Yazarlar, bu iletişim kuralını µCT değerlendirilmesinde konusunda teknik yardım almak için Bay Boyin te (Şangay halk sağlığı Klinik Merkezi) için şükran ifade etmek istiyorum.

Not: OE model oluşturulan ve daha önce bildirilen araştırma 30 , 31 , 32 yılında kullanılan. Tüm hayvan deneyleri kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Shanghai Jiaotong Üniversitesi tarafından kabul edildi.
 1. fareler <ol><li>ev patojen ücretsiz, 7 - için 9-hafta-yaşlı kadın BALB/c fareler bir hayvan bireysel havalandırılmış kafeslerde tesis altında kontrollü sıcaklık (20 ° C) ve nem (40-%60). 12 h ışık ve 12 h tesisin karanlık döngüsünde sağlar. Gıda sağlamak ve ad libitum su.</li>
</ol> 2. Ozon veya hava pozlama <ol><li>Generate ozon ile sızdırmazlık akrilik (örneğin Perspex) kutusunda bir elektrik jeneratörü. Blow hava iç ve kutunun dışında bağlı bir hava havalandırma borusu aracılığıyla küçük Hava üfleyici kullanarak kutudan. Kutusuna bir ozon sonda kullanarak ozon konsantrasyonu izlemek. Kutusunda ozon konsantrasyonu başına 2.5 parçaları ulaşır kadar bekleyin milyon (ppm). 
	Not: Ozon sonda otomatik olarak Ozon Jeneratör açık veya kapalı geçiş yapabilir ve ozon seviyesi 2.5 ppm at kutusundaki koruyabilirsiniz.</li>
	Ozon seviyesi 2.5 ppm ulaştığında <li>fareler ve metin kutusuna yerleştirin. Fareler kutusunda 3 h için her zaman için ozon karşılaşmazlar devam. 
	Not: Kutu sırasında 3 h otomatik olarak Ozon Jeneratör açık veya kapalı geçiş yaparak bir ozon düzeyi 2.5 ppm koruyabilirsiniz ve CO 2 üfleme tarafından üretilen farelerin kutunun dışında.</li>
	<li>(3 günde bir kez) 7 hafta boyunca haftada iki ozon Etkilenmeler (3 saat süren her maruz kalma) vermek; aynı zamanda ve aynı süre için hava kontrol fareler ortaya çıkarmak.</li>
</ol> 3. Mikro bilgisayarlı tomografi <ol><li>pelltobarbitalum natricum mayi enjeksiyonu ile fareler 7 haftanın sonunda, anestezi (% 1, 0.6 - 0.8 ml/100 g) göre fare değil görmek için bireysel durumlarda doz ayarlama bir ayak çimdik. için monitör yanıt ve fare sürekli nefes frekansta tutun; ve gönüllü yok hareketleri var işlemler sırasında olduğundan emin olun.</li>
	<li>Bir mikro Bilgisayarlı Tomografi (µCT) odasında imzalat fareler yer.</li>
	<li>Kalibre standart protokol ve üreticinin kullanma µCT &#39; s yönergeleri. X-ışını tüpü 50 ayarla kV ve 450 µA mevcut. 
	Not: Her ikisi de x-ışını ve Dedektör fareler döndürmek.</li>
	<li>Bir dilim için 300 MS bir çekim hızı ve bir dilim kalınlığı 0,093 mm etkili piksel boyutunu 515 projeksiyonlar 0.092 mm, kazanılması by µCT çözümlemesi yapma.</li>
	<li>Akciğer alınan görüntüleri bir yazılım kullanarak yeniden. En az ve en çok gri tonlamalı sırasıyla-750 ve-550 Hounsfield daxilində ayarlayarak gri tonlamalı görüntü parlaklığını ayarlayın. 
	Not: Yazılım otomatik olarak akciğer parankimi ve düşük-zayıflama alan (LAA) 34 , 35 hacimleri hesaplar.</li>
	<li>Toplam akciğer hacmi LAA hacimce bölerek LAA (LAA %) yüzdesini hesaplamak.</li></ol>
