Создание модели заживления лунки для извлечения нижней челюсти мышей

Резюме

Этот протокол демонстрирует пошаговые инструкции по извлечению первого моляра нижней челюсти у мыши. Он предоставляет альтернативный метод для исследователей, занимающихся заживлением и регенерацией челюстной кости.

Аннотация

В этом исследовании представлена разработка модели молярной экстракции в нижней челюсти мышей, чтобы обеспечить практическую модель для изучения регенерации альвеолярной кости и интрамембранозного окостенения. Мыши C57 / J6 были использованы для извлечения первого моляра нижней челюсти, чтобы создать эту модель. Они были усыплены, а двусторонние челюсти собраны через 1 неделю и 4 недели после операции соответственно. Последующий серийный стереоскопический сбор, гистологическая оценка и иммунофлюоресцентное окрашивание были выполнены, чтобы продемонстрировать успешную операцию. Сразу после операции на стереоскопических изображениях было видно пустое гнездо для экстракции. Гематоксилин и эозин (H&E) через 1 неделю и окрашивание по Массону через 4 недели после операции показали, что область исходного корня была частично и полностью заполнена костными трабекулами соответственно. Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что по сравнению со стороной гомеостаза экспрессия Sp7 увеличилась через 1 неделю после операции, что свидетельствует о энергичном остеогенезе в альвеолярной ямке. Все эти результаты продемонстрировали практическую модель заживления лунки при удалении зуба у мышей. Предстоящие исследования, раскрывающие механизмы заживления дефекта челюстной кости или заживления лунки, могут использовать этот метод.

Введение

Заживление лунки после удаления зуба является распространенным клиническим сценарием, который может привести к нехарактерным осложнениям, таким как кровоизлияние в лунку, сухая лунка или даже остеомиелит челюсти при нежелательном заживлении ^1,2,3. Эти сопутствующие заболевания могут ухудшить качество жизни пациентов и, что еще хуже, серьезно затруднить протезную реабилитацию из-за массивной потери костной массы⁴. Несмотря на то, что этапы заживления лунки были выяснены, они недостаточны для непосредственной клинической помощи после операции по удалению....

протокол

Все процедуры на животных в этом исследовании были рассмотрены и одобрены Этическим комитетом Западно-Китайской школы стоматологии Сычуаньского университета (WCHSIRB-D-2017-041). Взрослые мыши C57BL/6, полученные из коммерческого источника (см. Таблицу материалов), были использованы для настоящего исследования.

1. Предоперационная подготовка

1. Подготовка инструмента
   1. Подготовьте различные иглы одноразовых шприцев (26G, 25G, 23G; см. Таблицу материалов) для использования в качестве элеваторов. Наклоните головку иглы примерно на 20°-40°, как показано на рису....

Результаты

Чтобы прояснить практическое использование этого метода, был извлечен первый моляр правой нижней челюсти двух здоровых мышей C57BL / 6 (3 месяца, обе самки) и наблюдался в течение 1 недели и 4 недель соответственно. Неповрежденные левые челюсти использовались в качестве здоровой контрольно?.......

Обсуждение

Модель заживления мышиной лунки является важным методом для раскрытия основных механизмов заживления и регенерации костей, что в конечном итоге решает клинические проблемы. Существующие исследования продемонстрировали возможность модели экстракции резцов и модели экстракции верхн.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
23/25/26 G needle	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.	SB1-074(IV)
C57/B6J	Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China	C57/B6J
DAPI Staining Solution	Beyotime	Cat#C1005
Embedding Cassettes	CITOTEST Scientific	80106-1100-16
Hematoxylin and Eosin Stain Kit	Biosharp	BL700B
Isoflurane	RWD Life Science Co.,Ltd	R510-22-10
Masson’s Trichrome Stain Kit	Solarbio	G1340
Microtome	Leica	RM2235
Pentobarbital Sodium	Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd	2018042001
Rabbit polyclonal	anti-Sp7	Abcam Cat# ab22552
Tweezers	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.	SB2-115