Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Этот протокол реализует систему стереокамер, откалиброванную с использованием прямого линейного преобразования для захвата трехмерных смещений in-situ растянутых периферических нервов. Захватывая эти смещения, можно определить деформацию, вызванную при различной степени растяжения, что информирует о пороговых значениях травм при растяжении, которые могут продвинуть науку о восстановлении нервов, зависящих от растяжения.
Периферические нервы подвергаются физиологическому и нефизиологическому растяжению во время развития, нормального движения суставов, травм, а в последнее время и во время хирургического вмешательства. Понимание биомеханической реакции периферических нервов на растяжение имеет решающее значение для понимания их реакции на различные условия нагрузки и, таким образом, для оптимизации стратегий лечения и хирургических вмешательств. В этом протоколе подробно описан процесс калибровки стереокамеры с помощью прямого линейного преобразования и отслеживания трехмерного смещения периферических нервов в тканях in-situ во время растяжения, полученного из трехмерных координат видеофайлов, захваченных откалиброванной стереокамерой.
По полученным трехмерным координатам можно рассчитать длину нерва, изменение длины нерва и процент деформации по времени для растянутого периферического нерва. Использование стереокамеры обеспечивает неинвазивный метод захвата трехмерных смещений периферических нервов при растяжении. Прямое линейное преобразование позволяет трехмерно реконструировать длину периферических нервов во время растяжения для измерения деформации. В настоящее время не существует методологии для изучения деформации растянутых периферических нервов in situ с использованием стереокамеры, откалиброванной с помощью прямого линейного преобразования. Учет деформации периферических нервов in situ при растяжении может не только помочь клиницистам в понимании основных механизмов повреждения нервов при чрезмерном растяжении, но и помочь оптимизировать стратегии лечения, основанные на вмешательствах, вызванных растяжением. Методология, описанная в статье, может улучшить наше понимание биомеханики периферических нервов в ответ на растяжение для улучшения результатов лечения пациентов в области лечения и реабилитации при повреждении нервов.
Периферические нервы (ПН) подвергаются растяжению во время развития, роста, нормальной подвижности суставов, травм и хирургических операций1. ПН проявляют вязкоупругие свойства для защиты нерва при регулярных движениях 2,3 и поддержания структурного здоровья его нервных волокон2. Поскольку было показано, что реакция ПН на механическое растяжение зависит от типа повреждения нервных волокон4, повреждений прилегающих соединительных тканей 2,4 и подходов к тестированию (т.е. скорости или направления нагрузки)5,6,7,8,9,10,11,12,13,14важно различать биомеханические реакции ПН при нормальном диапазоне движений от нефизиологического диапазона как при медленном, так и при быстром растяжении. Это может способствовать пониманию механизма повреждения ПН в ответ на растяжение и помочь в своевременном и оптимизированном вмешательстве 1,4,15,16. В физиотерапии наблюдается растущая тенденция к оценке и вмешательству на основе взаимосвязи между физиологией нервов и биомеханикой. Понимая различия в биомеханике ПН при различных прикладываемых нагрузках, физиотерапевты могут быть лучше подготовлены к модификации текущих вмешательств17.
Имеющиеся биомеханические данные ПН в ответ на растяжение остаются непостоянными и могут быть отнесены к испытательному оборудованию и процедурам, а также различиям в анализе данных удлинения 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,16. Кроме того, измерение трехмерного (3D) смещения нерва in situ остается плохо описанным в доступной в настоящее время литературе. В предыдущих исследованиях использовались методы стереовизуализации для максимальной точности 3D-реконструкции смещения тканей капсул фасеточных суставов18,19. Метод прямого линейного преобразования (DLT) позволяет преобразовывать два или более двумерных (2D) вида в 3D-координаты реального мира (т.е. в мм)20,21,22. DLT обеспечивает высокоточный метод калибровки для систем стереоизображений, поскольку он позволяет точно реконструировать 3D-положения с учетом искажений объектива, параметров камеры и координат изображения, а также обеспечивает гибкость при настройке стереокамер 20,21,22. Исследования с использованием откалиброванных DLT стереокамер обычно используются для изучения локомоции и анализа походки22,23. Этот протокол призван предложить подробную методологию для определения деформации ПН in situ при различной степени растяжения с использованием откалиброванной DLT системы стереокамер и программного обеспечения для слежения с открытым исходным кодом22.
Все описанные процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Университета Дрекселя. Неонатальный поросенок был приобретен на ферме, одобренной Министерством сельского хозяйства США (USDA), расположенной в Пенсильвании, США.
