Начните с соответствующего разведения лекарственных препаратов на основе моноклональных антител для обогащения белка клетки-хозяина. Для разведения лекарственных препаратов с концентрациями выше 50 миллиграмм на миллилитр добавляют деионизированную воду к 15 миллиграммам моноклонального антитела в двухмиллилитровой микроцентрифужной пробирке. Для лекарственных препаратов с концентрацией ниже 50 миллиграмм на миллилитр переносят 20 миллиграммов в 10-килодальтонное центробежное фильтрующее устройство.
Центрифугируйте содержимое при 14 000 G в течение 25 минут при комнатной температуре, чтобы в пробирке оставалось примерно 100 микролитров раствора. Затем добавьте в фильтр 350 микролитров 10-миллимолярного гистидинового буфера с рН 6, после чего перемешайте пробирку перед центрифугированием при 14 000 G в течение 25 минут при комнатной температуре. Переверните фильтр и поместите его в пробирку для сбора проб.
Центрифугируют образец при 1000 G в течение пяти минут при комнатной температуре, извлекая весь раствор в пробирку для сбора. Добавьте 200 микролитров 10-миллимолярного гистидинового буфера в фильтр и пипетируйте вверх и вниз, чтобы восстановить оставшийся образец белка. Перелейте весь раствор в ту же сборную пробирку.
Вихрь и вращение, как было показано ранее. После измерения концентрации образца нанокаплей отрегулируйте ее до 50 миллиграммов на миллилитр, добавив буфер гистидина. Наконец, перелейте 300 микролитров образца в двухмиллилитровую пробирку для микроцентрифуги.