 4. koşu bandı Test <ol><li>fareler adaptasyon bir test üzerinde bir koşma koşu bandı makine. Not 10 m/dk 10 dk hızında vermek: yordamı yürütülen elektrik her zaman kapalı olduğunda.</li> <li>yönetici bir yorgunluk testi fareler için.
	<ol><li>Fare hızı 10 m/dak 5 dakika süreyle ısınmak</li>
		<li>Artmak belgili tanımlık hız 15 m/dk 10 dakika süreyle</li>
		<li>Egzersiz yoğunluğu artırmak: 5 m/dak, 20 m/dak başlangıç tarafından hızı artan fareler kadar her 30 dk. 36 çalıştırmak devam edemiyor.</li>
	</ol></li> <li>Çalışan mesafe ve çalışma süresi yorgunluk mesafe ve yorgunluk zaman, anılan sıraya göre toplam kayıt.</li></ol>
 5. pulmoner fonksiyon ölçümleri <ol><li>pelltobarbitalum natricum mayi enjeksiyonu ile fareler anestezi (% 1, 0.6 - 0.8 ml/100 g) göre fare yaptığını görmek için bireysel durumlarda doz ayarlama bir ayak çimdik değil yanıt vermek ve fareler spontan solunum. monitör korumuştur ve fare sürekli nefes frekansta tutun kadar bekleyin; ve gönüllü yok hareketleri var işlemler sırasında olduğundan emin olun.</li>
	<li>Dikkatle fareler tracheostomize ve bilgisayar kontrollü bir vantilatöre bağlı bir vücut Pletismograf yerleştirebilirsiniz. 
	Not: Havalandırma proksimale endotrakeal tüp bulunan bir vana ile kontrol edilir. Belgili tanımlık tertibat yarı statik basınç birimi manevra ve manevra hızlı akış hacminin de dahil olmak üzere farklı yarı otomatik manevralar sağlar.</li>
	<li>Her nefes döngüsü tam bitiminde elde edilir ve ortalama 150 nefes/dk düzenli nefes desen kadar basınç kontrollü havalandırma yoluyla imzalat fare sıklığını nefes empoze.</li>
	<li>Yarı statik basınç-hacim manevra aygıtla Pletismograf içinde oluşturulan negatif basınç kullanarak gerçekleştirmek.</li>
	<li>Hızlı Akış birim manevra FVC ve FEV kaydetmek için yarı statik basınç-hacim döngüler içinde gerçekleştirin. + 30 cm H 2 akciğer şişirmek O ve hemen sonrasında kalan birim FEV ilk 25, 50 ve soluk verme (FEV 25 75 ms-30 cm H 2 de O. kayıt olana sona erme zorlamak için son derece olumsuz bir basınç bağlanmak FEV 50 ve FEV 75, sırasıyla). Suboptimal manevralar reddetmek. Her tek fare ile her test için düzenleyeceği en az tüm sayısal parametreler için güvenilir bir ortalaması elde etmek için üç kabul edilebilir manevralar.</li>
</ol> 6. BALF koleksiyonu <ol><li>ardından terminal anestezi ile pelltobarbitalum natricum ((%1, 1,8-2.4 ml/100 g) fareyi bir ayak çimdik cevap değil ve nefes kaybetmek görmek için bireysel durumlarda göre doz ayarlamak), lavaj PBS 2 mL 1 mm çaplı endotrakeal tüp ve sonra al BALF 10 üzerinden ile fareler.</li>
	<li>Erişim tarihi lavaj aliquots havuz ve onlara 4 ° C ve 250 x g 10 dakika süreyle santrifüj kapasitesi</li>
	<li>İçin acele kullanma süpernatant toplamanız ve kalan-80 ° C ya da sıvı azot,.</li>
	<li>Bir hemasitometre kullanarak hücreleri toplam sayısını saymak.</li>
	<li>PBS ve sonra spin (1400 x g, 6 dk.) 250 µL slayta bir slayt spinner santrifüj kullanarak resuspended hücrelerinin hücre Pelet resuspend.</li>
	<li>İçin geçerli Wright boyama hücreleri slaytlara üreticiye göre &#39; s protokolü.</li>
