutis de comportamento como ansiedade. Ficheiro, num estudo sobre os efeitos da nicotina, só vi diferenças entre as duas condições de comportamento de ansiedade, como intermediários, e não a maior ou menor 20. Bem como o labirinto, outro teste utilizado de ansiedade-como o comportamento é a caixa claro-escuro 11. Os resultados da caixa claro-escuro eo labirinto nem sempre têm relação uns com os outros 35. Torna-se agora que o comportamento de ansiedade, como não é um fenômeno unitário 19. O teste becos sucessivas pode, portanto, muito bem dar resultados diferentes aos obtidos usando a caixa de claro-escuro, e possivelmente até mesmo do labirinto, já que é sutilmente diferente da última, no entanto, resultados entre o primeiro eo último seria esperado ser muito semelhante. 8,21 Pode ser que a exposição de um animal para o labirinto em seguida pelos becos sucessivas elimina a mudança do tipo de ansiedade-como o comportamento medido se o teste de labirinto em cruz é repetido. Um exemplo disso foi observado quando as labirinto e sucessivas becos foram utilizados para testar os ratos córtex-lesados ​​e controle pré-frontal medial de uma forma temporal de contrapeso. Os ratinhos lesionados apresentaram comportamento de ansiedade como significativamente mais baixos em ambos os tipos de aparelhos, independentemente de se o teste ocorreu com os becos sucessivas ou o labirinto primeiro 15. Também é possível que a utilização sequencial dos plus-maze e sucessivas becos pode preservar a sensibilidade às drogas ansiolíticas visto quando o teste do labirinto em cruz é repetido 18. Os ratos também pode ser testado em uma versão maior dos becos sucessivos. O procedimento é exatamente tele mesmo que para os ratos. Tal como no caso dos ensaios para hyponeophagia, a experiência geral antes de os animais, com excepção de labirinto elevado de ansiedade, como testes de comportamento, por si só, pode afectar o resultado 1,16.

the successive alleys test of anxiety in mice and rats

O labirinto foi obtido a partir do trabalho inicial de Montgomery. Ele observou que tendiam a evitar os braços abertos do labirinto, preferindo os fechados. Handley, Mithani e Arquivo<em&gt; Et ai.</em&gt; Realizados os primeiros estudos sobre o projeto labirinto que usamos hoje, e em 1987, Lister publicou um projeto para o uso com camundongos. Tempo gasto, e entradas para os braços abertos são um índice de ansiedade, o menor destes índices, o mais ansioso que o mouse está. Alternativamente, um rato que passa a maior parte de seu tempo nos braços fechados é classificado como ansioso. Um dos problemas do labirinto é que, enquanto o tempo gasto, e as entradas para os braços abertos é uma medida relativamente inequívoca da ansiedade, tempo na área central é mais difícil de interpretar, embora o tempo gasto aqui foi classificada como &quot;tomada de decisão&quot;. Em muitos testes de tempo de zona central é uma parte considerável do tempo total do teste. Pastor<em&gt; Et ai.</em&gt; Produziu uma concepção engenhosa para eliminar a área central, que eles chamavam de &quot;labirinto zero&quot;. No entanto, apesar de usado por vários grupos, ela nunca foi tão amplamente adotado como o labirinto. Neste artigo, descreve uma modificação do desenho do labirinto em cruz, que não só elimina a área central, mas também incorpora elementos de outros ensaios de ansiedade, tais como a caixa de luz-escuridão e testes de emergência. É uma série linear de quatro pistas, cada uma tendo propriedades aumentando ansiogénicos. Ela deu resultados semelhantes aos do labirinto em geral. Embora possa não ser mais sensível do que o labirinto (mais dados são necessários antes de uma conclusão definitiva pode ser alcançado a este ponto), ele fornece uma confirmação útil de resultados labirinto que seria útil quando, por exemplo, apenas um um único exemplo de um rato mutante foi disponíveis, como, por exemplo, em programas de mutagénese à base de ENU.

Ratos com lesões citotóxicas completos, ventral ou dorsal do hipocampo mostraram efeitos ansiolíticos moderadas ou parcial do labirinto, enquanto ventral, mas não dorsal, ratos lesionados mostrou efeitos ansiolíticos nos becos sucessivas 6,26. No entanto, em outro laboratório, as lesões do hipocampo dorsal electrolíticos não têm efeitos ansiolíticos 35, o que não é improvável que o primeiro estudo obtidos efeitos ansiolíticos apenas parciais com lesões citotóxicas dorsal, e é o hipocampo ventral que se pensa ter um papel principal em ansiedade-como o comportamento 4,7. Lesões do septo medial também reduziu a ansiedade-como o comportamento em ratos nos becos sucessivos 5. Em contraste, o labirinto de zero não detectou quaisquer efeitos ansiolíticos do completas lesões no hipocampo citotóxicos 13. Camundongos C57BL/6JolaHsd passou mais tempo no mais ansiogênico dos becos sucessivas (pista 4) do que os ratos 129S2/SvHsd 9.Em contraste, uma diferença de comportamento da ansiedade não clara como foi visto no labirinto em cruz, onde 129 ratinhos permaneceram mais tempo na zona central, em consequência, também visto na outra estirpe 129, 129/SvEvTac 2. Em um trabalho inédito em ratos com lesões completas, dorsal ou ventral do hipocampo, houve uma tendência geral para observar os resultados ansiolítico de lesões completas. No entanto, estes eram nem de longe tão marcada como em testes hyponeophagia, onde o efeito ansiolítico de lesões completas ou ventral era forte e confiável. Por exemplo, os ratos lesionados completos passado menos tempo nos braços fechados do labirinto, mas não mais a céu aberto. O teste becos sucessivo foi feito duas vezes, só no segundo julgamento estavam lá efeitos ansiolíticos significativos das lesões completas. Ambos os becos sucessivas eo labirinto fazer exigências sobre processos de orientação, de modo que os animais lesados ​​podem tomar mais tempo para &quot;se orientar&quot; e, portanto, o tempo disponível para demonstrar ansiolíticoefeitos diminui. Quando os ratos com lesões do córtex pré-frontal medial foram testados nas plus-maze e sucessivas becos aparatos com a série de ensaios de contrapeso, não houve efeito do que foi testado pela primeira vez, mas os efeitos ansiolíticos claras estavam presentes em ambos os testes, em comparação com 15 controlos (ver as Figuras 3 e 4). Os ratos lesionados feita significativamente mais entradas em cada pista dos becos sucessivas em comparação com os controlos, e os braços abertos do labirinto em cruz, embora interessante entradas nos braços fechados do que este não foi maior do que os controlos. No campo aberto os ratos lesionados foram significativamente mais ativos do que os controles, e de forma marginal em gaiolas atividade fotocélula. O teste de becos sucessiva também tem sido demonstrado ser sensível aos efeitos do clordiazepóxido ansiolítico. No trabalho inédito de 12 mg / kg ipchlodiazepoxide (CDZP) mostrou-se ativo em NIH camundongos machos, como o usado por Lister na descrição original do labirinto de ratos 25. Os ratos tratados com CDZP passaram menos tempo do que os controles no Beco 1 (158 ± 12,1 vs 212 ± 14,8 s, P = 0,0108, e fez mais entradas em becos 2-4 (ver Tabela 3). <table border="1"><tbody><tr><td> Beco </td><td> Controle </td><td> CDZP </td><td> P </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 7,2 ± 1,2 </td><td> 18,4 ± 2,0 </td><td> 0,0001 </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 1,0 (0-3,5) </td><td> 5,0 (2.5-12.3) </td><td> 0,0277 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 0,0 (0,0-1,0) </td><td> 2,0 (0,0-5,0) </td><td> 0,0604 </td></tr></tbody></table> Tabela 3. Entradas em becos 2-4 do aparelho becos sucessiva por camundongos tratados com 12 mg. / Kg ip de CDZP ou controles Os valores são medianas e (intervalo interquartil) ou meios ± SEM consoante dados foi não-paramétrica ou paramétrico de Mann-Whitney ou teste t, respectivamente. N = 11/group. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/2705/2705fig1.jpg" /> Figura 1. O mouse sucessivas aparelho becos. Ela é feita de madeira pintada e é fixada para o banco. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/2705/2705fig2.jpg" /> Figura 2. O mouse labirinto. Ela é feita de madeira pintada de preto, com paredes de Perspex transparente nos braços fechados. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/2705/2705fig3.jpg" /> Figura 3. O efeito ansiolítico de lesões no córtex pré-frontal medial (m) no labirinto compared aos controlos (C). * = P &lt;0,05 vs C m. Dados originalmente publicado em 15 de referência. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/2705/2705fig4.jpg" /> Figura 4. O efeito ansiolítico de lesões no córtex pré-frontal medial (m) nos becos sucessivos em relação aos controles (C). * = P &lt;0,05 m C vs. Dados originalmente publicado em 15 de referência.

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

As medidas labirinto ansiedade-como o comportamento em roedores. Existem dois oposta fechada e dois braços abertos opostos; roedores ansiosas evitar os braços abertos. A área central é nem completamente aberta nem fechada, assim que o tempo gasto aqui é ambígua e difícil de interpretar. Aqui uma modificação do protocolo de labirinto eliminar esta área é descrito.

