Bu protokol, biyolojik sorunların çözülmesine yardımcı olmak için fiziksel bir yöntemin benimsenebileceğini göstermektedir. Bu teknik, minimum kesi ile böceklere materyal yerleştirmek ve mikrocerrahinin bireylerin gelişimi üzerindeki etkisini incelemek için bir yöntem sağlar. Bu yöntem, diğer Lepidoptera larvalarına ve baş ve toraks da dahil olmak üzere böceklerin diğer kısımlarına uygulanabilir.
Belirli malzemelerde kesi yapma ve ustaca dikiş atma pratiği yapmak çok önemlidir. Spodoptera litura erkek larvalarını 6. instarın 4. gününde veya L6D4'te, operasyon sırasında anestezi altında tutmak için 10 ila 30 dakika boyunca buz üzerine yerleştirerek başlayın. Anestezi uygulanmış larvaları balmumu tepsisine sırt tarafı yukarı bakacak şekilde yerleştirin.
Larvaların başını ve kuyruğunu pimler ve ipliklerle sabitleyin ve epidermise pamuklu çubukla% 3 iyot tentürü uygulayarak,% 70 alkol uygulayarak cerrahi alanı dezenfekte edin. 9. vücut segmentinde dorsal epidermis üzerinde 2 milimetre uzunluğunda bir kesi yapın ve cerrahi alanın net bir görünümünü elde etmek için sızan hemolenf ve yağ cisimciklerini çıkarmak için steril bir pamuklu çubuk kullanın. Cerrahi cımbız kullanarak, testislerin arasına bir parça alüminyum folyo yerleştirin ve ardından epidermisi çalışan bir dikişle kapatın.
Bir iğne tutucu ve cerrahi cımbız yardımıyla cerrahi bir kare düğüm bağlayın. Fazla dikişi ilmek kuyruklarından makasla kesin ve geride 2 milimetrelik bir iplik bırakın. Dikişten sonra, larvaları yavaşça yetiştirme kutusuna koyun ve sürekli gözlem ile temiz bir çevresel simülasyon odasında tutun.
Mikrocerrahi sonrası Spodoptera litura erkek larvalarının büyümesi ve gelişimi izlendi. Larva mortalite oranı cerrahi grupta biraz daha yüksekken, pupa yüzdesi, erişkin ortaya çıkışı ve başarılı çiftleşme oranları cerrahi grupta kontrol grubuna göre biraz daha düşüktü. Deney grubunda, öpiren ve apiren sperm demetlerindeki toplam sperm demetlerinin sayısı kontrol ve sahte kontrol grubuna göre anlamlı derecede düşüktü.
Öte yandan, öpiren sperm demetlerinin yüzdelerinin her üç grup arasında da anlamlı bir farkı yoktu. Larvaların tek taraflı testisleri çıkarıldıktan sonra, mikrocerrahi gruplarındaki toplam sperm demetlerinin ve öpiren ve apiren sperm demetlerinin sayısı kontrol grubundan anlamlı derecede düşüktü. Pupa evresinin altıncı gününde öpiren sperm demetlerinin yüzdesi her üç grupta da karşılaştırılabilirdi.
Yaranın yerini fark etmek ve kesi sırasında diğer organlara zarar vermekten kaçınmak çok önemlidir. Bu teknik, organlara ilaç uygulayarak testis füzyonunun biyolojik önemini incelemek için kullanılabilir. İlaçların hedef organ üzerindeki etkisi araştırılabilir.
