Name: quantitation of intra-peritoneal ovarian cancer metastasis
Uploaded: 2016-07-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis at JoVE.com

This research was supported by research grants RO1CA109545 and RO1CA086984 to M.S.S. by the National Institutes of Health/National Cancer Institute and by an award from the Leo and Ann Albert Charitable Trust (to M.S.S.).

Bütün in vitro çalışmalar, Notre Dame Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi Üniversitesi tarafından onaylanan ve dişi C57 / BL6J fareler kullanıldı. 1. Fare Yumurtalık Kanseri Hücre Kültürü <ol><li> şöyle ID8 murin yumurtalık kanseri hücre kültürü kullanım sağlar:% 4 fetal sığır serumu (FBS),% 1 Penisilin / Streptomisin, 5 ug / ml insülin, 5 mg / ml transferrin ile takviye edilmiş Dulbecco Modified Eagle Medium (DMEM) 1 L ve 5 ng / mL sodyum selenit. </li><li> RFP ve bir seçim işaretleyici (geni blasticidin) ifade ticari olarak temin lentiviral parçacıklar kullanılarak kırmızı flöresanlı proteinin (RFP) ifade etmek için ID8 fare yumurtalık kanseri hücreleri 13 transdüksiyonu. Yeşil floresan proteini, ancak daha zayıf bir flüoresans sinyali sağlanır unutmayın. <ol><li> Hemen önce transdüksiyon için, kültür hücreleri 50 -% 70 Final 1 ml polybrene (5 mg / ml içeren izdiham ve (penisilin / streptomisin olmadan) taze orta ekleyinkonsantrasyon). </li><li> Yavaşça pipet RFP-lentivirüs (20 ul) kabına damla damla ve 72 saat süreyle 37 o C&#39;de inkübe edin. Ortamı çıkarın ve 24 saat boyunca taze ortam ile inkübe edilir. Kültür ortamında (5 ug / ml) blastisidin eklenerek kalıt aktarımlı hücrelerin seçimi başlayın ve floresan mikroskobu (Şekil 1) kullanılarak, kırmızı hücreler için izler. </li></ol></li><li> Kültür bir doku kültürü çanak içine yaklaşık 10 6 hücre tohumlama ve hücre tek tabaka konfluent kadar bir ışık mikroskobu kullanarak günlük görselleştirerek ID8 ortamında RFP-etiketli hücreler. </li><li> Konfluent, tripsin (% 0.25, 3 dk) kullanarak hücrelerin hasat ve hücreler müstakil kadar 37 o C inkübatör şişeyi geri döndüğünüzde. </li><li> serum içeren kültür ortamı ID8 6 ml tripsin nötralize. yukarı pipet ve çanak alt karşı aşağı, sonra 15 ml konik tüp transfer. 2 dakika boyunca 1.200 rpm&#39;de santrifüj, ardından GL kullanılarak ortam aspireeşek pipet. </li><li> hafifçe sıcak PBS 6 ml yeniden süspanse yukarıda 1.5 gibi santrifüjleme ile fosfat tamponlu tuz (PBS) hücreleri yıkayın. 5 x 10 6 hücre / ml&#39;lik bir son konsantrasyona PBS içinde yeniden askıya. Enjeksiyona kadar ılık hücreleri (37 ° C) saklayın. </li></ol> 2. içi periton ID8 Hücrelerinin Enjeksiyon ve in vivo Imaging <ol><li> Intra-peritoneal (ip) enjeksiyon yoluyla 10.000.000 hücre toplam sıcak ID8-PBS çözeltisi 2 mL her fare enjekte edilir. Tümör hücreleri haftada canlı görüntüleme yaklaşık 10 hafta boyunca in vivo olarak büyümeye olanak sağlar. </li><li> Hemen (0.5 L / dk O 2 akışında% 2,5 debisi) isofluorane kullanarak her fare uyutmak sonra fareler tartmak ve bundan sonra enjeksiyon ve her hafta takip. Not: farelere olmayan tümör yükünün kantitatif ölçüm değil, çalışma boyunca bir fare, fiziksel ilerlemesi daha genel bir tedbir olarak, tartılmıştır. fareler tartmakts kendi önceki ağırlık değerleri ile karşılaştırıldı. <ol><li> Bir isofluorane odasında koyarak fareler anestezi. işlem boyunca% 2.5 debisi isofluorane maruz kalma burun-koni fare kafasını konumlandırarak tarama sırasında sabit anestezi koruyun. </li></ol></li><li> siyah saçlı floresan sinyal zayıflamasını neden olacağından, her fare gövde ve karın saç kaldırmak için tüy dökücü krem ​​kullanın. Fareler tüy dökücü krem ​​uygulamasından sonra ılık su ile yıkanmış ve RT kağıt havlu ile kurutulur. </li><li> anestezi ederken, küçük bir hayvan optik görüntüleme sistemi kullanılarak her bir farenin tüm vücudu tarar. Her bir zaman noktasında bir grupta tüm fareleri tarayın. Aşağıdaki iki adımlı protokolü (Şekil 2A) kullanın: <ol><li> 1. Adımda, floresan etiketli (RFP) tümör hücrelerini gözlemlemek 440 nm, 460 nm, 4 uyarma filtreler kullanılarak 5 görüntülerin toplam toplamak için çok bantlı satın yürütmek80 nm, 520 nm ve 540 nm ve 600 nm&#39;lik bir emisyon filtresi. 15 saniyelik bir standart pozlama, 2 x 2 binning, 160 mm FOV ve 1.1 f durağı: Aşağıdaki toplama parametrelerini kullanın. </li><li> 2. Adımda, bütün hayvan gözlemlemek açık uyarma filtresi (beyaz ışık), bir açık emisyon filtresi, 2 x 2 binning ile 0.2 sn standart pozlama ve 16 cm FOV kullanarak bir yansıma görüntü elde etmek. Not: Gerçek görüntüleme süresi ~ 1 dk. </li></ol></li></ol> 3. Fare Diseksiyon ve Image Acquisition <ol><li> Canlı görüntüleme (karın şişliği ile kanıtlandığı gibi) asitli geniş intra-peritoneal hastalık ya da hayvan sergi birikimi, kayıp veya vücut ağırlığının% 20&#39;den fazla, uyuşukluk ya da sıkıntı diğer belirtileri kazanç varlığını gösterdiğinde, CO 2 kullanarak her fare euthanize anestezi servikal dislokasyon. </li><li> sivri dissectio kullanarak, fare ventral orta hat boyunca öne deri kesmen makas, göğüs kafesinin alt uyluk üst. Sadece deri tabakasının (Şekil 2BI) kesmek için aşırı özen gösterin. Yavaşça periton duvar delmeyin için emin olmak, periton dokusu cilt ayırmak. </li><li> Derinin iki flep oluşturmak için göğüs kafesinin alt ve uyluk üst kısmında hem yanal kesilmiş sivri diseksiyon makas kullanılarak (Şekil 2B ii, iii). </li><li> Açık cilt flepleri ile ventral tarafta her fare (periton boşluğu aşağı bakacak) çekti yerleştirin ve küçük hayvan optik görüntüleme sistemi kullanılarak yerinde onun organları ile her fare tarama (Şekil 3A, B). <ol><li> 2.4.1.-2.4.2 tarif edildiği gibi aynı görüntü tedarik parametreleri kullanarak. </li></ol></li><li> karaciğer, omentum / pankreas, mide, diyafram, ince bağırsak, kalın bağırsak, sol ve sağ periton, yumurtalıklar, kidne içeren bireysel periton organları çıkartarak fare diseksiyon devam edinys, mezenter ve yağ yastığı. <ol><li> , Gözlemlemek numaralandırmak ve her organ üzerinde görünür tümör kaydedin. Her tümörün çapı ölçmek için bir kumpas kullanın. </li><li> Ortam olarak 2 ve 5 mm kadar büyük daha büyük 5 mm arasında, küçük bir çap olarak 2 mm&#39;den daha az tümör belirtin. </li></ol></li><li> Organ tarama şablonuna her organ için önceden belirlenmiş bir konumunu tanımlar (Şekil 4) üzerine organları yerleştirin. nemli organları tutmak için PBS kullanın. </li><li> Küçük hayvan optik görüntüleme sistemi (Şekil 3C, D) ile organların her sayfayı tarayın. <ol><li> Adım 2.4 açıklandığı gibi aynı görüntü elde etme parametrelerini kullanın. </li></ol></li><li> Taramadan sonra,% 10 formaldehit yer organları histoloji için sonraki işlem sağlamaktır. </li></ol> th Tümör Yükü 4. sayısallaştırılmasıe Floresan Görüntüleri <ol><li> Her bir çok bantlı taramada otomatik floresans miktarının azaltılması amacıyla, ilk küçük hayvan görüntüleme sistemi ile uygun yazılımı kullanarak dosyaları unmix. <ol><li> Vivo spektral dosyasında, Autofluor ardından: İlk RFP yükleyin Karışmamış Görüntüler penceresinde Vivo Kırmızı dosyasında ve Unmix seçin. </li></ol></li><li> 16 bit .tiff (ölçeklenmemiş) biçimi olarak .bip dosyaları aktarın. </li><li> (In situ organları ile ex vivo organ ve ardından tam fare gövdesini) ImageJ yazılımı kullanın. <ol><li> ImageJ organ tarama şablon dosyalarını 16 bit .tiff dosyalarını açmak için&gt; Dosya Aç kullanın. </li><li> Görüntü&gt; Ayarlama altında&gt; Parlaklık / Kontrast, Minimum değeri 0 görüntülenen ve Maksimum +35353 değer gösterilir ve daha sonra altında yer alan tercihGörüntü&gt; Arama Tabloları, Red Hot seçin. Not: Çeşitli hayvan modelleri, farklı parlaklık seviyeleri gerektirir, ancak belirli bir çalışma boyunca tutarlı parlaklık tutmak önemlidir. </li><li> Serbest Seçim aracını kullanarak, her organın etrafında faiz seçimi (ROI) serbest biçimli bir bölgesini çizmek ve her organın yüzey alanını hesaplamak için Ölçü aracını (CTRL + M) kullanın; Bir e-tablodaki her bir organın yüzey alanı kaydedin. </li><li> Her organın etrafında çizilen ROI ile, sağ ROI içinde tıklayın ve sadece organı dahil etmek için Çoğalt seçeneğini seçin. </li><li> Eşik&gt; Ayarla&gt; Görüntü altında, bireysel organa bakarken, onl seçmek için + 1200 Alt Eşik Düzeyi ve + 1700 Üst Eşik Seviyesi görüntünün eşiğini ayarlayın tercihy en parlak fluoresan bölgeler ve Karanlık Arka Plan seçmek için kontrol edin; Tamam seçeneğini seçin. Not: Daha önce parlak alanlar analiz aşaması için seçilen böylece yukarıda gösterildiği gibi görüntüler, ImageJ eşik sürgü elle manipülasyon gerektirebilir. Farklı hastalık modelleri farklı eşik kısıtlamaları gerektirir, ancak belirli bir çalışma boyunca tutarlı eşik seviyesini düşük tutmak için önemlidir. </li><li> Analiz altında&gt; değiştirmek Boyutu, Parçacıklar Analiz (piksel ^ 2) 10-Infinity, Show tercih: Anahat, sadece &quot;sonuçlarını görüntüle&quot; seçeneğini ve alanları ve bu aydınlık bölgelerin ham entegre yoğunluğu hem ölçmek için Tamam &#39;ı kontrol, sayılır tümörler. </li><li> Yüzey Alanı değerlerini ve görüntülenen her tümör seçimi Ham Entegre Yoğunluk kaydedin <strong&gt; Organ yüzey alanları içeren aynı e-tabloda Sonuçları tablo. </li><li> Analiz altında&gt; Araçlar&gt; Kalibrasyon Bar, organların görüntülere bir kalibrasyon ölçek çubuğu ekleyin. Not: Bu örnekte, bu Üst Hakkı, Siyah Dolgu Rengi, Beyaz Etiket Renk, 5&#39;e Etiketler sayısı, 0 Ondalık, 12 Yazı Boyutu ve Zoom Yer değiştirerek yapıldı 4.0 faktör ve Kalın Metin sağlayan. </li><li> Dosya altında&gt; Farklı Kaydet ... Bir .TIFF ve .jpeg olarak montaj kaydedin. </li><li> .jpeg Organların dosya ve sonra Ekle altında&gt; Metin Kutusunu açmak için&gt; Dosya Aç kullanın </strong&gt;, organların üç sıra her aşağıda bir metin kutusu oluşturarak, organ etiketleri ekleyin. </li><li> Fare sayısının sırasına ImageJ tam vücut taramalarının 16 bit tiff dosyaların her biri açmak için&gt; Dosya Aç kullanın. </li><li> Değeri 0 gösterilir ve Maksimum + 35353 değerini görüntülenen ve ardından Görüntü altında&gt; Arama Tabloları, Red Hot seçin Görüntü altında&gt;&gt; Parlaklık / Kontrast ayarlama Minimum Set seçin. </li><li> Dosya altında&gt; Farklı Kaydet ..., a. TIFF ve .jpeg olarak montaj kaydedin. </li></ol></li></ol> 5. Veri Analizi <ol><li> her bir farenin Her organ için sırasıyla tümörün Seçim alanları ve ham entegre yoğunlukları ekleyin ve her bir fare için toplam organı tümör alanı kaydedilir. </li><li> Kaydedilen alanı ve ham bütünleşik Normaleİlgili Organ yüzey alanı (Tablo 1) toplam tümör alanı ve toplam ham entegre yoğunluk değerleri bölerek her organın boyutu için ed yoğunluk değerleri. </li><li> Hesaplamak ve normalize tümör yüzey alanları ve normalize ham entegre yoğunluk değerleri, her iki ortalamasını arsa (Şekil 5a, b). </li><li> görsel metastatik lezyonlar her organın denetim sırasında çıplak gözle görülebilen tümörlerin sayarak elde edilen bu ortalama değerleri karşılaştırın. </li></ol>

<ol>
	<li>Lengyel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer+development+and+metastasis.">Ovarian cancer development and metastasis.</a> American Journal of Pathology. 177 (3), 1053-1064 (2010).</li><li>Halkia, E., Spiliotis, J., Sugarbaker, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+management+of+peritoneal+metastases+from+ovarian+cancer.">Diagnosis and management of peritoneal metastases from ovarian cancer.</a> Gastroenterology Research and Practice. 2012, 541842-541854 (2012).</li><li>Barbolina, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+ovarian+cancer+metastasis.">Microenvironmental regulation of ovarian cancer metastasis.</a> Cancer Treatment and Research. 149, 319-334 (2009).</li><li>Lengyel, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+ovarian+cancer+experimental+models.">Epithelial ovarian cancer experimental models.</a> Oncogene. 33 (28), 3619-3633 (2014).</li><li>Harter, P., duBois, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+surgery+in+ovarian+cancer+with+special+emphasis+on+cytoreductive+surgery+for+recurrence.">The role of surgery in ovarian cancer with special emphasis on cytoreductive surgery for recurrence.</a> Current Opinion in Oncology. 17 (5), 505-514 (2005).</li><li>Bristow, R. E., Puri, I., Chi, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytoreductive+surgery+for+recurrent+ovarian+cancer:+a+meta-analysis.">Cytoreductive surgery for recurrent ovarian cancer: a meta-analysis.</a> Gynecologic Oncology. 112 (1), 265-274 (2009).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+metastatic+cancer+with+fluorescent+proteins.">In vivo imaging of metastatic cancer with fluorescent proteins.</a> Cell Death and Differentiation. 9, 786-789 (2002).</li><li>Sweeney, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+kinetics+of+tumor-cell+clearance+in+living+animals.">Visualizing the kinetics of tumor-cell clearance in living animals.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 96, 12044-12049 (1999).</li><li>Chishima, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+invasion+and+micrometastasis+visualized+in+live+tissue+by+green+fluorescent+protein+expression.">Cancer invasion and micrometastasis visualized in live tissue by green fluorescent protein expression.</a> Cancer Research. 57, 2042-2047 (1997).</li><li>Bouvet, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+optical+imaging+of+primary+tumor+growth+and+multiple+metastatic+events+in+a+pancreatic+cancer+orthotopic+model.">Real-time optical imaging of primary tumor growth and multiple metastatic events in a pancreatic cancer orthotopic model.</a> Cancer Research. 62, 1534-1540 (2002).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Multiples+Uses+of+Fluorescent+Proteins+to+Visualize+Cancer+in+vivo.">The Multiples Uses of Fluorescent Proteins to Visualize Cancer in vivo.</a> Nature Reviews. 5, 796-806 (2005).</li><li>Roby, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+syngeneic+mouse+model+for+events+related+to+ovarian+cancer.">Development of a syngeneic mouse model for events related to ovarian cancer.</a> Carcinogenesis. 21 (4), 585-591 (2000).</li><li>Rampurwala, M., Ravoori, M. K., Wei, W., Johnson, V. E., Vikram, R., Kundra, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+and+quantification+of+intraperitoneal+tumors+by+in+vivo+computed+tomography+using+negative+contrast+enhancement+strategy+in+a+mouse+model+of+ovarian+cancer.">Visualization and quantification of intraperitoneal tumors by in vivo computed tomography using negative contrast enhancement strategy in a mouse model of ovarian cancer.</a> Translational Oncology. 2 (2), 96-106 (2009).</li><li>Kim, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antitumor+and+antivascular+effects+of+AVE8062+in+ovarian+carcinoma.">Antitumor and antivascular effects of AVE8062 in ovarian carcinoma.</a> Cancer Research. 67, 9337-9345 (2007).</li><li>Picchio, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+ovarian+carcinoma:+usefulness+of+[(18)F]FDG-PET+in+combination+with+CT+for+lesion+detection+after+primary+treatment.">Advanced ovarian carcinoma: usefulness of [(18)F]FDG-PET in combination with CT for lesion detection after primary treatment.</a> Quarterly Journal of Nuclear Medicine. 47, 77-84 (2003).</li></ol>