O Becos Teste sucessiva de ansiedade em camundongos e ratos

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

21.5K visualizações.  University of Oxford. As medidas labirinto ansiedade-como o comportamento em roedores. Existem dois oposta fechada e dois braços abertos opostos; roedores ansiosas evitar os braços abertos. A área central é nem completamente aberta nem fechada, assim que o tempo gasto aqui é ambígua e difícil de interpretar. Aqui uma modificação do protocolo de labirinto eliminar esta área é descrito.

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Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical components. Both anxiety and fear can be studied in the laboratory by measuring the potentiation of the startle reflex. The startle reflex is a defensive reflex that is potentiated when an organism is threatened and the need for defense is high. The startle reflex is assessed via electromyography (EMG) in the orbicularis oculi muscle elicited by brief, intense, bursts of acoustic white noise (i.e., &#8220;startle probes&#8221;). Startle potentiation is calculated as the increase in startle response magnitude during presentation of sets of visual threat cues that signal delivery of mild electric shock relative to sets of matched cues that signal the absence of shock (no-threat cues). In the Threat Probability Task, fear is measured via startle potentiation to high probability (100% cue-contingent shock; certain) threat cues whereas anxiety is measured via startle potentiation to low probability (20% cue-contingent shock; uncertain) threat cues. Measurement of startle potentiation during the Threat Probability Task provides an objective and easily implemented alternative to assessment of negative affect via self-report or other methods (e.g., neuroimaging) that may be inappropriate or impractical for some researchers. Startle potentiation has been studied rigorously in both animals (e.g., rodents, non-human primates) and humans which facilitates animal-to-human translational research. Startle potentiation during certain and uncertain threat provides an objective measure of negative affective and distinct emotional states (fear, anxiety) to use in research on psychopathology, substance use/abuse and broadly in affective science. As such, it has been used extensively by clinical scientists interested in psychopathology etiology and by affective scientists interested in individual differences in emotion.

Potentiation of the startle reflex is measured via electromyography of the orbicularis oculi muscle during low (uncertain) and high (certain) probability electric shock threat in the Threat Probability Task. This provides an objective measure of distinct negative emotional states (fear/anxiety) for research on psychopathology, substance use/abuse, and broad affective science.

Usando o Task Threat Probabilidade para avaliar a ansiedade eo medo Durante Threat incerto e Certain

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical ...

Comportamento

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of the most commonly used platforms to measure behaviors in animal models. It is a fast and relatively easy test that provides a variety of behavioral information ranging from general ambulatory ability to data regarding the emotionality of the subject animal. As it relates to rodent models, the procedure allows the study of different strains of mice or rats both laboratory bred and wild-captured. The technique also readily lends itself to the investigation of different pharmacological compounds for anxiolytic or anxiogenic effects. Here, a protocol for use of the open field maze to describe mouse behaviors is detailed and a simple analysis of general locomotor ability and anxiety-related emotional behaviors between two strains of C57BL/6 mice is performed. Briefly, using the described protocol we show Wild Type mice exhibited significantly less anxiety related behaviors than did age-matched Knock Out mice while both strains exhibited similar ambulatory ability.

A protocol is provided to use an Open Field Maze to access general locomotor activity, anxiety and emotionality in a laboratory mouse model.

A utilização do campo aberto Maze medir Locomotor e Ansiedade-like Comportamento no Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Board Modificado - Medir Comportamento, Cognição e Interação Social em camundongos e ratos

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, sex, condition, and genetic background of the emitting animal. Although many studies have characterized these differences, whether receiver mice can discriminate among objectively different USVs and show preferences for particular sound traits remains to be elucidated. To determine whether mice can discriminate between different characteristics of USVs, a playback experiment was developed recently, in which preference responses of mice to two different USVs could be evaluated in the form of a place preference.
First, USVs from mice were recorded. Then, the recorded USVs were edited, trimmed accordingly, and exported as stereophonic sound files. Next, the USV amplitudes generated by the two ultrasound emitters used in the experiment were adjusted to the same sound pressure level. Nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitters were used to play the USVs back. Finally, to investigate the preference of subject mice to selected USVs, pairs of two differing USV signals were played back simultaneously in a two-choice test box. By repeatedly entering a defined zone near an ultrasound emitter and searching the wire mesh in front of the emitter, the mouse reveals its preference for one sound over another. This model allows comparing the attractiveness of the various features of mouse USVs, in various contexts.

Ultrasonic vocalizations (USVs) in mice differ depending on age, sex, condition, and genetic background. Using two ultrasound emitters broadcasting simultaneously in different locations, this two-choice test can evaluate murine recognition and preference responses to different characteristics of USVs.