1. Настройка системы стереоизображения
Рисунок 1: Система стереокамер . (A) Параллельная система стереокамер с двумя камерами (левая и правая камеры), разделенными базовой линией 63 мм. (B) Схема системы стереокамер и установки стойки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
2. Система стереовизуализации DLT Калибровка-оцифровка громкости 3D управления
Рисунок 2: Трехмерное управление громкостью и дигитайзер с ножной педалью. (A) Схема 3D регулировки громкости. (B) Компоненты дигитайзера с ножной педалью используются для оцифровки 3D управления объемом для получения координат (x, y, z) в мм. Сокращение: 3D = трехмерный. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
3. Калибровка системы стереокамер - генерация коэффициентов прямого линейного преобразования
Рисунок 3: Схема получения трехмерного управляющего объема с помощью стереокамеры для прямой калибровки линейного преобразования. (A) Прикрепите стереокамеру к подставке, а затем подключите ее к ноутбуку с помощью кабеля USB type-C. Поместите регулятор громкости 3D на расстоянии 6 см под системой стереокамеры. (B) С помощью программного обеспечения для обработки изображений сделайте изображение 3D-объема управления. Выходное изображение представляет собой объединенное изображение с левой и правой камер. (C) С помощью пользовательского кода MATLAB объединенное выходное изображение разделяется на отдельные левое и правое изображения 3D-регуляторного объема. Сокращение: 3D = трехмерный. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 4: Схема для генерации коэффициентов прямого линейного преобразования для левого и правого видов камеры системы визуализации стереокамеры. (A) Запустите DLTcal5.m22, нажмите кнопку «Инициализировать » в окне управления и выберите файл *.csv с оцифрованными (x, y, z) координатами (в мм) объема 3D-управления. (B) Выберите калибровочное изображение для вида с левой камеры. Затем выберите точки на изображении в том же порядке, в котором они были оцифрованы. Затем нажмите кнопку Вычислить коэффициенты , чтобы создать коэффициенты DLT для вида с левой камеры. Затем нажмите « Добавить камеру », чтобы повторить шаги для правого вида камеры. (C) Выберите калибровочное изображение для правого вида камеры. Затем выберите точки на изображении в том же порядке, в котором они были оцифрованы. Затем нажмите кнопку « Вычислить коэффициенты », чтобы создать коэффициенты DLT для правого вида камеры. (D) Нажмите «Сохранить данные », чтобы выбрать каталог для сохранения коэффициентов DLT для левого и правого видов камеры. Введите имя выходного файла и нажмите OK , и коэффициенты DLT будут сохранены в виде файла *.csv. Сокращение: 3D = трехмерное и DLT = прямое линейное преобразование. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
4. Сбор данных
Рисунок 5: Репрезентативная схема для сбора данных о растяжении периферических нервов. (A) Прикрепите стереокамеру к подставке, а затем подключите ее к ноутбуку с помощью кабеля USB type-C. Разместите стереокамеру на расстоянии до 6 см над периферическим нервом. (B) Периферический нерв зажимается к механической установке на дистальном конце. Используя кожный маркер на основе чернил, поместите маркер на места введения и зажима и еще два-четыре маркера по длине нерва. Физиологический раствор впрыскивается на периферический нерв для поддержания его гидратации до, во время и после тестирования. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
5. Анализ данных - отслеживание траектории маркера
Рисунок 6: Схема для настройки нового проекта, чтобы начать отслеживание трехмерной траектории. (A) Запустите DLTdv7.m22 и нажмите кнопку Новый проект , чтобы начать новый проект. (B) Выберите 2 в качестве количества видеофайлов. (C) Выберите файл Video 1 (т. е. вид с левой камеры), а затем выберите Video 2 file (т. е. вид с правой камеры). (D) Выберите «Да », так как видеофайлы поступают с откалиброванной стереокамеры DLT. Затем выберите файл *.csv, содержащий коэффициенты DLT. (E) Выбранные видеофайлы теперь готовы к отслеживанию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
Клавиша/Щелчок | Описание |
Щелчок левой кнопкой мыши | Траектория траектории точки в кадре, по которой кликнули |
(+) Ключ | Увеличивает текущий видеокадр в указателе |
(-) Ключ | Увеличивает текущий кадр видео по указателю mosue |
(i) Ключ | Переместить точку вверх |
j) Ключ | Переместить точку влево |
k) Ключ | Переместить точку вправо |
m) Ключ | Переместить точку вниз |
Таблица 1: Сочетания клавиш и мыши для траектории точки слежения.