Bu makale Bruker BioSpin sponsorluğunda Multimodal Klinik Öncesi Görüntüleme üzerinde bir özel sayısında, bir parçasıdır.

bağışıklık yetersizliği olan farelerde yapılmalıdır insan yumurtalık kanser hücrelerinin kullanan çalışmaların tersine, protokol, yukarıda tarif edilen imünokompetan C57 / BL6 fareleri ve genetik olarak özdeş fare yumurtalık kanseri hücreleri kullanır. Bu tümör büyümesi ve metastazı bağışıklık infiltrasyonların potansiyel rolünün değerlendirilmesi sağlarken, karın yüzeyinde siyah saçlı varlığı görüntüleme az duyarlı hale getirir. tüy dökücü kullanımı görüntüleme ?...

Epitelyal over kanseri (EOC) 2015 yılında ABD&#39;de tahminen 21.290 yeni tanı ve tahminen 14.180 ölüm 1 ile jinekolojik malignite gelen ölümlerin en sık nedenidir. Kadınların büyük çoğunluğu (&gt;% 75) geç evre hastalığı tanısı (evre III veya IV) yaygın-içi periton metastazı ve kötü prognoz ile karakterizedir. Birinci basamak kemoterapi sonrası periton boşluğuna Hastalık nüks da yaygındır ve mortalite 2,3 önemli bir nedenini oluşturmaktadır. EOC doğrudan komşu periton organların birincil tümörden hem de ayrışma ile uzantı veya tek hücre ya da çok hücreli agregatlar halinde primer tümör yüzeyinden hücre dökülmesi her ikisinin de dahil benzersiz bir mekanizma ile metastaz. Onlar dekolmanı kaynaklı apoptoz 4 direnmek burada Hücreler, periton boşluğuna dökülür. döken tümör hücreleri periton lenfatik drenajı ve t blok olarak periton asit birikimi, yaygınumors vasküler geçirgenliğini değiştirerek büyüme faktörlerini üretir. Onlar çapa ve birden çok yaygın ikincil lezyonlar 3,5 üretmek için çoğalırlar bunun üzerine döken tümör hücrelerinin bir kısmı, bağırsak, karaciğer, omentum ve mezenter dahil periton organ ve yapıların yüzeyine tutunur. Hematojen metastaz nadirdir. Böylece, klinik yönetimi yaygın (kadar küçük olursa olsun) tüm görünür tümör rezeksiyonu olarak tanımlanan &quot;Optimal bir sitoredüksiyon sonrası&quot; olmak üzere sitoredüktif cerrahi oluşur. Komple sitoredüksiyon genel sağkalım 6,7 belirgin bir artış ile ilişkilidir ve tanımlanması ve lezyonların çıkarılması &lt;0.5 cm meydan okuma ile ilişkilidir. Küçük hayvan modelleri prognostik biyolojik ve yeni kemoterapi veya kombine tedavi yaklaşımları test belirlenmesi yanı hastalığın ilerlemesi anlayışımızı geliştirmeye yumurtalık kanseri araştırmalarında yarar kanıtlanmıştır. birincil olarakyumurtalık kanseri insidansı ve metastaz yeri periton boşluğu, EOC metastaz ortotopik modelleri intraperitoneal hastalığın analizi ve karakterizasyonu dahil olduğunu. Görüntü tümör hücrelerine yeteneği son gelişmeler olmasına rağmen, hatta tek hücre düzeyinde, hala EOC metastatik tümör yükü miktarının önemli zorlukları da bulunmaktadır. Bu sorunlar nedeniyle sayısı, büyüklüğü ve metastatik lezyonların anatomik konuma ortaya çıkar. Ayrıca, normal konakçı hücrelerden ayırmak için etiket kanser hücreleri için bir ihtiyaç söz konusudur. Daha önceki çalışmalar, antikor bazlı etiketleme protokolleri ya da lusiferaz 8,9 tümör hücrelerinin transfeksiyonu kullanmışlardır. Kanser hücrelerinin direkt floresan etiketleme ilk olarak 1997 yılında 10 Chishima ve arkadaşları tarafından rapor edilmiştir. Floresan etiketleri kanser metastazı 11,12 izlemek için eksojen substratın ilave edilmesini gerektirebilir ve zarif tümör hücre özgüllük sağlamak, daha etkin bir araç temin yok </sus&gt;. Bu yazıda fare ID8 yumurtalık kanseri hücreleri 13 ve bağışıklık yetkili C57 / BL6 farelerinde kırmızı floresan proteini (RFP) oluşan bir singeneik ortotopik ksenograft modeli kullanılarak metastatik hastalık kantitatif analizi için bir optik görüntüleme yöntemi etiketli açıklanmaktadır. Göreceli tümör yükü ölçümü için yeni bir yöntem, doku otomatik floresans kaldırılması ile in vivo ve ex vivo görüntüleme birleştirerek göstermektedir. Bu yaklaşım yumurtalık kanseri organa özgü metastaz belirli genetik, epigenetik veya mikro-çevre değişiklik ve / veya tedavi yöntemlerinin etkisini değerlendirmek için tasarlanmış çalışmalarda potansiyel yarar vardır.

<table><tbody><tr><td>Dulbecco&#039;s Modified Eagle Medium</td><td>Corning</td><td>10-014-CM</td><td></td></tr><tr><td>Fetal bovine serum</td><td>Gibco</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>penicillin/streptomycin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Insulin-transferrin-sodium selenite media supplement</td><td>Sigma</td><td>I-1884</td><td></td></tr><tr><td>Bruker Xtreme small animal imaging system</td><td>Bruker Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bruker Multispectral software</td><td>Bruker Corp</td><td></td><td></td></tr><tr><td>lentiviral particles with Red fluorescent protein</td><td>GenTarget, Inc.</td><td>LVP023</td><td></td></tr><tr><td>trypsin for cell culture</td><td>Corning</td><td>25-053-CI</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Corning</td><td>21-040-CM</td><td></td></tr><tr><td>depilatory cream (such as Nair Hair Remover Lotion)</td><td>purchases from drugstore&amp;nbsp;</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ software&amp;nbsp;</td><td>http://imagej.nih.gov/ij/&amp;nbsp;</td><td></td><td>free download</td></tr><tr><td>dissecting tools (forceps)</td><td>Roboz Surgical Instrument</td><td>&amp;nbsp;RS 5130</td><td></td></tr><tr><td>dissecting tools (Scissors)</td><td>Roboz Surgical Instrument</td><td>RS 5910</td><td></td></tr></tbody></table>

quantitation of intra-peritoneal ovarian cancer metastasis

Epithelial ovarian cancer (EOC) is the leading cause of death from gynecologic malignancy in the United States. Mortality is due to diagnosis of 75% of women with late stage disease, when metastasis is already present. EOC is characterized by diffuse and widely disseminated intra-peritoneal metastasis. Cells shed from the primary tumor anchor in the mesothelium that lines the peritoneal cavity as well as in the omentum, resulting in multi-focal metastasis, often in the presence of peritoneal ascites. Efforts in our laboratory are directed at a more detailed understanding of factors that regulate EOC metastatic success. However, quantifying metastatic tumor burden represents a significant technical challenge due to the large number, small size and broad distribution of lesions throughout the peritoneum. Herein we describe a method for analysis of EOC metastasis using cells labeled with red fluorescent protein (RFP) coupled with in vivo multispectral imaging. Following intra-peritoneal injection of RFP-labelled tumor cells, mice are imaged weekly until time of sacrifice. At this time, the peritoneal cavity is surgically exposed and organs are imaged in situ. Dissected organs are then placed on a labeled transparent template and imaged ex vivo. Removal of tissue auto-fluorescence during image processing using multispectral unmixing enables accurate quantitation of relative tumor burden. This method has utility in a variety of applications including therapeutic studies to evaluate compounds that may inhibit metastasis and thereby improve overall survival.

yumurtalık kanseri, metastatik bir mekanizma çok küçük (&lt;2 mm) lezyonlar da dahil olmak üzere, farklı büyüklüklerde, çok sayıda lezyon arasında oluşan yüksek yaygın intra-peritoneal metastaz ile karakterize edilir. Bu nedenle, RFP etiketli tümör hücrelerinin kullanımı (Şekil 1) ve optik görüntüleme kılavuzu sayım ve lezyon boyutu ölçümü için alternatif bir yöntem sağlar. Zamanla tümör yükünün gelişmesi haftada asit potansiyel va...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis at JoVE.com

Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis

Ovarian cancer metastasis is characterized by numerous diffuse intra-peritoneal lesions, such that accurate visual quantitation of tumor burden is challenging. Herein we describe a method for in situ and ex vivo quantitation of metastatic tumor burden using red fluorescent protein (RFP)-labeled tumor cells and optical imaging.

İçi periton Yumurtalık Kanseri Metastaz kantitasyonu

Epithelial ovarian cancer (EOC) is the leading cause of death from gynecologic malignancy in the United States.  Mortality is due to diagnosis of 75% of ...

quantitation-of-intra-peritoneal-ovarian-cancer-metastasis

Research

JoVE Journal

Medicine

10.8K Görüntüleme.  University of Notre Dame. Ovarian cancer metastasis is characterized by numerous diffuse intra-peritoneal lesions, such that accurate visual quantitation of tumor burden is challenging. Herein we describe a method for in situ and ex vivo quantitation of metastatic tumor burden using red fluorescent protein (RFP)-labeled tumor cells and optical imaging.

Video: Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all gynecologic malignancies among US women 1,2,3. Serous tumors are the most widespread forms of ovarian cancer and 4,5 the Tg-MISIIR-TAg transgenic represents the only mouse model that spontaneously develops this type of tumors. Tg-MISIIR-TAg mice express SV40 transforming region under control of the Mullerian Inhibitory Substance type II Receptor (MISIIR) gene promoter 6. Additional transgenic lines have been identified that express the SV40 TAg transgene, but do not develop ovarian tumors. Non-tumor prone mice exhibit typical lifespan for C57Bl/6 mice and are fertile. These mice can be used as syngeneic allograft recipients for tumor cells isolated from Tg-MISIIR-TAg-DR26 mice.
Objective: Although tumor imaging is possible 7, early detection of deep tumors is challenging in small living animals. To enable preclinical studies in an immunologically intact animal model for serous ovarian cancer, we describe a syngeneic mouse model for this type of ovarian cancer that permits in vivo imaging, studies of the tumor microenvironment and tumor immune responses.
Methods: We first derived a TAg+ mouse cancer cell line (MOV1) from a spontaneous ovarian tumor harvested in a 26 week-old DR26 Tg-MISIIR-TAg female. Then, we stably transduced MOV1 cells with TurboFP635 Lentivirus mammalian vector that encodes Katushka, a far-red mutant of the red fluorescent protein from sea anemone Entacmaea quadricolor with excitation/emission maxima at 588/635 nm 8,9,10. We orthotopically implanted MOV1Kat in the ovary 11,12,13,14 of non-tumor prone Tg-MISIIR-TAg female mice. Tumor progression was followed by in vivo optical imaging and tumor microenvironment was analyzed by immunohistochemistry.
Results: Orthotopically implanted MOV1Kat cells developed serous ovarian tumors. MOV1Kat tumors could be visualized by in vivo imaging up to three weeks after implantation (fig. 1) and were infiltrated with leukocytes, as observed in human ovarian cancers 15 (fig. 2).
Conclusions: We describe an orthotopic model of ovarian cancer suitable for in vivo imaging of early tumors due to the high pH-stability and photostability of Katushka in deep tissues. We propose the use of this novel syngeneic model of serous ovarian cancer for in vivo imaging studies and monitoring of tumor immune responses and immunotherapies.

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

To study in vivo tumor growth and tumor microenvironment, we used a syngeneic and orthotopic mouse model of ovarian cancer in immunocompetent animals. We transduced a mouse tumor cell line (MOV1) with Katushka fluorescent protein (MOV1KAT) and here we show its orthotopic implantation in ovary and in vivo imaging.

Immünkompetan Fare Seröz Yumurtalık Kanseri bir Ortotopik Model In vivo</emTümör Bağışıklık Yanıtları> Tümör Görüntüleme ve İzleme

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Surface-enhanced Resonance Raman Scattering Nanoprobe Ratiometry for Detecting Microscopic Ovarian Cancer via Folate Receptor Targeting

Ovarian cancer represents the deadliest gynecologic malignancy. Most patients present at an advanced stage (FIGO stage III or IV), when local metastatic spread has already occurred. However, ovarian cancer has a unique pattern of metastatic spread, in that tumor implants are initially contained within the peritoneal cavity. This feature could enable, in principle, the complete resection of tumor implants with curative intent. Many of these metastatic lesions are microscopic, making them hard to identify and treat. Neutralizing such micrometastases is believed to be a major goal towards eliminating tumor recurrence and achieving long-term survival. Raman imaging with surface enhanced resonance Raman scattering nanoprobes can be used to delineate microscopic tumors with high sensitivity, due to their bright and bioorthogonal spectral signatures. Here, we describe the synthesis of two &#39;flavors&#39; of such nanoprobes: an antibody-functionalized one that targets the folate receptor &#8212; overexpressed in many ovarian cancers &#8212; and a non-targeted control nanoprobe, with&#160;distinct spectra. The nanoprobes are co-administered intraperitoneally to mouse models of metastatic human ovarian adenocarcinoma. All animal studies were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of Memorial Sloan Kettering Cancer Center. The peritoneal cavity of the animals is surgically exposed, washed, and scanned with a Raman microphotospectrometer. Subsequently, the Raman signatures of the two nanoprobes are decoupled using a Classical Least Squares fitting algorithm, and their respective scores divided to provide a ratiometric signal of folate-targeted over untargeted probes. In this way, microscopic metastases are visualized with high specificity. The main benefit of this approach is that the local application into the peritoneal cavity &#8212; which can be done conveniently during the surgical procedure &#8212; can tag tumors without subjecting the patient to systemic nanoparticle exposure. False positive signals stemming from non-specific binding of the nanoprobes onto visceral surfaces can be eliminated by following a ratiometric approach where targeted and non-targeted nanoprobes with distinct Raman signatures are applied as a mixture. The procedure is currently still limited by the lack of a commercial wide-field Raman imaging camera system, which once available will allow for the application of this technique in the operating theater.

Ovarian cancer forms metastases throughout the peritoneal cavity. Here, we present a protocol to make and use folate-receptor targeted surface-enhanced resonance Raman scattering nanoprobes that reveal these lesions with high specificity via ratiometric imaging. The nanoprobes are administered intraperitoneally to living mice, and the derived images correlate well with histology.

Yüzey gelişmiş rezonans Raman nanoprobe Ratiometry mikroskobik yumurtalık kanseri folat reseptör via algılamak için saçılma hedefleme

Ovarian cancer represents the deadliest gynecologic malignancy. Most patients present at an advanced stage (FIGO stage III or IV), when local metastatic ...

Kanser Araştırmaları

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 percent of women with ovarian cancer develop new metastases, and the recurrence is often fatal2. It is, therefore, necessary to understand how secondary metastases arise in order to develop better treatments for intermediate and late stage ovarian cancer. Ovarian cancer metastasis occurs when malignant cells detach from the primary tumor site and disseminate throughout the peritoneal cavity. The disseminated cells can form multicellular clusters, or spheroids, that will either remain unattached, or implant onto organs within the peritoneal cavity3 (Figure 1, Movie 1). 
All of the organs within the peritoneal cavity are lined with a single, continuous, layer of mesothelial cells4-6 (Figure 2). However, mesothelial cells are absent from underneath peritoneal tumor masses, as revealed by electron micrograph studies of excised human tumor tissue sections3,5-7 (Figure 2). This suggests that mesothelial cells are excluded from underneath the tumor mass by an unknown process. 
Previous in vitro experiments demonstrated that primary ovarian cancer cells attach more efficiently to extracellular matrix than to mesothelial cells8, and more recent studies showed that primary peritoneal mesothelial cells actually provide a barrier to ovarian cancer cell adhesion and invasion (as compared to adhesion and invasion on substrates that were not covered with mesothelial cells)9,10. This would suggest that mesothelial cells act as a barrier against ovarian cancer metastasis. The cellular and molecular mechanisms by which ovarian cancer cells breach this barrier, and exclude the mesothelium have, until recently, remained unknown. 
Here we describe the methodology for an in vitro assay that models the interaction between ovarian cancer cell spheroids and mesothelial cells in vivo (Figure 3, Movie 2). Our protocol was adapted from previously described methods for analyzing ovarian tumor cell interactions with mesothelial monolayers8-16, and was first described in a report showing that ovarian tumor cells utilize an integrin &#x2013;dependent activation of myosin and traction force to promote the exclusion of the mesothelial cells from under a tumor spheroid17. This model takes advantage of time-lapse fluorescence microscopy to monitor the two cell populations in real time, providing spatial and temporal information on the interaction. The ovarian cancer cells express red fluorescent protein (RFP) while the mesothelial cells express green fluorescent protein (GFP). RFP-expressing ovarian cancer cell spheroids attach to the GFP-expressing mesothelial monolayer. The spheroids spread, invade, and force the mesothelial cells aside creating a hole in the monolayer. This hole is visualized as the negative space (black) in the GFP image. The area of the hole can then be measured to quantitatively analyze differences in clearance activity between control and experimental populations of ovarian cancer and/ or mesothelial cells. This assay requires only a small number of ovarian cancer cells (100 cells per spheroid X 20-30 spheroids per condition), so it is feasible to perform this assay using precious primary tumor cell samples. Furthermore, this assay can be easily adapted for high throughput screening.

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

The mesothelial clearance assay described here takes advantage of fluorescently labeled cells and time-lapse video microscopy to visualize and quantitatively measure the interactions of ovarian cancer multicellular spheroids and mesothelial cell monolayers. This assay models the early steps of ovarian cancer metastasis.

In vitro Mezotelyal Gümrükleme Assay o Yumurtalık Kanseri Metastaz Erken Adımlar modeller

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Tıp

An Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer using Human Stroma to Promote Metastasis

Ovarian cancer is characterized by early, diffuse metastasis with 70% of women having metastatic disease at the time of diagnosis. While elegant transgenic mouse models of ovarian cancer exist, these mice are expensive and take a long time to develop tumors. Intraperitoneal injection xenograft models lack human stroma and do not accurately model ovarian cancer metastasis. Even patient derived xenografts (PDX) do not fully recapitulate the human stromal microenvironment as serial PDX passages demonstrate significant loss of human stroma. The ability to easily model human ovarian cancer within a physiologically relevant stromal microenvironment is an unmet need. Here, the protocol presents an orthotopic ovarian cancer mouse model using human ovarian cancer cells combined with patient-derived carcinoma-associated mesenchymal stem cells (CA-MSCs). CA-MSCs are stromal progenitor cells, which drive the formation of the stromal microenvironment and support ovarian cancer growth and metastasis. This model develops early and diffuses metastasis mimicking clinical presentation. In this model, luciferase expressing ovarian cancer cells are mixed in a 1:1 ratio with CA-MSCs and injected into the ovarian bursa of NSG mice. Tumor growth and metastasis are followed serially over time using bioluminescence imaging. The resulting tumors grow aggressively and form abdominal metastases by 14 days post injection. Mice experienced significant decreases in body weight as a marker of systemic illness and increased disease burden. By day 30 post injection, mice met endpoint criteria of &gt;10% body weight loss and necropsy confirmed intra-abdominal metastasis in 100% of mice and 60%-80% lung and parenchymal liver metastasis. Collectively, orthotopic engraftment of ovarian cancer cells and stroma cells generates tumors that closely mimic the early and diffuse metastatic behavior of human ovarian cancer. Furthermore, this model provides a tool to study the role of ovarian cancer cell: stroma cell interactions in metastatic progression.

Orthotopic engraftment of ovarian cancer cells mixed with human stromal cells provides a mouse model that exhibits rapid, diffuse metastatic behavior that is characteristic of human ovarian cancer. This model also allows for the study of tumor cell and stromal cell interactions, as well as their role in tumor progression and metastasis.

Ovarian cancer is characterized by early, diffuse metastasis with 70% of women having metastatic disease at the time of diagnosis. While elegant ...

Assessment of Ovarian Cancer Spheroid Attachment and Invasion of Mesothelial Cells in Real Time

Ovarian cancers metastasize by shedding into the peritoneal fluid and dispersing to distal sites within the peritoneum. Monolayer cultures do not accurately model the behaviors of cancer cells within a nonadherent environment, as cancer cells inherently aggregate into multicellular structures which contribute to the metastatic process by attaching to and invading the peritoneal lining to form secondary tumors. To model this important stage of ovarian cancer metastasis, multicellular aggregates, or spheroids, can be generated from established ovarian cancer cell lines maintained under nonadherent conditions. To mimic the peritoneal microenvironment encountered by tumor cells in vivo, a spheroid-mesothelial co-culture model was established in which preformed spheroids are plated on top of a human mesothelial cell monolayer, formed over an extracellular matrix barrier. Methods were then developed using a real-time cell analyzer to conduct quantitative real time measurements of the invasive capacity of different ovarian cancer cell lines grown as spheroids. This approach allows for the continuous measurement of invasion over long periods of time, which has several advantages over traditional endpoint assays and more laborious real time microscopy image analyses. In short, this method enables a rapid, determination of factors which regulate the interactions between ovarian cancer spheroid cells invading through mesothelial and matrix barriers over time.

Ovarian cancer cell invasion into the mesothelial lining of the peritoneum is a dynamic process over time. Utilizing a real time analyzer, the invasive capacity of ovarian cancer cells in a spheroid-mesothelial cell co-culture model can be quantified over prolonged time periods, providing insights into factors regulating the metastatic process.

Real Time Mezotelyal Hücrelerinin Yumurtalık Kanseri Sferoid Ek ve Invasion Değerlendirilmesi

Ovarian cancers metastasize by shedding into the peritoneal fluid and dispersing to distal sites within the peritoneum. Monolayer cultures do not ...

