Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Мы описываем общий протокол, который объединяет масс-спектрометрический анализ высокого разрешения и молекулярный докинг в исследованиях традиционной китайской медицины.

Аннотация

Разделение и анализ желаемых химических компонентов являются важными предметами для фундаментальных исследований традиционной китайской медицины (ТКМ). Сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография квадрупольная времяпролетная тандемная масс-спектрометрия (UPLC-Q-TOF-MS/MS) постепенно стала ведущей технологией для идентификации ингредиентов ТКМ. Gynura bicolor DC. (BFH), многолетнее бесстебельное травянистое растение, используемое в медицине и пищу в Китае, обладает лечебными эффектами, такими как снятие тепла, увлажнение легких, облегчение кашля, рассеивание стазиса и снятие отеков. Полифенолы и флавоноиды содержат многочисленные изомеры, которые затрудняют идентификацию сложных соединений в БФГ. В данной работе представлен систематический протокол изучения химических составляющих BFH на основе экстракции растворителем и интегрированных данных с помощью UPLC-Q-TOF-MS.

Описанный здесь метод включает в себя систематические протоколы предварительной обработки образца, калибровки МС, сбора МС, обработки данных и анализа результатов. Предварительная обработка образцов включает в себя сбор, очистку, сушку, дробление и экстракцию. Калибровка MS состоит из многоточечной и одноточечной коррекции. Обработка данных включает в себя импорт данных, установление метода, обработку анализа и представление результатов. В данной работе представлены репрезентативные результаты типичной картины фрагментации фенольных кислот, сложных эфиров и гликозидов в Gynura bicolor DC. (BFH). Кроме того, подробно обсуждаются выбор органических растворителей, экстракция, интеграция данных, выбор энергии столкновений и совершенствование метода. Этот универсальный протокол может быть широко использован для идентификации сложных соединений в ТКМ.

Введение

Традиционная китайская медицина (ТКМ) клинически практикуется в Китае на протяжении тысячелетий, и она играет жизненно важную роль в поддержании здоровья китайцев. Состав ТКМ разнообразен и сложен, и ТКМ широко освещалась во многих качественных исследованиях, посвященных химическомусоставу. Химические компоненты ТКМ можно условно разделить на следующие категории, такие как алкалоиды, органические кислоты, фенилпропаноиды, кумарины, лигнаны, хиноны, флавоноиды, терпеноиды, тритерпеноидные сапонины, стероидные сапонины, сердечные гликозиды и дубильныевещества. Учиты....

протокол

1. Предварительная обработка образца

  1. Промойте всю траву БФГ в чистой воде до тех пор, пока не останется видимых отложений и загрязнений. Поместите чистый BFH в посуду, а затем поставьте в духовку (Рисунок 1B). Установите духовку на 50 °C на 24 часа.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Весь завод BFH был собран в провинции Сычуань, Китай.
  2. Дробление высушенной BFH в высокоскоростной многофункциональной дробилке. Переложите крупный порошок в сито с плотностью 50 меш (рисунок 1C). Соберите мелкий порошок в герметичный пакет и храните его в сушильной башне.
  3. <....

Результаты

Идентификация химического состава BFH была использована в качестве модели для отображения репрезентативных результатов. Базовые пиковые хроматограммы экстрагированной растворителем Gynura bicolor DC. показаны в Дополнительном файле 1-Дополнительный рисунок S1-S6

Обсуждение

Помимо водного отвара12, еще одним распространенным методомпредварительной обработки ТКМ является экстракция органическим растворителем. В соответствии с принципом растворения в аналогичной фазе путем комбинации различных органических р?.......

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа финансировалась Национальным фондом естественных наук Китая (82104881), Группой по наследованию и инновациям ТКМ по лечению иммунных заболеваний, Медицинским научно-исследовательским проектом Чунцина (совместный проект Комиссии по здравоохранению Чунцина и Бюро по науке и технике) (2022DBXM007), Специальным проектом по стимулированию и руководству производительностью Чунцинского научно-исследовательского института (cstc2022jxjl120005), Специальным проектом для Фонда постдокторантуры Чунцина (2022CQBSHTB3035), Программа старших медицинских талантов Чунцина для молодых людей и людей среднего возраста, Программа для научных у....

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
chloroformSinopharm Chemical ReagentCo., LtdCAS 67-66-3
ethanolChuandongChemicalCAS 64-17-5
ethyl acetateChuandongChemicalCAS 141-78-6
liquid chromatographWatersACQUITY Class 1 plus
MassLynxWatersV4.2MS control software
n-butyl alcoholChuandongChemicalCAS 71-36-3
petroleum etherChuandongChemicalCAS 8032-32-4
Quadrupole time-of-flight mass spectrometryWatersSYNAPT XS
UNIFIWatersData analysis software

Ссылки

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

Gynura bicolor DCUPLC Q TOF MS MS

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены