Общая цель этого исследования заключается в изучении влияния травмы спинного мозга на динамику развития язвы давления и исцеления в животной модели. Основным преимуществом этой техники является то, что она не ухудшает движения животных, а очень воспроизводима. Эта модель предоставляет платформу для изучения динамики заживления ран и тестирования различных терапевтических стратегий для пациента SCI.
Перед началом процедуры обеспечить правильную анестезию из-за отсутствия реакции на щепотку хвоста. Бритье волос на спину с электрическим клипером. Затем нанесите крем для депиляатора и оставьте на три минуты, чтобы удалить оставшиеся волосы.
Через три минуты удалить крем для депиляния с мокрым скрабом и мыть спину аналогичным образом. А потом вернуть животных в свои клетки. На следующий день обезболить животных и применить офтальмологическую мазь к роговицам, чтобы защитить глаза от высыхания во время хирургической процедуры.
Затем скраб кожи животных три раза каждый с бетадин скраб и 70% этанола. Перед разрезом используйте шприц с иглой 25 калибра для введения 100 микролитров 0,125%bupivacaine вокруг места разреза в качестве анальгезии. Отчитайтесь от плавающих ребер, которые соответствуют T13 для идентификации T8 до T12.
После создания от одного до 1,5 сантиметра разреза, вдоль средней линии, на спине, на уровне T8 до T12 позвонков очистить подкожной жировой ткани для доступа к параспинам мышц. А затем вскрыть их медленно, чтобы разоблачить колючие процессы и ламина с обеих сторон. Очень важно сделать эту процедуру очень тщательно, чтобы избежать чрезмерного кровотечения и любой травмы спинного мозга.
Выполните ламинэктомию позвонков T9 до T10, чтобы разоблачить спинной мозг, мягко отслаиваясь от спинного ламина с помощью микро рассечения миппов. Используйте щипцов для обеспечения и подъема позвоночника на T8 преувеличивать искривление позвоночника. Затем используйте тонкие ножницы, чтобы срезать спинной мозг между позвонками T9 и T10 в пути к полу позвоночного канала, чтобы обеспечить полную перегиб.
После наблюдения за полной трансекцией под хирургическим микроскопом нанесите кусок подкожного жира на место ламинэктомии, чтобы обеспечить дополнительную защиту спинного мозга до закрытия хирургического участка. Наконец, закройте рану и шов парапозвоночных мышц и поверхностной фасции. Затем закройте кожу с помощью шовных зажимов.
Сразу после операции SCI скраб задней части животного с бетадином и 70% алкоголя. Для язвы давления ниже спинного мозга травмы сайта использовать 25 калибровочных иглы для введения 10 микролитров 0,125%bupivacaine раствор в эллипсе в спинной коже, рядом с крестцом, с точками 0,5 до одного сантиметра друг от друга. Аккуратно поднимите складку кожи на задней части мыши и сэндвич его между двумя магнитными дисками.
Сразу же после применения магнита вернуть животных в одиночные клетки, помещенные на грелку, пока не будет восстановлено полное сознание. Через 12 часов применения магнита слегка обезболите животное изофлюраном и удалите магниты. Сфотографируй раны сайтов для записи первоначального появления язвы давления в день нулевой точки времени.
Обложка раны с прозрачной пленкой, чтобы избежать высыхания или загрязнения. Одноместные животные после процедуры. Сразу после операции вводят животному один миллилитр 0,9% солевого раствора для увлажнения и бупренорфин SR для анальгезии.
Выполняем ручную эвакуацию мочевого пузыря два раза в день. Удалите хирургические зажимы через семь дней после операции по удалению травмы спинного мозга. Соберите раненые образцы кожи из усыпленной мыши в нужную точку времени после травмы спинного мозга и индукции язвы давления кожи.
Исправить в 10%формалин в течение 24 часов. Через 24 часа перенесите на 70% этанола и храните при четырех градусах по Цельсию до секции. На этом снимке изображено исчезновение эпидермиса у контрольного животного на третий день после удаления магнита.
Стрелки указывают на эпидермальные края раны, расположенные там, где истончается эпителиальная подкладка. В контрольном животном эпидермис появляется на седьмой день. Для ран, созданных ниже уровня SCI, у sci мышей, значительно медленнее миграции наблюдается.
Здесь, фигура изображает медленнее заживления ран и закрытия в SCI мышей по сравнению с контрольных мышей. Иммуностимунирование для Ki67, маркера размножающихся клеток, указанных красными стрелками, выявило меньшее распространение в группе SCI. Окрашивание для CD31, маркера кровеносных сосудов, указанного красными стрелками, выявило более низкую плотность кровеносных сосудов в группе SCI.
Наконец, иммуностимулятор для альфа-гладкой мышцы актин показал более низкие уровни этого белка в ранах кожи от SCI мышей. При попытке этой процедуры важно помнить, чтобы поместить магниты должным образом развивать две круглые раны, разделенные нетронутой кожей. Это уменьшит изменчивость в развитии ран и заживлении ран.
Язвы давления кожи у пациентов с травмами спинного мозга придают значительные расходы системе здравоохранения США. Эта модель животных предоставляет платформу для тестирования различных терапевтических стратегий, чтобы помочь заживлению язвы давления у пациентов с травмами спинного мозга.
