Este protocolo sugere que um método físico pode ser adotado para auxiliar na desfísão de problemas biológicos. Esta técnica fornece um método para colocar material em insetos com incisão mínima e estudar a influência da microcirurgia no desenvolvimento dos indivíduos. Este método pode se aplicar a outras larvas lepidoptera e outras partes dos insetos, incluindo a cabeça e o tórax.
É muito importante praticar a confecção de incisões em determinado material e suturar habilmente. Comece colocando larvas masculinas Spodoptera litura no 4º dia da 6ª instar, ou L6D4, no gelo por 10 a 30 minutos para mantê-las anestesiadas durante a operação. Coloque a larva anestesiada na bandeja de cera com o lado dorsal para cima.
Fixar a cabeça e a cauda da larva com pinos e fios e desinfetar a área cirúrgica aplicando 3% de tintura de iodo com um cotonete na epiderme, seguido de 70% de álcool. Faça uma incisão de 2 milímetros de comprimento na epiderme dorsal no segmento do 9º corpo e use um cotonete estéril para remover o vazamento de hemoglifos e corpos de gordura para obter uma visão clara da área cirúrgica. Usando pinças cirúrgicas, insira um pedaço de papel alumínio entre os testículos e, em seguida, feche a epiderme com uma sutura em execução.
Amarre um nó quadrado cirúrgico com a ajuda de um suporte de agulha e pinça cirúrgica. Corte o excesso de sutura das caudas de loop com uma tesoura, deixando um fio de 2 milímetros para trás. Após a sutura, coloque delicadamente a larva na caixa de criação e mantenha-as em uma câmara de simulação ambiental limpa com observação contínua.
O crescimento e desenvolvimento das larvas masculinas Spodoptera litura pós-microcirurgia foi monitorado. A taxa de mortalidade larval foi ligeiramente maior no grupo cirúrgico, enquanto os percentuais de pupação, emergência adulta e acasalamento bem sucedido foram ligeiramente menores no grupo cirúrgico do que no grupo controle. No grupo experimental, o número de pacotes totais de esperma em pacotes de esperma de eupyrene e apirena foi significativamente menor do que o grupo de controle e controle falso.
Por outro lado, os percentuais de espermatozoides eupiresto não apresentaram diferenças significativas entre os três grupos. Após a remoção de um teste unilateral das larvas, o número de pacotes totais de espermatozoides e pacotes de esperma de eupiro e apirena em grupos de microcirurgia foram significativamente menores do que o grupo controle. A porcentagem de espermatozoides eupires no sexto dia do estágio pupal foi comparável nos três grupos.
É muito importante notar a localização da ferida e evitar danificar outros órgãos durante a incisão. Esta técnica pode ser usada para estudar a significância biológica da fusão testicular aplicando drogas aos órgãos. O efeito das drogas no órgão alvo pode ser explorado.