	<li>Fare başına 200 hücreleri saymak; 400 X büyütme altında; Standart Morfoloji göre hücreleri makrofajlar veya nötrofil, tanımlamak ve sayıları saymak.</li>
</ol> 7. Kalp kan örnekleme <ol><li>kardiyak ponksiyon yoluyla kan toplamak, 1.5 mL tüpler, içine yük ve buz 30 dakika süreyle devam et</li>
	<li>2000 g x ve 4 5 min için kan örnekleri santrifüj kapasitesi ° C.</li>
	<li>Süpernatant (serum) için yeni bir tüp aktarın ve-80 ° C ya da sıvı azot depolayın.</li>
	<li>IL-1β için serum hazırlamak IL-10 ve ilgili ELISA Kitleri kullanarak TNF-α algılama testleri.</li>
</ol> 8. Akciğer xarakteristikaları analizi <ol><li>teşrih akciğerler ve fareler üzerinden tracheas.
	<ol><li>Cerrahi bir tahta üzerine euthanized her fare hemen kurbandan sonra konumlandırın.</li>
		<li>Uzak platysma incelemek ve görselleştirmek ve trakeal halkalar erişmek için ön trakeal kaslar.</li>
		<li>Açık yukarıya göğüs boşluğuna. Akciğerler ve nefes borusu incelemek, ama kalp akciğerlerden ayırmayın.</li>
	</ol>
	</li> <li>%4 paraformaldehyde PE90 polietilen boru aracılığıyla içeren bir şırınga endotrakeal kateter bağlanmak. 
	Dikkat: Paraformaldehyde zehirlidir. Eldiven ve koruyucu gözlük ve duman başlık içinde çözüm kullanın.</li>
	<li>Tamamen %4 paraformaldehyde (10 damla, ~ 200 µL) kullanarak akciğer endotrakeal kateter şişirmek. Kalp enflasyon tamamlandıktan sonra kaldırın.</li>
	<li>Bakım için en az 4 h %4 paraformaldehyde 10 mL içeren 15 mL tüp içinde akciğer</li>
	<li>Embed parafin akciğerde. 5-µm bölümleri parafin blok bir döner microtome ile kesit elde. Kesit sırasında maruz maksimum yüzey alanı bronş ağacının alanı içinde akciğer dokusunun.</li>
	<li>Xarakteristikaları için Hematoksilen ve Eozin çözümlemesi (H &#38; E) bölümleri boyama.</li>
	<li>Bölümleri alan parlak dik mikroskopla (objektif lens, 20 X; pozlama süresi, 1.667 ms) görüntü.</li>
	<li>İki müfettişler tedavi protokolü kör bağımsız olarak saymak histolojik kesitler var. Ortalama doğrusal kesme noktası (L m) arası alveoler septal duvar mesafe ölçmek için bir parametre olarak kullanmak. Aşağıdaki adımları uygulayarak L m belirlemek: <ol><li>bölümleri görüntüleri Photoshop açın ve beş 550 µm uzun hatları ile görüntü üzerinde reticule kılavuz çizin.</li>
		<li>Alveoller arasında kılavuz çizgisi sayısını.</li>
		<li>L m kılavuz çizgisi uzunluğunu alveoller sayısına bölünmesi ile hesaplayın. Miktar için fare başına beş bölüm görüntü. Her bölümün (alan başına bir görüntü) on görüntüleri ve rastgele değerlendirmek. Bir alan önde ya da başka bir yöne hareket ettirerek airways ve gemiler alan seçimi sırasında kaçının. 
		Not: Veri ortalama ± S.E.M. sunulmaktadır Un eşleştirilmiş bir t-test hava maruz fareler ve fareler ozon maruz arasında karşılaştırma için gerçekleştirilmiştir. Her grubun üç hayvan önemli farkı hesaplamak için kullanılmıştır. P-değeri &#60; 0,05 olarak önemli kabul.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Z.W.S. ve chilling geçerli çalışanları ve hücresel Biyomedikal grup hisse senedi opsiyonu sahipleri vardır (NASDAQ: CBMG). Diğer yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.

Bu çalışmada, biz yeni bir KOAH model oluşturmak için güvenilir bir yöntem mevcut. Diğer modeller için (Yani, LPS ya da KKE modelleri) karşılaştırıldığında, bu OE model KOAH hastaları patolojik süreci beyannamedir. Sigara dumanı KOAH insan hasta40neden olan ana tehlikeli madde olduğundan, CS model en popüler KOAH model41,42kalır. Ancak, 3 - 12 ay R CS model gerektirir &#38; D dönem için yeni ilaçlar. CS m...

KOAH, Amfizem ve kronik bronşit gibi ölüm üçüncü önde gelen nedenidir 20201,2dünyada olabilir tahmin ediyor. KOAH potansiyel insidansı 40 yıldır eski bir popülasyondaki erkeklerde % 12,7 ve dişilerde3önümüzdeki 40 yıl içinde % 8.3 olduğu tahmin edilmektedir. Hiçbir ilaç KOAH hastaları4ilerleyici bozulma tersine çevirmek şu anda mevcuttur. KOAH güvenilir hayvan modelleri sadece hastalık patolojik süreci taklit talep ediyorum ama aynı zamanda kısa nesil süresi gerektirir. LPS veya bir PPE kaynaklı modeli de dahil olmak üzere geçerli KOAH modelleri amfizem benzeri semptomlar5,6tetikleyebilir. Tek bir yönetim veya işaretli neutrophilia bronchoalveolar lavaj sıvı (BALF), artar pro-inflamatuar aracılar (Örneğin, TNF-α ve IL-1β) BALF veya serum, fare ya da sıçan sonuçlarında LPS veya KKE bir haftalık meydan okuma akciğer üretir parenkimal imha genişlemiş hava boşluk ve sınırları hava akımı5,6,7,8,9,10. Ancak, LPS veya KKE insan KOAH nedenleri değildir ve böylece patolojik süreç11taklit değil. CS kaynaklı manken üretilen bir kalıcı hava akımı sınırlama, akciğer parenkima yıkım ve fonksiyonel egzersiz kapasitesi düşük. Ancak, geleneksel bir CS Protokolü KOAH model12,13,14,15oluşturmak için en az 3 ay gerekir. Böylece, iki gereksinimlerini karşılayan yeni, daha etkili bir hayvan modeli oluşturmak önemlidir.
Son zamanlarda, ek olarak sigara, hava kirliliği ve mesleki maruz kalma KOAH16,17,18daha yaygın nedenleri olmuştur. Ozon, önemli kirletici biri olarak (değil önemli bileşeni hava kirliliği rağmen), doğrudan solunum yolu ile tepki ve çocuklar ve genç yetişkinler19,20,21 akciğer dokusuna zarar ,22,23,24,25. Ozon yanı sıra LPS, KKE ve CS, de dahil olmak üzere diğer uyarıcılar bir ciddi pulmoner oksidatif stres ve DNA hasarı biyokimyasal yolları katılmaktadırlar ve inisiyasyon ve promosyon KOAH26,27bağlantılıdır. Bazı KOAH hastaları belirtileri gösteren ozon Akciğer işlev18,28,29bozabilir ozon için maruz sonra bozulabilir başka bir faktördür. Bu nedenle, biz tekrar tekrar 7 hafta boyunca fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir KOAH model oluşturulan; Bu hava akımı kusurları ve akciğer parenkima hasarı önceki araştırmalar30,31,32benzer sonuçlandı. Biz bu çalışmada kadın farelere OE Protokolü genişletilmiş ve başarılı bir şekilde bizim önceki çalışmalar30,31,32erkek farelerde gözlenen amfizem çoğaltılamaz. KOAH ölüm oranı erkeklerde azaldı ama birçok ülkede33kadınlarda artmıştır çünkü KOAH manken dişilerde mekanizmaları çalışmaya ve kadın KOAH hastaları için tedavi yöntemleri geliştirmek için gereklidir. Tüm cins OE modeline uygulanabilirliği KOAH manken olarak kullanmak için daha fazla destek ödünç.

<table width="1024">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">BALB/c mice</td>
			<td style="width:217px;">Slac Laboratory Animal,Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:455px;">7-to-9-week-old female BALB/c mice were used in this study.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Individual ventilated cages</td>
			<td style="width:217px;">Suhang, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">Model Number: MU64S7</td>
			<td>The cages were used for housing mice in the animal facility.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Sealing perspex-box</td>
			<td style="width:217px;">Suhang, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:455px;">The box was used&#160; to contain the ozone generator. Mice were exposed to ozone within the box.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Electric generator</td>
			<td style="width:217px;">Sander Ozoniser, Uetze-Eltze, Germany</td>
			<td style="width:143px;">Model 500&#160;</td>
			<td>The device was used for generating ozone.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Ozone probe</td>
			<td style="width:217px;">ATi Technologies, Ashton-U-Lyne, Greater Manchester, UK</td>
			<td style="width:143px;">Ozone 300</td>
			<td>The device was used for monitoring and controlling the generation of ozone.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Pelltobarbitalum natricum</td>
			<td style="width:217px;">Sigma, St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:143px;">P3761</td>
			<td style="width:455px;">Mice were anesthetized by intraperitoneal injection of pelltobarbitalum natricum.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Micro-Computed Tomography</td>
			<td style="width:217px;">GE Healthcare, London, ON, Canada</td>
			<td style="width:143px;">RS0800639-0075</td>
			<td>This device was used for acquiring images of the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Micro-view 2.01 ABA software</td>
			<td style="width:217px;">GE Healthcare, London, ON, Canada</td>
			<td style="width:143px;">Micro-view 2.01&#160;</td>
			<td>This device was used for reconstruct the lung and analyze volume, LAA of the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Treadmill machine&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Duanshi, Hangzhou, Zhejiang, China</td>
			<td style="width:143px;">DSPT-208</td>
			<td>This machine was usd for fatigue test.</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="width:211px;height:38px;">Body plethysmograph</td>
			<td style="width:217px;">eSpira&#8482; Forced Manoeuvres System, EMMS, Edinburgh, UK</td>
			<td style="width:143px;">Forced Manoeuvres System</td>
			<td height="80">This device was used to test spirometry pulmonary function.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Ventilator</td>
			<td style="width:217px;">eSpira&#8482; Forced Manoeuvres System, EMMS, Edinburgh, UK</td>
			<td style="width:143px;">Forced Manoeuvres System</td>
			<td height="80">This device was used to test spirometry pulmonary function.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Slide spinner centrifuge</td>
			<td style="width:217px;">Denville Scientific, Holliston, MA, USA</td>
			<td>C1183&#160;</td>
			<td>It was used to spin BALF cells onto slides.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Wright Staining</td>
			<td style="width:217px;">Hanhong, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">RE04000054</td>
			<td>&#160;It was used to staining macrophages, neutrophils in the suspended BALF.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:217px;">Hausser Scientific, Horsham, PA, USA</td>
			<td style="width:143px;">4000</td>
			<td>It was used to count cells.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">IL-1&#946;</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab100704</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">IL-10</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab46103</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">TNF-&#945;</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab100747</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Paraformaldehyde&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Sigma, St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:143px;">P6148</td>
			<td>The lung was inflated by 4% paraformaldehyde.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Paraffin</td>
			<td style="width:217px;">Hualing, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">56#</td>
			<td>It was used to embed the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Rotary Microtome</td>
			<td style="width:217px;">Leica, Wetzlar,&#160; Hesse, Germany</td>
			<td style="width:143px;">RM2255</td>
			<td>It was used for sectioning the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Hgaematoxylin and Eosin (H&#38;E) staining solution</td>
			<td style="width:217px;">Solarbio, Beijing, China</td>
			<td style="width:143px;">G1120</td>
			<td>H&#38;E staining was done for morphometric analysis.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Upright bright field microscope</td>
			<td style="width:217px;">Olympus, Center Valley, PA, USA</td>
			<td style="width:143px;">CX41</td>
			<td>It was used to image the H&#38;E staining slides.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Adobe Photoshop 12</td>
			<td style="width:217px;">Adobe, San Jose, CA, USA</td>
			<td style="width:143px;">Adobe Photoshop 12</td>
			<td>It was used to count the number of alveoli on the H&#38;E stained images.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">GraphPad prism 5</td>
			<td style="width:217px;">Graphpad Software Inc., San Diego, CA</td>
			<td style="width:143px;">GraphPad prism 5</td>
			<td>It was used for data analysis and production of figures.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a chronic obstructive pulmonary disease model in mice by repeated ozone exposure

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) tarafından kalıcı hava akımı sınırlama ve akciğer parenkima imha karakterizedir. Nüfus yaşlanma içinde bir çok yüksek insidansı vardır. Geçerli geleneksel tedaviler KOAH odak çoğunlukla açık belirti-modifiye ilaçlar için; Böylece, yeni tedavilerin geliştirilmesi acilen ihtiyacı vardı. KOAH nitelikli hayvan modelleri temel mekanizmaları karakterize etmek için yardımcı olabilir ve yeni ilaç tarama için kullanılabilir. Lipopolysaccharide (LPS) gibi geçerli KOAH modelleri veya domuz pankreas elastase (PPE)-indüklenen amfizem modeli, akciğerler ve airways KOAH benzeri lezyonlar oluşturur ancak aksi takdirde insan KOAH patogenezinde benzer değil. Bir sigara dumanı (CS)-indüklenen model kalır en popüler çünkü sadece solunum sistemi lezyonlarının KOAH gibi taklit eder, ama bu da insanlarda KOAH neden ana tehlikeli madde birini dayanır. Ancak, CS kaynaklı modeli zaman alıcı ve emek yoğun yönlerini önemli ölçüde kendi uygulamasında yeni uyuşturucu tarama sınırı. Bu çalışmada, biz başarıyla yeni KOAH manken fareler için ozon yüksek düzeyde maruz tarafından oluşturulan. Bu modeli aşağıda gösterilmiştir: 1) zorunlu Ekspiratuar cilt 25, 50 ve 75/zorla vital kapasite azalmıştır (FEV25/FVC, FEV50/FVC ve FEV75/FVC), akciğer fonksiyonu; bozulma gösteren 2) büyütülmüş akciğer alveoller akciğer parenkima imha ile; 3) yorgunluk zaman ve mesafe azalır; ve 4) artış iltihabı. Birlikte ele alındığında, bu veriler ozon pozlama (OE) modeli ozon dozun KOAH etyolojik faktörlerden biri olduğu için insanlara benzer bir güvenilir hayvan modeli olduğunu ispat. Ayrıca, sadece 6-8 hafta, 3-12 ay OE modeli KOAH araştırma için iyi bir seçim olabilir gösteren sigara dumanı modeli ikna etmek için gerektirir, ancak bir OE modeli oluşturmak için önceki çalışmalarımız, temel aldı.

3D µCT görüntüleri her grubun örnekleri şekil 1biriçinde görüntülenir. Önemli ölçüde daha büyük bir toplam akciğer hacim ozon maruz fareler vardı (şekil 1bir ve b) ve LAA % (şekil 1c) hava maruz kontrol fareler daha. Akciğer hacmi ve LAA % ozon pozlama31,32altı hafta son...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure at JoVE.com

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı manken tekrarlanan ozon maruz farelerde nesil

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...

generation-chronic-obstructive-pulmonary-disease-model-mice-repeated

Research

JoVE Journal

Medicine

10.8K Görüntüleme.  Cellular Biomedicine Group, Shanghai. Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.

Video: Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, including mental retardation due to disordered and damaged brain development. Fetal alcohol spectrum disorder (FASD) is a term used to cover a continuum of birth defects that occur due to maternal alcohol consumption, and occurs in approximately 4% of children born in the United States. With 50% of child-bearing age women reporting consumption of alcohol, and half of all pregnancies being unplanned, unintentional exposure is a continuing issue2. In order to best understand the damage produced by ethanol, plus produce a model with which to test potential interventions, we developed a model of developmental ethanol exposure using the zebrafish embryo. Zebrafish are ideal for this kind of teratogen study3-8. Each pair lays hundreds of eggs, which can then be collected without harming the adult fish. The zebrafish embryo is transparent and can be readily imaged with any number of stains. Analysis of these embryos after exposure to ethanol at different doses and times of duration and application shows that the gross developmental defects produced by ethanol are consistent with the human birth defect. Described here are the basic techniques used to study and manipulate the zebrafish FAS model.

In order to understand the molecular mechanisms of the ethanol-induced developmental damage, we have developed a zebrafish model of ethanol exposure and are exploring the physical, cellular, and genetic alterations that occur after ethanol exposure1. We then seek to find potential interventions and rapidly test them in this animal model.

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Tıp

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Repeated Measurement of Respiratory Muscle Activity and Ventilation in Mouse Models of Neuromuscular Disease

Accessory respiratory muscles help to maintain ventilation when diaphragm function is impaired. The following protocol describes a method for repeated measurements over weeks or months of accessory respiratory muscle activity while simultaneously measuring ventilation in a non-anesthetized, freely behaving mouse. The technique includes the surgical implantation of a radio transmitter and the insertion of electrode leads into the scalene and trapezius muscles to measure the electromyogram activity of these inspiratory muscles. Ventilation is measured by whole-body plethysmography, and animal movement is assessed by video and is synchronized with electromyogram activity. Measurements of muscle activity and ventilation in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis are presented to show how this tool can be used to investigate how respiratory muscle activity changes over time and to assess the impact of muscle activity on ventilation. The described methods can easily be adapted to measure the activity of other muscles or to assess accessory respiratory muscle activity in additional mouse models of disease or injury.

This paper introduces a method for repeated measurements of ventilation and respiratory muscle activity in a freely behaving amyotrophic lateral sclerosis (ALS) mouse model throughout disease progression with whole-body plethysmography and electromyography via an implanted telemetry device.

Nöromusküler Hastalığının Fare Modelinde Solunum Kas Aktivitesi ve Havalandırma tekrarlanan ölçüm

Accessory respiratory muscles help to maintain ventilation when diaphragm function is impaired. The following protocol describes a method for repeated ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ventral neck for direct confirmation of cannula placement in the trachea. The relative difficulty or the tissue trauma induced to the subject by such procedures can be an impediment to an investigator&#8217;s ability to perform longitudinal studies. This article illustrates a technique in which physical manipulation of the mouse following the use of a depilatory to remove hair from the ventral neck permits transcutaneous visualization of the trachea for orotracheal intubation regardless of degree of skin pigmentation. This method is innocuous to the subject and easily achieved with a limited understanding of murine anatomy. This refined approach facilitates repeated intubation, which may be necessary for monitoring progression of disease or instillation of treatments. Using this method may result in a reduction of the number of animals and technical skill required to measure lung function in mouse models of respiratory disease.

The goal of this article is to describe a refined method of intubation of the laboratory mouse. The method is noninvasive and, therefore, ideal for studies that require serial monitoring of respiratory function and/or instillation of treatments into the lung.

Farelerde Tekrarlanan Orotracheal Entübasyon

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary arterial hypertension (PAH). As a result, approved therapeutic interventions for the treatment or prevention of PH-LHD are missing. Medications used to treat PH in PAH patients are not recommended for treatment of PH-LHD, as reduced pulmonary vascular resistance (PVR) and increased pulmonary blood flow in the presence of increased left-sided filling pressures may cause left heart decompensation and pulmonary edema. New strategies need to be developed to reverse PH in LHD patients. In contrast to PAH, PH-LHD develops due to increased mechanical load caused by congestion of blood into the lung circulation during left heart failure. Clinically, mechanical unloading of the left ventricle (LV) by aortic valve replacement in aortic stenosis patients or by implantation of LV assist devices in end-stage heart failure patients normalizes not only pulmonary arterial and right ventricular (RV) pressures but also PVR, thus providing indirect evidence for reverse remodeling in the pulmonary vasculature. Using an established rat model of PH-LHD due to left heart failure triggered by pressure overload with subsequent development of PH, a model is developed to study the molecular and cellular mechanisms of this physiological reverse remodeling process. Specifically, an aortic debanding surgery was performed, which resulted in reverse remodeling of the LV myocardium and its unloading. In parallel, complete normalization of RV systolic pressure and significant but incomplete reversal of RV hypertrophy was detectable. This model may present a valuable tool to study the mechanisms of physiological reverse remodeling in the pulmonary circulation and the RV, aiming to develop therapeutic strategies for treating PH-LHD and other forms of PH.

The present protocol describes a surgical procedure to remove ascending-aortic banding in a rat model of pulmonary hypertension due to left heart disease. This technique studies endogenous mechanisms of reverse remodeling in the pulmonary circulation and the right heart, thus informing strategies to reverse pulmonary hypertension and/or right ventricular dysfunction.

Sıçanlarda Aort Debandingi ile Sol Kalp Hastalığına Bağlı Pulmoner Hipertansiyonda Ters Vasküler Yeniden Şekillenme Modeli

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

A Silicosis Mouse Model Established by Repeated Inhalation of Crystalline Silica Dust

Silicosis can be caused by exposure to respiratory crystalline silica dust (CSD) in an industrial environment. The pathophysiology, screening, and treatment of silicosis in humans have all been extensively studied using the mouse silicosis model. By repeatedly making mice inhale CSD into their lungs, the mice can mimic the clinical symptoms of human silicosis. This methodology is practical and efficient in terms of time and output and does not cause mechanical injury to the upper respiratory tract due to surgery. Furthermore, this model can successfully mimic acute/chronic transformation process of silicosis. The main procedures were as follows. The sterilized 1-5 &#181;m CSD powder was fully ground, suspended in saline, and dispersed in an ultrasonic water bath for 30 min. Mice under isoflurane-induced anesthesia switched from shallow rapid breathing to deep, slow aspiration for approximately 2 s. The mouse was placed in the palm of a hand, and the thumb tip gently touched the lip edge of the mouse's jaw to straighten the airway. After each exhalation, the mice breathed in the silica suspension drop by drop through one nostril, completing the process within 4-8 s. After the mice's breathing had stabilized, their chest was stroked and caressed to prevent the inhaled CSD from being coughed up. The mice were then returned to the cage. In conclusion, this model can quantify CSD along the typical physiological passage of tiny particles into the lung, from the upper respiratory tract to the terminal bronchioles and alveoli. It can also replicate the recurrent exposure of employees due to work. The model can be performed by one person and does not need expensive equipment. It conveniently and effectively simulates the disease features of human silicosis with high repeatability.

