Этот протокол предполагает, что физический метод может быть принят, чтобы помочь в выяснении биологических проблем. Данная методика предусматривает способ помещения материала в насекомых с минимальным разрезом и изучения влияния микрохирургии на развитие особей. Этот метод может применяться к другим личинкам чешуекрылых и другим частям насекомых, включая голову и грудную клетку.
Очень важно практиковаться в изготовлении разрезов в определенном материале и умело наложении швов. Начните с размещения личинок самцов Spodoptera litura на 4-й день 6-й звезды, или L6D4, на лед в течение 10-30 минут, чтобы держать их под наркозом во время операции. Поместите обезболенную личинку на восковой лоток спинной стороной вверх.
Зафиксируйте голову и хвост личинки булавками и нитками и продезинфицируйте хирургический участок, нанеся на эпидермис 3%-ную настойку ватным тампоном, а затем 70%-ную спиртовую. Сделайте разрез длиной 2 миллиметра на дорсальном эпидермисе в 9-м сегменте тела и используйте стерильный ватный тампон для удаления протекающих гемолимф и жировых тел, чтобы получить четкое представление о хирургической области. С помощью хирургического пинцета вставьте между яичками кусок алюминиевой фольги, а затем закройте эпидермис бегущим швом.
Завяжите хирургический квадратный узел с помощью игольчатого держателя и хирургического пинцета. Отрежьте ножницами лишний шов от хвостов петли, оставив после себя 2-миллиметровую нить. После наложения швов аккуратно укладывайте личинки в ящик для выращивания и поддерживайте их в чистой камере моделирования окружающей среды с непрерывным наблюдением.
Наблюдался рост и развитие личинок самцов Spodoptera litura после микрохирургии. Уровень смертности личинок был немного выше в хирургической группе, тогда как процент окукливания, появления взрослых и успешного спаривания был немного ниже в хирургической группе, чем в контрольной группе. В экспериментальной группе количество общих пучков сперматозоидов в пучках сперматозоидов эупирена и апирена было значительно ниже, чем в контрольной и фиктивной контрольной группе.
С другой стороны, процент пучков сперматозоидов эвпирена не имел существенных различий между всеми тремя группами. После удаления одностороннего яичка личинок количество общих пучков сперматозоидов и пучков сперматозоидов эвпирена и апирена в группах микрохирургии было значительно ниже, чем в контрольной группе. Процент пучков сперматозоидов эвпирена на шестой день стадии куколки был сопоставим во всех трех группах.
Очень важно заметить расположение раны и избежать повреждения других органов во время разреза. Этот метод может быть использован для изучения биологического значения слияния яичек путем нанесения лекарств на органы. Влияние лекарств на орган-мишень может быть изучено.
