Ce protocole suggère qu’une méthode physique peut être adoptée pour aider à résoudre les problèmes biologiques. Cette technique fournit une méthode pour placer du matériel chez les insectes avec un minimum d’incision et étudier l’influence de la microchirurgie sur le développement des individus. Cette méthode peut s’appliquer à d’autres larves de lépidoptères et à d’autres parties des insectes, y compris la tête et le thorax.
Il est très important de pratiquer de faire des incisions dans certains matériaux et de suturer habilement. Commencez par placer les larves mâles de Spodoptera litura au jour 4 de la 6e instar, ou L6D4, sur de la glace pendant 10 à 30 minutes pour les garder anesthésiées pendant l’opération. Placez la larve anesthésiée sur le plateau de cire avec la face dorsale vers le haut.
Fixez la tête et la queue de la larve avec des épingles et des fils et désinfectez la zone chirurgicale en appliquant de la teinture d’iode à 3% avec un coton-tige sur l’épiderme, suivie de 70% d’alcool. Faites une incision de 2 millimètres de long sur l’épiderme dorsal au niveau du 9ème segment du corps et utilisez un coton-tige stérile pour éliminer les corps hémolymphe et gras qui fuient afin d’obtenir une vue claire de la zone chirurgicale. À l’aide d’une pince à épiler chirurgicale, insérez un morceau de papier d’aluminium entre les testicules, puis fermez l’épiderme avec une suture courante.
Nouez un nœud carré chirurgical à l’aide d’un porte-aiguille et d’une pince à épiler chirurgicale. Coupez l’excès de suture des queues de boucle avec des ciseaux, en laissant un fil de 2 millimètres derrière. Après la suture, déposez doucement la larve dans la boîte d’élevage et maintenez-la dans une chambre de simulation environnementale propre avec une observation continue.
La croissance et le développement des larves mâles de Spodoptera litura après la microchirurgie ont été surveillés. Le taux de mortalité larvaire était légèrement plus élevé dans le groupe chirurgical, tandis que les pourcentages de nymphose, d’émergence adulte et d’accouplement réussi étaient légèrement plus faibles dans le groupe chirurgical que dans le groupe témoin. Dans le groupe expérimental, le nombre total de faisceaux de spermatozoïdes dans les faisceaux de spermatozoïdes d’eupyrène et d’apyrène était significativement inférieur à celui du groupe témoin et du groupe témoin simulé.
D’autre part, les pourcentages de faisceaux de spermatozoïdes d’eupyrène n’avaient pas de différences significatives entre les trois groupes. Après avoir retiré un testicule unilatéral des larves, le nombre total de faisceaux de spermatozoïdes et de faisceaux de spermatozoïdes d’eupyrène et d’apyrène dans les groupes de microchirurgie était significativement inférieur à celui du groupe témoin. Le pourcentage de faisceaux de spermatozoïdes d’eupyrène au sixième jour du stade nymphal était comparable dans les trois groupes.
Il est très important de remarquer l’emplacement de la plaie et d’éviter d’endommager d’autres organes pendant l’incision. Cette technique peut être utilisée pour étudier la signification biologique de la fusion testiculaire en appliquant des médicaments aux organes. L’effet des médicaments sur l’organe cible peut être exploré.
