انسداد الجراحة المجهرية لاندماج الخصيتين في Spodoptera litura

يقترح هذا البروتوكول أنه يمكن اعتماد طريقة فيزيائية للمساعدة في اكتشاف المشاكل البيولوجية. توفر هذه التقنية طريقة لوضع المواد في الحشرات مع الحد الأدنى من الشق ودراسة تأثير الجراحة المجهرية على نمو الأفراد. يمكن أن تنطبق هذه الطريقة على يرقات Lepidoptera الأخرى وأجزاء أخرى من الحشرات ، بما في ذلك الرأس والصدر.

من المهم جدا ممارسة إجراء شقوق في مواد معينة وخياطة بمهارة. ابدأ بوضع يرقات الذكور Spodoptera litura في اليوم 4 من النجم السادس ، أو L6D4 ، على الجليد لمدة 10 إلى 30 دقيقة لإبقائها مخدرة أثناء العملية. ضع اليرقة المخدرة على صينية الشمع مع الجانب الظهري لأعلى.

إصلاح رأس وذيل اليرقة مع دبابيس وخيوط وتطهير المنطقة الجراحية عن طريق تطبيق صبغة اليود 3 ٪ مع مسحة القطن على البشرة ، تليها 70 ٪ الكحول. قم بعمل شق بطول 2 ملليمتر على البشرة الظهرية في الجزء التاسع من الجسم واستخدم قطعة قطن معقمة لإزالة الأجسام الليمفاوية والدهون المتسربة للحصول على رؤية واضحة للمنطقة الجراحية. باستخدام ملاقط جراحية ، أدخل قطعة من رقائق الألومنيوم بين الخصيتين ، ثم أغلق البشرة بخياطة جارية.

اربط عقدة مربعة جراحية بمساعدة حامل إبرة وملاقط جراحية. قطع خياطة زائدة من ذيول حلقة مع مقص ، وترك خيط 2 ملم وراءها. بعد الخياطة ، ضع اليرقة بلطف في صندوق التربية واحتفظ بها في غرفة محاكاة بيئية نظيفة مع مراقبة مستمرة.

تم رصد نمو وتطور يرقات الذكور Spodoptera litura بعد الجراحة المجهرية. كان معدل وفيات اليرقات أعلى قليلا في المجموعة الجراحية ، في حين أن النسب المئوية للجرو ، وظهور البالغين ، والتزاوج الناجح كانت أقل قليلا في المجموعة الجراحية منها في المجموعة الضابطة. في المجموعة التجريبية ، كان عدد حزم الحيوانات المنوية الإجمالية في حزم الحيوانات المنوية من اليوبيرين والأبيرين أقل بكثير من المجموعة الضابطة والوهمية.

من ناحية أخرى ، لم يكن للنسب المئوية لحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين اختلافات كبيرة بين المجموعات الثلاث. بعد إزالة الخصية من جانب واحد من اليرقات ، كانت أعداد حزم الحيوانات المنوية الكلية وحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين والأبيرين في مجموعات الجراحة المجهرية أقل بكثير من المجموعة الضابطة. كانت النسبة المئوية لحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين في اليوم السادس من مرحلة العذراء قابلة للمقارنة في جميع المجموعات الثلاث.

من المهم جدا ملاحظة موقع الجرح وتجنب إتلاف الأعضاء الأخرى أثناء الشق. يمكن استخدام هذه التقنية لدراسة الأهمية البيولوجية لاندماج الخصية عن طريق تطبيق الأدوية على الأعضاء. يمكن استكشاف تأثير الأدوية على العضو المستهدف.