Следующий эксперимент вводит эффективный метод вакцинации и точного отбора проб phytophthora capsici на растениях черного перца. Черный перец, который является типичной древесной лозой, является экономически важной культурой специй. Производство черного перца в основном страдает от болезни корневой гнили, вызванной Phytophthora capsici, и серьезно повлияло на промышленное развитие.
Эффективная прививка и точная система отбора проб Phytophthora capsici на растениях черного перца важны для изучения взаимодействия растений и патогенов. Основной целью данного исследования является демонстрация подробной методики, в которой базальная головка черного перца была привита Phytophthora capsici, а также предоставление справочника по прививке древесных виноградных растений. Этот метод обеспечивает лучший способ решения нестабильности, вызванной традиционным методом прививки, таким как обливание почвы или погружение корней.
Экспериментальные процедуры. Черенки черного перца высаживают в контролируемую среду в течение двух месяцев. Субкультура Phytophthora capsici, и инкубируется в течение пяти дней при температуре 25 градусов цельсия.
В день заражения агаровые блоки закрываются на три отверстия, протыкаемые иглой. И, наконец, охарактеризуйте симптомы заболевания. Подготовка растений черного перца к заражению.
Срезают ортотропные ветви длиной 40 сантиметров и диаметром 0,5 сантиметра, а пластиотропные ветви в нижних узлах удаляют стерильным ножом и секатором. Срезанная ветвь должна содержать два узла и пять листьев наверху, чтобы уменьшить потери воды. Обрежьте верхнюю часть до плоского среза, а нижнюю часть до косого среза.
Корневой субстрат черенка черного перца готовили в смесь, содержащую почву и навоз животных, такой как коровий навоз, овечий навоз и т. Д., В соотношении один к одному. Почва была автоклавирована при температуре около 121 градуса цельсия в течение 20 минут. Используйте племенные мешки диаметром 30 сантиметров и высотой 50 сантиметров для размещения корневых субстратов.
Подготовьте уклон в 50 градусов для заполнения субстратов. Черенки размещали под углом 50 градусов, с более чем тремя узлами под подложкой. Они были покрыты корневой средой и вспомогательная часть должна прилипать к среде.
Наконец, черенки были полностью инфильтрированы. Прямая резка была принята для вставки резки. Приготовление культур Phytophthora capsici.
Выбирайте картофель без болезней. Картофель очистить и нарезать небольшими квадратиками. Поместите 200 грамм картофеля в 800 миллилитров двойной дистиллированной воды и варите в течение 20 минут.
Затем процедить смесь. Добавить 20 грамм декстрозы. Залейте смесь до одного литра двойной дистиллированной водой.
Добавьте 15 грамм порошка агара в фильтрат. Распределите среду в колбы и запечатайте с помощью парапленки. Автоклав среды при 121 градусе Цельсия в течение 20 минут.
Расчетную среду картофельного агара выдавали в тарелки чашки Петри и охлаждали на стерильной скамье для затвердевания. Иглу для вакцинации дезинфицировали путем нагревания с помощью спиртовой лампы и охлаждения в течение нескольких секунд. Возьмите небольшие кусочки грибков с помощью стерильной прививки и поместите на КПК.
Мицелий покрывает около трех четвертей пластины. Культуры готовы к дальнейшим экспериментам. Заражение черным перцем.
Расположение в пяти сантиметрах от поверхности субстрата рассматривалось как инкубационное пятно. Место инкубации не должно находиться далеко от корня, стремясь избежать продления инфекционного времени. Ниже приведены подробные этапы прокалывания булавками.
Гранула мицелия Phytophthora capsici была собрана с помощью пробочного бура. Примечательно, что недавно разработанные гранулы мицелия на краю пластины были предпочтительно выбраны из-за их более высокой инфекционной активности. Стерилизуйте стебель с использованием 75% этанола и возьмите три треугольные поры в стерилизованном положении с помощью иглы для прививки.
Три треугольные поры в месте инокуляции были заклеены с помощью иглы для прививки, а мицелиальные гранулы были покрыты на трех порах. Через восемь часов поры вообще почернели. Дилатация увеличивалась с продлением инкубации.
Через семь-десять дней листья пожелтели и опускаются, пока черный перец не погибает. Презентативные результаты заключаются в следующем. После заражения симптомы появляются на растениях черного перца, включая пожелтение и увядание листьев, потемнение ксилемы и почернение сосудов.
Большинство генов экспрессировались по-разному после прививки Phytophthora capsici, по сравнению с контрольной группой. Гистопатологический анализ инфицированных тканей продемонстрировал Phytophthora capsici, колонизированный в ксилеме. Заключение. В этом исследовании булавочный укол базальной головки был использован, чтобы сделать его поврежденным, чтобы обеспечить эффективную прививку, и систему удвоения в черном перце.
Между тем, этот протокол также представляет собой более эффективный способ обеспечения ориентира для инкубации с помощью нашего метода может дать больше времени и работать более кратко. Этот протокол обеспечивает лучший результат, который обеспечивает сильное взаимодействие между одним растением и почвенным патогеном. Что видно и удобно обнаружить динамический процесс между растениями и их возбудителями.
В нашем методе мы начинаем прикалывать базальную головку растения черного перца, чтобы оно повредило их. Затем поврежденный участок покрывается непосредственно Phytophthora capsici и удерживает влагу. Чтобы возбудитель мог заразить растение.
Мы также предлагаем перспективный способ изучения способа действия между растениями и другими почвенными патогенами растений в сельскохозяйственной точной селекции.
