Bu çalışmanın genel amacı, omurilik yaralanmasının bir hayvan modelinde basınç ülseri gelişimi ve iyileşme dinamikleri üzerindeki etkisini incelemektir. Bu tekniğin en büyük avantajı hayvan hareketlerini bozmuyor olması ve çok tekrarlanabilir olmasıdır. Bu model yara iyileşmesi dinamiklerini incelemek ve SCI hasta için çeşitli tedavi stratejileri test etmek için bir platform sağlar.
İşleme başlamadan önce bir kuyruk tutam yanıt eksikliği ile uygun anestezi sağlamak. Bir elektrikli makas ile dorsum üzerinde saç tıraş. Sonra tüy dökücü krem uygulayın ve kalan saç kaldırmak için üç dakika bekletin.
Üç dakika sonra ıslak fırçalama ile tüy dökücü krem çıkarın ve benzer dorsum yıkayın. Sonra da hayvanları kafeslerine geri döndürün. Ertesi gün hayvanları anestezi ve cerrahi işlem sırasında kurumasını gözleri korumak için kornealara oftalmik merhem uygulayın.
Daha sonra, hayvan derisi nin her biri betadine scrub ve %70 etanol ile üçer kez temizleyin. Kesiden önce, insizyon bölgesinin etrafına analjezi olarak 100 mikrolitre 0,125% bupivacaine enjekte etmek için 25 gauge iğneli bir şırınga kullanın. T8'i T12'ye tanımlamak için T13'e karşılık gelen yüzen kaburgalardan geriye doğru sayın.
Bir ila 1.5 santimetrelik bir kesi oluşturduktan sonra, orta hatta, arka, T8 t12 omurlar düzeyinde paraspinal kaslara erişmek için deri altı yağ dokusu temizleyin. Ve sonra her iki tarafta spinous süreçleri ve lamina ortaya çıkarmak için yavaş yavaş onları incelemek. Aşırı kanama ve omurilik herhangi bir yaralanma önlemek için çok dikkatli bir şekilde bu işlemi yapmak çok önemlidir.
Mikro diseksiyon forceps kullanarak spinal laminayı yavaşça soyarak omuriliği ortaya çıkarmak için T9'dan T10 omurlarına laminektomi yapın. Omurilik eğriliğini abartmak için T8'deki omuriliği korumak ve kaldırmak için forseps kullanın. Daha sonra, tam transection sağlamak için vertebral kanal zemine t9 ve T10 omurları arasındaki omuriliği bölümlemek için ince makas kullanın.
Cerrahi mikroskop altında tam traneksiyon gözlemledikten sonra cerrahi site kapatma dan önce omurilik için ek koruma sağlamak için laminektomi site üzerinde deri altı yağ bir parça uygulayın. Son olarak, yara kapatın ve paravertebral kasları ve yüzeysel fasya dikiş. Sonra dikiş klipleri kullanarak cildi kapatın.
SCI ameliyatından hemen sonra betadin ve %70 alkol ile hayvanın arkasını ovun. Omurilik yaralanması sitenin altında bir basınç ülseri için dorsal deride bir elips içinde 0.125% bupivacaine çözeltisi 10 mikrolitre enjekte etmek için 25 gauge iğne kullanın, saksrum yakın, noktaları 0.5 ila bir santimetre arayla. Farenin arkasına bir deri katını hafifçe kaldırın ve iki manyetik diskin arasına sıkıştırın.
Mıknatıs uygulamasından hemen sonra tam bilinçlilik yeniden kazanılına kadar hayvanları ısıtma yastığına yerleştirilen tek kafeslere geri döndürün. Mıknatıs uygulama 12 saat sonra hafifçe isofluran eile hayvan anestezik ve mıknatıslar çıkarın. Gün sıfır saat noktasında basınç ülserinin ilk görünümünü kaydetmek için yara sitelerinin bir fotoğraf çekmek.
Kurumasını veya kirlenmesini önlemek için yarayı şeffaf pansuman filmi ile kapatın. Prosedürü takip eden tek kişilik hayvanlar. Ameliyattan hemen sonra hayvana bir mililitre sıvı ve buprenorfin SR analjezi için %0.9 tuzlu su enjekte edin.
Günde iki kez manuel mesane tahliyegerçekleştirin. Omurilik yaralanması ameliyatından yedi gün sonra cerrahi klipleri çıkarın. Omurilik yaralanması ve deri basıncı ülser indüksiyonu sonrası istenilen zaman noktasında ötenazi fareden yaralı deri örnekleri toplayın.
24 saat boyunca %10 formalin düzeltin. 24 saat sonra% 70 etanol aktarın ve bölümleme kadar dört derece santigrat de saklayın. Bu resim, mıknatıs sonrası kaldırmanın üçüncü gününde bir kontrol hayvanındaki epidermisin kayboluşunu gösteriyor.
Oklar epitel astarın inceldiği yerde bulunan epidermal yara kenarlarını gösterir. Kontrol hayvanında epidermis yedinci güne kadar tekrar ortaya çıkar. SCI seviyesinin altında oluşan yaralar için, SCI farelerde, önemli ölçüde daha yavaş göç görülür.
Burada, şekil kontrol farelerile karşılaştırıldığında SCI farelerde daha yavaş yara iyileşmesi ve kapanması nı betimlener. Ki67 için immünboyama, kırmızı oklar tarafından gösterilen çoğalan hücrelerin bir belirteç, SCI grubunda daha az çoğalma ortaya. Cd31 için boyama, kırmızı oklar ile belirtilen kan damarları için bir belirteç, SCI grubunda düşük kan damarı yoğunluğu ortaya.
Son olarak, alfa düz kas aktin için immünboyama SCI fareler deri yaraları bu proteinin daha düşük seviyelerde ortaya. Bu işlemi denerken, bozulmamış deri ile ayrılmış iki dairesel yara geliştirmek için mıknatısları düzgün bir şekilde yerleştirmeyi unutmamak önemlidir. Bu yara gelişimi ve iyileşmesi nde değişkenlik azaltacaktır.
Omurilik yaralanması hastalarında deri basıncı ülserleri ABD sağlık sistemine önemli maliyetler vermek. Bu hayvan modeli omurilik yaralı hastalarda basınç ülser iyileşmesine yardımcı olmak için çeşitli tedavi stratejileri test etmek için bir platform sağlar.