Determinando Preferências Ultrasonic vocalização em ratos utilizando um teste de reprodução de dois escolha

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

A Dimensão Social do Stress: Manipulações experimentais de apoio social e de identidade social no Trier Social Stress Teste

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

O psicomotora Teste Rodent Vigilância (rPVT): um método para avaliar Neurobehavioral Desempenho em ratos e camundongos

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little research to reveal the possible mechanisms behind these effects. To investigate the effect of acupuncture on epilepsy and sleep, several issues need to be addressed. The first is to identify the acupoints, which correspond between humans, rats, and mice. Furthermore, the depth of insertion of the acupuncture needle, the degree of needle twist in manual needle acupuncture, and the stimulation parameters for electroacupuncture (EA) need to be determined. To evaluate the effects of acupuncture on epilepsy and sleep, a feasible model of epilepsy in rodents is required. We administer pilocarpine into the left central nucleus of the amygdala (CeA) to simulate focal temporal lobe epilepsy (TLE) in rats. Intraperitoneal (IP) injection of pilocarpine induces generalized epilepsy and status epilepticus (SE) in rats. Five IP injections of pentylenetetrazol (PTZ) with a one-day interval between each injection successfully induces spontaneous generalized epilepsy in mice. Recordings of electrocorticograms (ECoGs), electromyograms (EMGs), brain temperature, and locomotor activity are used for sleep analysis in rats, while ECoGs, EMGs, and locomotor activity are employed for sleep analysis in mice. ECoG electrodes are implanted into the frontal, parietal, and contralateral occipital cortices, and a thermistor is implanted above the cerebral cortex by stereotactic surgery. EMG electrodes are implanted into the neck muscles, and an infrared detector determines locomotor activity. The criteria for categorizing vigilance stages, including wakefulness, rapid eye movement (REM) sleep, and non-REM (NREM) sleep are based on information from ECoGs, EMGs, brain temperature, and locomotor activity. Detailed classification criteria are stated in the text.

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms ECoGs and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

This paper demonstrates the performance of acupuncture, epilepsy models, and the analysis of sleep in rodents. The acupuncture procedure and the identification of acupoints are described. Pilocarpine or pentylenetetrazol (PTZ) is used to induce epilepsy. Electrocorticogram (ECoG), electromyogram (EMG), brain temperature, and locomotor activity recordings are employed for sleep analysis.

Manipulação de epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) e do sono em ratos e camundongos por Acupuntura

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is fairly simple and can be completed over 3 days: habituation day, training day, and testing day. During training, the mouse is allowed to explore 2 identical objects. On test day, one of the training objects is replaced with a novel object. Because mice have an innate preference for novelty, if the mouse recognizes the familiar object, it will spend most of its time at the novel object. Due to this innate preference, there is no need for positive or negative reinforcement or long training schedules. Additionally, the ORT can also be modified for numerous applications. The retention interval can be shortened to examine short-term memory, or lengthened to probe long-term memory. Pharmacological intervention can be used at various times prior to training, after training, or prior to recall to investigate different phases of learning (i.e., acquisition, early or late consolidation, or recall). Overall, the ORT is a relatively low-stress, efficient test for memory in mice, and is appropriate for the detection of neuropsychological changes following pharmacological, biological, or genetic manipulations.

The object recognition test (ORT) is a simple and efficient assay for evaluating learning and memory in mice. The methodology is described below.

Teste de reconhecimento de objeto romance para a investigação da aprendizagem e memória em ratos

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

Reducing State Anxiety Using Working Memory Maintenance

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working Memory (WM) and the threat of shock paradigms. In the Sternberg WM paradigm, subjects are required to maintain a series of letters in the WM for a brief interval and respond by identifying whether the position of a given letter in the series matches a numerical prompt. In the threat of shock paradigm, subjects are exposed to alternating blocks where they are either at risk of receiving unpredictable presentations of a mild electric shock or are safe from the shock. Anxiety is probed throughout the safe and threat blocks using the acoustic startle reflex, which is potentiated under threat (Anxiety-Potentiated Startle (APS)). By conducting the Sternberg WM paradigm during the threat of shock and probing the startle response during either the WM maintenance interval or the intertrial interval, it is possible to determine the effect of WM maintenance on APS.

This protocol demonstrates how to measure anxiety-potentiated startle during the Sternberg Working Memory paradigm.

Reduzindo a Ansiedade do Estado Usando a Manutenção da Memória de Trabalho

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Testes Animal ansiedade em ratos: efeitos de bordas de braço aberto e fechado do braço de parede transparência em elevados além de teste de labirinto

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...