Este protocolo sugiere que se puede adoptar un método físico para ayudar a resolver problemas biológicos. Esta técnica proporciona un método para colocar material en insectos con mínima incisión y estudiar la influencia de la microcirugía en el desarrollo de los individuos. Este método puede aplicarse a otras larvas de lepidópteros y otras partes de los insectos, incluyendo la cabeza y el tórax.
Es muy importante practicar haciendo incisiones en cierto material y suturando hábilmente. Comience colocando las larvas macho de Spodoptera litura en el día 4 del 6º instar, o L6D4, en hielo durante 10 a 30 minutos para mantenerlas anestesiadas durante la operación. Coloque la larva anestesiada en la bandeja de cera con el lado dorsal hacia arriba.
Fije la cabeza y la cola de la larva con alfileres e hilos y desinfecte el área quirúrgica aplicando tintura de yodo al 3% con un hisopo de algodón a la epidermis, seguido de alcohol al 70%. Haga una incisión de 2 milímetros de largo en la epidermis dorsal en el segmento 9 del cuerpo y use un hisopo de algodón estéril para eliminar la hemolinfa y los cuerpos grasos con fugas para obtener una visión clara del área quirúrgica. Usando pinzas quirúrgicas, inserte un trozo de papel de aluminio entre los testículos y luego cierre la epidermis con una sutura en funcionamiento.
Ata un nudo cuadrado quirúrgico con la ayuda de un soporte de aguja y pinzas quirúrgicas. Corta el exceso de sutura de las colas de lazo con tijeras, dejando un hilo de 2 milímetros detrás. Después de suturar, coloque suavemente la larva en la caja de cría y manténgala en una cámara de simulación ambiental limpia con observación continua.
Se monitorizó el crecimiento y desarrollo de las larvas masculinas de Spodoptera litura post-microcirugía. La tasa de mortalidad larvaria fue ligeramente mayor en el grupo quirúrgico, mientras que los porcentajes de pupación, emergencia adulta y apareamiento exitoso fueron ligeramente más bajos en el grupo quirúrgico que en el grupo control. En el grupo experimental, el número de haces totales de espermatozoides en los haces de espermatozoides de eupireno y apireno fue significativamente menor que el grupo de control y control simulado.
Por otro lado, los porcentajes de haces de espermatozoides de eupireno no tuvieron diferencias significativas entre los tres grupos. Después de extirpar un testículo unilateral de las larvas, el número de haces totales de espermatozoides y haces de espermatozoides de eupireno y apireno en los grupos de microcirugía fue significativamente menor que el grupo de control. El porcentaje de haces de espermatozoides de eupireno en el sexto día de la etapa pupal fue comparable en los tres grupos.
Es muy importante notar la ubicación de la herida y evitar dañar otros órganos durante la incisión. Esta técnica se puede utilizar para estudiar la importancia biológica de la fusión testicular mediante la aplicación de fármacos a los órganos. Se puede explorar el efecto de las drogas en el órgano diana.