This protocol describes a method for establishing a mouse model of silicosis through repeated exposure to silica suspensions via a nasal drip. This model can efficiently, conveniently, and flexibly mimic the pathological process of human silicosis with high repeatability and economy.

Kristal silika tozunun tekrar tekrar solunmasıyla oluşturulan bir silikoz fare modeli

Silicosis can be caused by exposure to respiratory crystalline silica dust (CSD) in an industrial environment. The pathophysiology, screening, and ...

Acupoint Application Combined with Acupoint Massage for Treating Constipation in a Patient with Chronic Obstructive Pulmonary Disease

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a common and frequent disease in elderly patients, with a tendency for progressive exacerbation. Constipation that reduces the quality of life and triggers the risk of diseases is a common concomitant symptom in patients with COPD. Currently, western medical treatment does not achieve the desired results for patients. A high recurrence rate accompanies it, whereas traditional Chinese medicine (TCM) has a long history and rich experience in treating chronic diseases. Both acupoint application and acupoint massage are characteristic therapies of TCM, with minor side effects, high safety, simple operation, and outstanding advantages. They are effective in treating constipation for patients with COPD and are considered an ideal alternative therapy for patients with chronic constipation. The purpose of this article is to introduce the method of acupoint application combined with acupoint massage for the treatment of constipation in patients with COPD, including the selection of points, items, treatment time, and operation procedure.

Here we demonstrate acupoint application combined with acupoint massage for treating constipation in a patient with chronic obstructive pulmonary disease (COPD).

Kronik Obstrüktif Akciğer Hastalığı Olan Bir Hastada Kabızlık Tedavisinde Akupunktur Noktası Masajı ile Kombine Akupunktur Noktası Uygulaması

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a common and frequent disease in elderly patients, with a tendency for progressive exacerbation. ...

KOAH Hastalarında Uyku Bozukluklarını Hafifletmek İçin Kulakların Akupunktur Stimülasyonu

Auricular Acupuncture as a Traditional Chinese Medicine Therapy for Chronic Obstructive Pulmonary Disease Combined with Sleep Disorders

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a clinical syndrome characterized by persistent and irreversible airflow limitation and chronic respiratory symptoms. It has a wide spectrum of complications, and sleep disorders, as part of it, are common in severe cases, especially in elderly patients. Long-term lack of sleep may lead to the aggravation of the original disease, reducing patients' quality of life. Benzodiazepines are mainly used for symptomatic treatment of COPD combined with sleep disorders. However, such drugs have the side effect of respiratory central inhibition and could probably aggravate hypoxia symptoms. Auricular acupuncture is a special method of treating physical and psychosomatic dysfunctions by stimulating specific points in the ear. This article explains the specific methods of clinical operation of auricular acupuncture in detail, including assessment of patient eligibility, medical devices used, acupuncture points, course of treatment, post-treatment care, responses to emergencies, etc. The Pittsburgh sleep quality index (PSQI) and chronic obstructive pulmonary disease assessment scale (CAT) were used as the observational index of this method. So far, clinical reports have proved that auricular acupuncture has a definite curative effect in the treatment of COPD combined with sleep disorders, and its advantages of simple operation, few adverse reactions are worthy of further study and promotion, which provide a reference for the clinical treatment of such diseases.

Yazar Spotlight: Uyku Bozukluklarını İyileştirmek için Kulağın Geleneksel Çin Akupunkturunu Kullanma 

This protocol introduces an effective method to improve the sleep condition of patients with chronic obstructive pulmonary disease and alleviate cough symptoms by using auricular acupuncture techniques to percutaneously stimulate specific acupoints in the patients' ears.