Рисунок 7: Схема размещения начальных точек на маркерах тканей для Видео 1 и Видео 2 с помощью DLTdv7.m22. (A) Установите текущую точку равной 1. Поместите точку 1 на маркер вставки на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 1 на маркер введения. (B) Установите текущую точку на 2. Поместите точку 2 на маркер 1 на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 2 на маркер 1. (C) Установите текущее значение 3. Поместите точку 3 на маркер 2 на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 3 на маркер 2. (D) Установите текущую точку на 4. Поместите точку 4 на маркер 3 на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 4 на маркер 3. (E) Установите текущее значение 5. Поместите точку 5 на маркер 4 на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 5 на маркер 4. (F) Установите текущую точку на 6. Поместите точку 6 на маркер зажима на видео 1. Используя синюю эпиполярную линию на видео 2, поместите точку 6 на маркер зажима. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 8: Схема отслеживания траекторий маркерных точек Видео 1 с помощью DLTdv7.m22. (A) Установите номер кадра равным 1, текущую точку равным 1, режим автослежения — автопродвижением, а автотрек-предиктор — расширенным Калманом. (B) Установите текущую точку равной 1. В файле Video 1 начните отслеживать смещение маркера вставки (т.е. точки 1), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (C) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 2. В файле Video 1 начните отслеживание смещения маркера 1 (т.е. точки 2), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (D) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 3. В файле Video 1 начните отслеживание смещения маркера 2 (т.е. точки 3), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (E) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 4. В файле Video 1 начните отслеживание смещения маркера 3 (т.е. точки 4), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (F) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 5. На файле Video 1 начните отслеживание смещения маркера 4 (т.е. точки 5), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (G) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 6. В файле Видео 1 начните отслеживание смещения маркера зажима (т.е. точки 6), кликая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 9: Схема траектории маркерных точек видео 2 с помощью DLTdv7.m22. (A) Установите номер кадра на 1, текущую точку на 1, режим автослежения на автопродвижение, а автотрек предиктора на расширенный Калман. (B) Установите текущую точку равной 1. Используя синюю эпиполярную линию в файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера вставки (т.е. точки 1), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (C) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 2. Используя синюю эпиполярную линию на файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера 1 (т.е. точки 2), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (D) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 3. Используя синюю эпиполярную линию на файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера 2 (т.е. точки 3), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (E) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 4. Используя синюю эпиполярную линию на файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера 3 (т.е. точки 4), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (F) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 5. Используя синюю эпиполярную линию в файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера 4 (т.е. точки 5), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. (G) Установите номер кадра на 1 и текущую точку на 6. Используя синюю эпиполярную линию на файле Video 2 , начните отслеживать смещение маркера зажима (т.е. точки 6), щелкая левой кнопкой мыши кадр за кадром до последнего кадра. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.
6. Анализ данных - деформационный анализ
С помощью описанной методики получаются различные выходные файлы. DLTdv7.m *_xyzpts.csv (Supplemental File 12) содержит координаты (x, y, z) в миллиметрах каждой отслеживаемой точки на каждом временном интервале, которые в дальнейшем используются для вычисления длины, изменения длины и деформации ?...
Исследования, сообщающие о биомеханических свойствах периферических нервов (ПН) из-за растяжения, варьируются, и эти различия могут быть связаны с методологиями тестирования, такими как испытательное оборудование и анализ удлинения 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,16,24 <...
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Это исследование было поддержано финансированием Национального института детского здоровья и развития человека имени Юнис Кеннеди Шрайвер Национальных институтов здравоохранения под названием Award Number R15HD093024 и R01HD104910A и NSF CAREER Award Award Number 1752513.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Clear Acrylic Plexiglass Square Sheet | W W Grainger Inc | BULKPSACR9 | Construct three-dimensional control volume |
Stereo-imaging camera system - ZED Mini Stereo Camera | StereoLabs Inc. | N/A | N/A |
Imaging Software - ZED SDK | StereoLabs Inc. | N/A | N/A |
Maintence Software - CUDA 12 | StereoLabs Inc. | N/A | Download to run ZED SDK |
Camera stand - Cast Iron Triangular Support Stand with Rod | Telrose VWR Choice | 76293-346 | N/A |
MicroSribe G2 Digitizer with Immersion Foot Pedal | SUMMIT Technology Group | N/A | N/A |
Proramming Software - MATLAB | Mathworks | N/A | version 2019A or newer |
DLTcal5.m | Hedrick lab | N/A | Open Source |
DLTdv7.m | Hedrick lab | N/A | Open Source |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены