Name: murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production
Uploaded: 2023-11-17T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Vi tackar University of Texas Southwestern Medical Center Animal Resource Center för deras hjälp med kirurgisk utbildning och protokollgranskning. Vi tackar Wert Labs supportteam för deras ovärderliga hjälp. Detta arbete har stötts av medel från National Institute of Health (NIH P30EY030413). Biorender.com användes för att skapa tecknade scheman.

Alla djurförsök godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee vid UTSW (APN#2019-102840).
1. Mus orkidektomi
<ol><li>Förbered ett aseptiskt arbetsområde och se till att nödvändiga kirurgiska instrument har steriliserats och är lättillgängliga. Följ aseptiska rutiner för överlevnadskirurgi hos gnagare.</li>
	<li>Anteckna hanmusens vikt och administrera den föredragna anestesimetoden enligt de institutionella riktlinjerna. I detta protokoll levererades...

<ol>
	<li>Kaprara, A., Huhtaniemi, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamus-pituitary-gonad+axis:+Tales+of+mice+and+men.">The hypothalamus-pituitary-gonad axis: Tales of mice and men.</a> Metabolism. 86, 3-17 (2018).</li><li>Stamatiades, G. A., Kaiser, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin+regulation+by+pulsatile+GnRH:+Signaling+and+gene+expression.">Gonadotropin regulation by pulsatile GnRH: Signaling and gene expression.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 463, 131-141 (2018).</li><li>Plant, T. M., Marshall, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+significance+of+FSH+in+spermatogenesis+and+the+control+of+its+secretion+in+male+primates.">The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates.</a> Endocrine Reviews. 22 (6), 764-786 (2001).</li><li>Fuentes, N., Silveyra, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+signaling+mechanisms.">Estrogen receptor signaling mechanisms.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 116, 135-170 (2019).</li><li>Guo, X., Yu, X., Yao, Q., Qin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+effects+of+ovariectomy+on+bone+microstructure,+bone+turnover+markers+and+mechanical+properties+in+rats.">Early effects of ovariectomy on bone microstructure, bone turnover markers and mechanical properties in rats.</a> BMC Musculoskeletal Disorder. 23 (1), 316 (2022).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box+chromosomal+protein-1+deletion+alleviates+osteoporosis+in+OVX+rat+model+via+suppressing+the+osteoclastogenesis+and+inflammation.">High-mobility group box chromosomal protein-1 deletion alleviates osteoporosis in OVX rat model via suppressing the osteoclastogenesis and inflammation.</a> Journal of Orthopedic Surgery and Research. 17 (1), 232 (2022).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+attenuates+osteoporosis+in+orchiectomy+mice+by+regulating+glucose+and+lipid+metabolism.">Quercetin attenuates osteoporosis in orchiectomy mice by regulating glucose and lipid metabolism.</a> Frontiers in Endocrinology (Lausanne). 13, 849544 (2022).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testosterone+contributes+to+vascular+dysfunction+in+young+mice+fed+a+high+fat+diet+by+promoting+nuclear+factor+E2-related+factor+2+downregulation+and+oxidative+stress.">Testosterone contributes to vascular dysfunction in young mice fed a high fat diet by promoting nuclear factor E2-related factor 2 downregulation and oxidative stress.</a> Frontiers in Physiology. 13, 837603 (2022).</li><li>Bohm-Levine, N., Goldberg, A. R., Mariani, M., Frankfurt, M., Thornton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+luteinizing+hormone+levels+after+ovariectomy+improves+spatial+memory:+Possible+role+of+brain-derived+neurotrophic+factor.">Reducing luteinizing hormone levels after ovariectomy improves spatial memory: Possible role of brain-derived neurotrophic factor.</a> Hormones and Behavior. 118, 104590 (2020).</li><li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+deficiency+induces+memory+loss+via+altered+hippocampal+HB-EGF+and+autophagy.">Estrogen deficiency induces memory loss via altered hippocampal HB-EGF and autophagy.</a> Journal of Endocrinology. 244 (1), 53-70 (2020).</li><li>Laouari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sexual+dimorphism+of+kidney+growth+in+mice+and+humans.">The sexual dimorphism of kidney growth in mice and humans.</a> Kidney International. 102 (1), 78-95 (2022).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17&#946;-estradiol+replacement+in+rats+and+mice:+a+visual+demonstration.">Ovariectomy and 17&#946;-estradiol replacement in rats and mice: a visual demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e4013 (2012).</li><li>Valkenburg, K. C., Amend, S. R., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+prostate+micro-dissection+and+surgical+castration.">Murine prostate micro-dissection and surgical castration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53984 (2016).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).</li><li>Haider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sex+hormones+in+modulating+myocardial+perfusion+and+coronary+flow+reserve.">Role of sex hormones in modulating myocardial perfusion and coronary flow reserve.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (7), 2209-2218 (2022).</li><li>Joll, J. E., Bersi, M. R., Nyman, J. S., Merryman, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+early+bilateral+ovariectomy+in+mice+as+a+model+of+left+heart+disease.">Evaluation of early bilateral ovariectomy in mice as a model of left heart disease.</a> American Journal of Physiology Heart-Circulartory Physiology. 322 (6), H1080-H1085 (2022).</li><li>Lu, H., Ma, K., Jin, L., Zhu, H., Cao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17&#946;-estradiol+rescues+damages+following+traumatic+brain+injury+from+molecule+to+behavior+in+mice.">17&#946;-estradiol rescues damages following traumatic brain injury from molecule to behavior in mice.</a> Journal of Cell Physiology. 233 (2), 1712-1722 (2018).</li><li>Meydan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+testosterone+on+orchiectomy-induced+oxidative+damage+in+the+rat+hippocampus.">Effects of testosterone on orchiectomy-induced oxidative damage in the rat hippocampus.</a> Journal of Chemical Neuroanatomy. 40 (4), 281-285 (2010).</li><li>Ohlson, N., Bergh, A., Persson, M. L., Wikstr&#246;m, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Castration+rapidly+decreases+local+insulin-like+growth+factor-1+levels+and+inhibits+its+effects+in+the+ventral+prostate+in+mice.">Castration rapidly decreases local insulin-like growth factor-1 levels and inhibits its effects in the ventral prostate in mice.</a> Prostate. 66 (16), 1687-1697 (2006).</li><li>Tehranipour, M., Moghimi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+testosterone+on+regenerating+spinal+cord+motoneurons+in+rats.">Neuroprotective effects of testosterone on regenerating spinal cord motoneurons in rats.</a> Journal of Motor Behavior. 42 (3), 151-155 (2010).</li><li>Yamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+ovariectomy+on+olfactory+neuron+regeneration+in+mice.">The impact of ovariectomy on olfactory neuron regeneration in mice.</a> Chemical Senses. 45 (3), 203-209 (2020).</li><li>Koebele, S. V., Bimonte-Nelson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+menopause:+The+utility+of+rodents+in+translational+behavioral+endocrinology+research.">Modeling menopause: The utility of rodents in translational behavioral endocrinology research.</a> Maturitas. 87, 5-17 (2016).</li></ol>

