Pseudomonas aeruginosa'dan Siderofor Üretiminin Kalitatif ve Kantitatif Analizi

Sideroforlar demir ile kompleksler oluşturur ve demir sınırlayıcı koşullar sırasında onu hücreye taşır. Sideroforlar, konakçıda ciddi enfeksiyon oluşturmaya yardımcı olan güçlü virülans faktörleridir ve Pseudomonas aeruginosa'da çekirdek algılamanın düzenlenmesinde rol oynadığı bilinmektedir. Araştırmamız, Pseudomonas'ta siderofor üretimini nicel olarak tahmin etmeyi amaçlamaktadır.

Sideroforlar hücre dışı moleküllerdir, bu nedenle toplam sideroforlar, pyoverdine ve pyochelin ile birlikte hücresiz süpernatan kullanılarak ölçülür. Piyochelin küçük hacimde tespit edilmediğinden, büyük hacimli hücresiz süpernatanttan ekstraksiyon yapılır. Son zamanlarda, piyochelin miktarının belirlenmesi için LCMS ve biyosensörler geliştirilmiştir.

LCMS, küçük laboratuvarlar için maliyetli bir kurulumdur, oysa biyosensörler yalnızca piyochelin miktarını belirleyebilir. Bu basit ve resimli protokol, minimum laboratuvar reaktifleri ve enstrümantasyonu kullanır ve sideroforun hücresiz süpernatanttan daha az zaman harcayarak tahmin edilmesini sağlar.