Dieses Protokoll legt nahe, dass eine physikalische Methode angewendet werden kann, um bei der Lösung biologischer Probleme zu helfen. Diese Technik bietet eine Methode, um Material in Insekten mit minimalem Schnitt zu platzieren und den Einfluss der Mikrochirurgie auf die Entwicklung von Individuen zu untersuchen. Diese Methode kann auf andere Lepidoptera-Larven und andere Teile der Insekten, einschließlich des Kopfes und des Thorax, angewendet werden.
Es ist sehr wichtig, Einschnitte in bestimmtes Material zu üben und geschickt zu nähen. Beginnen Sie damit, Spodoptera litura männliche Larven am Tag 4 des 6. Stadiums oder L6D4 für 10 bis 30 Minuten auf Eis zu legen, um sie während der Operation betäubt zu halten. Legen Sie die betäubte Larve mit der dorsalen Seite nach oben auf die Wachsschale.
Befestigen Sie den Kopf und den Schwanz der Larve mit Stiften und Fäden und desinfizieren Sie den Operationsbereich, indem Sie 3% Jodtinktur mit einem Wattestäbchen auf die Epidermis auftragen, gefolgt von 70% Alkohol. Machen Sie einen 2 Millimeter langen Schnitt an der dorsalen Epidermis am 9. Körpersegment und verwenden Sie ein steriles Wattestäbchen, um undichte Hämolymphe und Fettkörper zu entfernen, um eine klare Sicht auf den Operationsbereich zu erhalten. Legen Sie mit einer chirurgischen Pinzette ein Stück Aluminiumfolie zwischen die Hoden und schließen Sie dann die Epidermis mit einer laufenden Naht.
Binden Sie einen chirurgischen quadratischen Knoten mit Hilfe eines Nadelhalters und einer chirurgischen Pinzette. Schneiden Sie die überschüssige Naht mit einer Schere von den Schlaufenschwänzen ab und lassen Sie ein 2-Millimeter-Gewinde zurück. Legen Sie die Larve nach dem Nähen vorsichtig in die Aufzuchtbox und halten Sie sie in einer sauberen Umweltsimulationskammer mit kontinuierlicher Beobachtung.
Das Wachstum und die Entwicklung der männlichen Larven von Spodoptera litura nach der Mikrochirurgie wurden überwacht. Die Larvensterblichkeitsrate war in der chirurgischen Gruppe etwas höher, während die Prozentsätze der Verpuppung, des Erwachsenen-Emergenzes und der erfolgreichen Paarung in der chirurgischen Gruppe etwas niedriger waren als in der Kontrollgruppe. In der experimentellen Gruppe war die Anzahl der gesamten Spermienbündel in Eupyren- und Apyren-Spermienbündeln signifikant niedriger als in der Kontroll- und Scheinkontrollgruppe.
Auf der anderen Seite wiesen die Prozentsätze der Eupyren-Spermienbündel keine signifikanten Unterschiede zwischen allen drei Gruppen auf. Nach Entfernung eines einseitigen Hodens der Larven war die Anzahl der gesamten Spermienbündel und Eupyren- und Apyren-Spermienbündel in mikrochirurgischen Gruppen signifikant niedriger als in der Kontrollgruppe. Der Prozentsatz der Eupyren-Spermienbündel am sechsten Tag des Puppenstadiums war in allen drei Gruppen vergleichbar.
Es ist sehr wichtig, die Lage der Wunde zu bemerken und zu vermeiden, dass andere Organe während des Schnitts beschädigt werden. Diese Technik kann verwendet werden, um die biologische Bedeutung der Hodenfusion zu untersuchen, indem Medikamente auf die Organe aufgetragen werden. Die Wirkung der Medikamente auf das Zielorgan kann untersucht werden.