Murine Model for Non-invasive Imaging to Detect and Monitor Ovarian Cancer Recurrence

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of care consisting of surgical debulking and combination chemotherapy consisting of platinum and taxane compounds, almost 90% of patients recur within a few years. In these patients the development of chemoresistant disease limits the efficacy of currently available chemotherapy agents and therefore contributes to the high mortality. To discover novel therapy options that can target recurrent disease, appropriate animal models that closely mimic the clinical profile of patients with recurrent ovarian cancer are required. The challenge in monitoring intra-peritoneal (i.p.) disease limits the use of i.p. models and thus most xenografts are established subcutaneously. We have developed a sensitive optical imaging platform that allows the detection and anatomical location of i.p. tumor mass. The platform includes the use of optical reporters that extend from the visible light range to near infrared, which in combination with 2-dimensional X-ray co-registration can provide anatomical location of molecular signals. Detection is significantly improved by the use of a rotation system that drives the animal to multiple angular positions for 360 degree imaging, allowing the identification of tumors that are not visible in single orientation. This platform provides a unique model to non-invasively monitor tumor growth and evaluate the efficacy of new therapies for the prevention or treatment of recurrent ovarian cancer.

We describe a non-invasive animal imaging platform that allows the detection, quantification, and monitoring of ovarian cancer growth and recurrence. This intra-peritoneal xenograft model mimics the clinical profile of patients with ovarian cancer.

Non-invaziv Görüntüleme için fare modeli Algılama ve Monitör Yumurtalık Kanseri nüks için

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of ...

Over Kanseri-Omentum Etkileşimi için 3 Boyutlu Ex Vivo Model Oluşturulması

An Ex Vivo Model of Ovarian Cancer Peritoneal Metastasis Using Human Omentum

Ovarian cancer is the deadliest gynecologic malignancy. The omentum plays a key role in providing a supportive microenvironment to metastatic ovarian cancer cells as well as immune modulatory signals that allow tumor tolerance. However, we have limited models that closely mimic the interaction between ovarian cancer cells and adipose-rich tissues. To further understand the cellular and molecular mechanisms by which the omentum provides a pro-tumoral microenvironment, we developed a unique 3D ex vivo model of cancer cell-omentum interaction. Using human omentum, we are able to grow ovarian cancer cells within this adipose-rich microenvironment and monitor the factors responsible for tumor growth and immune regulation. In addition to providing a platform for the study of this adipose-rich tumor microenvironment, the model provides an excellent platform for the development and evaluation of novel therapeutic approaches to target metastatic cancer cells in this niche. The proposed model is easy to generate, inexpensive, and applicable to translational investigations.

Yazar Spotlight: Kanser-Adipoz Mikroçevre Etkileşimini Araştırmak için Gelişmiş Ex Vivo Model 

This protocol describes the establishment of a three-dimensional (3D) ex vivo model of cancer cell-omentum interaction. The model provides a platform for elucidating pro-tumor mechanisms within the adipose niche and for testing novel therapies.

İnsan Omentumu Kullanılarak Over Kanseri Periton Metastazının Ex Vivo Modeli

Ovarian cancer is the deadliest gynecologic malignancy. The omentum plays a key role in providing a supportive microenvironment to metastatic ovarian ...

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of women are alive 5 years after diagnosis. The omentum is a preferred site of HGSC metastasis formation. Despite the clinical importance of this microenvironment, the contribution of omental adipose tissue to ovarian cancer progression remains understudied. Omental adipose is unusual in that it contains structures known as milky spots, which are comprised of B, T, and NK cells, macrophages, and progenitor cells surrounding dense nests of vasculature. Milky spots play a key role in the physiologic functions of the omentum, which are required for peritoneal homeostasis. We have shown that milky spots also promote ovarian cancer metastatic colonization of peritoneal adipose, a key step in the development of peritoneal metastases. Here we describe the approaches we developed to evaluate and quantify milky spots in peritoneal adipose and study their functional contribution to ovarian cancer cell metastatic colonization of omental tissues both in vivo and ex vivo. These approaches are generalizable to additional mouse models and cell lines, thus enabling the study of ovarian cancer metastasis formation from initial localization of cells to milky spot structures to the development of widespread peritoneal metastases.

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

We outline a protocol that implements both in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer colonization of peritoneal adipose tissues, particularly the omentum. Furthermore, we present a protocol to quantitate and analyze immune cell-structures in the omentum known as milky spots, which promote metastases of peritoneal adipose.

Vivo ve Ex Vivo Periton yağ içinde Samanyolu Nokta Yapıların Yumurtalık Kanseri Metastatik Kolonizasyon Eğitim Yaklaşımlar içinde

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of ...

İçi periton Yumurtalık Kanseri Metastaz kantitasyonu

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Immünkompetan Fare Seröz Yumurtalık Kanseri bir Ortotopik Model In vivo Tümör Görüntüleme ve İzleme

Yüzey gelişmiş rezonans Raman nanoprobe Ratiometry mikroskobik yumurtalık kanseri folat reseptör via algılamak için saçılma hedefleme

In vitro Mezotelyal Gümrükleme Assay o Yumurtalık Kanseri Metastaz Erken Adımlar modeller

An Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer using Human Stroma to Promote Metastasis

Real Time Mezotelyal Hücrelerinin Yumurtalık Kanseri Sferoid Ek ve Invasion Değerlendirilmesi

Non-invaziv Görüntüleme için fare modeli Algılama ve Monitör Yumurtalık Kanseri nüks için

İnsan Omentumu Kullanılarak Over Kanseri Periton Metastazının Ex Vivo Modeli

İnsan Omentumu Kullanılarak Over Kanseri Periton Metastazının Ex Vivo Modeli

İnsan Omentumu Kullanılarak Over Kanseri Periton Metastazının Ex Vivo Modeli

Vivo ve Ex Vivo Periton yağ içinde Samanyolu Nokta Yapıların Yumurtalık Kanseri Metastatik Kolonizasyon Eğitim Yaklaşımlar içinde