Bu yöntem, farelerde lens kaynaklı miyopi indükleme ve değerlendirme ile ilgili anahtar soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Lenslerin nasıl stabilize edilebildiğim gibi. Bu tekniğin bir numaralı aşaması, tüm adımların optimize edilmiş ve laboratuvarlar arasında kesin, tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir sonuçlar elde edilmesine olanak sağlayan standartlaştırılmış olmasıdır.
Genel olarak, bu yönteme yeni insanlar herhangi bir uygulama olmadan merdiven üzerine gözlük yapıştırmak çok zor olduğu için mücadeledir. Her fare için aşağıdakileri hazırlayın. Bir baş-monte naylon sopa.
Bir daha yüksek ve bir alt titanyum çerçeve. Deneyin amacına göre uygun güçlere sahip iki lens. Bir 10mm uzunluğunda M1.4 boyutunda vida.
M1.4 boyutu vida için bir somun. 0.3 milimetre kalınlığındaki M1.4 boyutundaki vida için 1 düz yıkama. Ve iki yapay tırnak ucu.
Sağ gözlük çerçevesini monte etmek için, en iyi koruyucu etkiyi elde etmek için dış yöne bakan bir tırnak ucu düzenleyin. Ayrıca, fare görüş alanını maskelememek için tırnak ucu ve çerçeve arasındaki açıyı yaklaşık 130 dereceye ayarlayın. Siyanoakrilat yapıştırıcı kullanarak, çerçeveye yapay tırnak ucu yapıştırın ve yapıştırıcı 12 saat tamamen kurumasını bekleyin.
Tam yapışan tırnak ucunu bir santimetre şekle kadar kesmek ve lensi çerçevenin üzerine yerleştirmek için tırnak makası kullanın. Lensin kenarından siyanoakrilat yapıştırıcı enjekte edin ve yapıştırıcıyüzey gerilimi ile yayılmasını sağlar. Yapıştırıcı kuruolduğunda, vidayı naylon çubuğun düz tarafındaki yıkama ile birlikte sıkın.
Daha sonra sağ çerçeve ucunun ters yönde açılı parmak ucu ile aynı şekilde sol çerçeve hazırlayın. Eksenel uzunlukta ki kırılmanın temel ölçümü için, göz bebeğini dilate etmek için göz küresinin her iki tarafında mililitre likit tropikamid başına beş miligram ve mililitre fenilefrin hidroklorür başına beş miligram içeren bir damla midriyal ajan uygulayın. Genel anesteziden önce en az beş dakika bekleyin ve kızılötesi fotoğraf refraktörünün vizöründeki gözlerden birinin yönünü ayarlayarak ilk Purkinje görüntüsünü öğrencinin ortasına yerleştirin ve optik eksen boyunca kırılmayı ölçün.
Diğer gözü de aynı şekilde ölçtükten sonra, fareyi spektral etki alanı optik koherens tomografi sistemine yerleştirin ve eksenel uzunluğu kornea girdabından optik sinirin yakınındaki en parlak sınıra olan uzaklığı olarak tanımlayın. Fare üzerine önceden hazırlanmış gözlük çerçevesini düzeltmek için, öncelikle her göze %0,1 saflaştırılmış sodyum hyaluronat göz damlası uygulayın ve anestenize edilmiş farenin çenesini eğimli bir yüzeye yerleştirin, böylece kafatasının ön düzlemi yatay olur. Saç ve kafa derisi sterilize etmek için% 70 etanol ile ıslatılmış bir pamuklu bez kullanın, kulaklar ve gözler arasında, cilt te 0.8 cm kare kesi yapmak, kulaklar ve gözler arasında, kafatası ortaya çıkarmak için.
Periyostiği çıkarmak için pamuklu bir beziçinde diş gravür sıvısı kullanın ve her iki gözün de boş çerçevelerin ortasında olduğundan emin olmak için çerçevelerin konumunu dikkatlice ayarlayarak, çubuğu doğru konuma sabitlemeye yardımcı olmak için merceksiz bir çift çerçeve kullanın. Fare kafasına sopa takmak için bir self-care diş yapıştırıcı sistemi kullanın ve dikkatle sopa konumunu değiştirmeden çerçeve ve somun çıkarmadan önce yaklaşık beş dakika bekleyin. Daha sonra farenin anesteziden daha hızlı kurtulmasına ve fareyi tamamen iyileşene kadar tek bir kafese yerleştirmesine yardımcı olmak için intraperitoneal olarak kilogram başına 0,75 miligram atipamazolhidroklorür enjekte edin.
Ameliyattan 24 saat sonra, çubuğu tutun ve miyopi indüksiyonu başlatmak için camlı çerçeveleri hayvanın üzerine yerleştirin. Daha sonra fare ile kafes indime arasına bir ağ yerleştirin ve tüm deneysel süreç boyunca miyop fareleri aynı yaşlı, el değmemiş farelerle karşılaştırarak vücut ağırlığını ve brüt davranışını günlük olarak izleyin. Çerçeveyi çıkarın ve lenslerin saydamlığı korumak için haftada en az iki kez pamuklu bezlerle lensleri ve tırnak ucunu temizleyin.
Burada, tamamlanmış gözlük bir dizi gösterilir. İki kare arasındaki açı farklı yaşlardaki farelere uyacak şekilde ayarlanabilir. Gösterildiği gibi çerçeve üzerine gözlük yerleştirdikten sonra, gözlük iki adet oldukça simetrik olmalıdır.
Bir fare gözündeki bu kırılma ölçümü için, doğum sonrası 21 gününden başlayarak, 3 hafta boyunca negatif 30 diyoptre lens indüklenen bu kırılma ölçümü için, bakışlar hem x hem de y ekseninde sıfıra yakın dereceye yakın kontrol edilerek farenin kameranın tam önünde olduğunu gösteren bir ölçüm yapıldı. Fareler için ayarlanmış spektral etki alanı optik koherens tomografi sistemi tarafından çekilen bu tüm göz görüntüsü, gözün her parçasının tanımlanmasını sağlar. Bu temsili deneyde, negatif 30 diyoptre lens, sıfır diyoptre lenslere kıyasla hem kırılma hem de eksenel uzunluk ölçümlerinde güçlü bir miyop kaymaya neden oldu.
Kırılmadaki değişim ilk hafta doruğa ulaştı ve sonraki iki hafta boyunca sabit kaldı, miyop göz değişimi ile kontrol göz eksenel uzunlukları arasındaki fark ilk haftadan itibaren önemli ydi ve takip eden iki hafta içinde daha da büyüdü. Prosedürü denerken, sonucun deneysel laboratuvarlar arasında karşılaştırılabilir olmasını sağlamak için kırılma ve eksenel lensi ölçme talimatını yakından takip etmeyi unutmamak önemlidir. Bu teknik, geliştirilmelerinden sonra miyopi alanında araştırmacıların sadece sıradan farelerde değil, genetiği değiştirilmiş farelerde de patojenik mekanizmayı keşfetmelerinin önünü açıyor.