Kirurgiskt avlägsnande av testiklar och äggstockar gör det möjligt att studera murina fysiologi under kontrollerad hormonbrist. Denna teknik är viktig för många vetenskapsområden, inklusive neurodegeneration, mineralmetabolism, kardiovaskulär och reproduktiv hälsa 15,16,17,18,19,20,21.</...

Testiklarna och äggstockarna är de primära organen som ansvarar för produktionen av könshormoner. Kaskaden av hormonell kommunikation som leder till produktion av testosteron och östrogen är en välkarakteriserad process som börjar i hypotalamus med frisättningen av gonadotropinfrisättande hormon (GnRH)1. Frisättningen av GnRH orsakar frisättning av luteiniserande hormon (LH) och follikelstimulerande hormon (FSH) från hypofysen. När dessa hormoner kommer in i blodomloppet påverkar de sedan andra vävnader i kroppen. Det primära målet för LH är testiklarna (hos män) och äggstockarna (hos kvinnor)2. Som svar på LH producerar och frigör testiklarna testosteron3. På samma sätt producerar äggstockarna östrogen4. Medan de avsedda effekterna av dessa hormoner är att förbereda cellerna och kroppen för befruktning och säkerställa ett fungerande reproduktionssystem, kan många andra kroppsliga system påverkas.
Könshormoner har kopplats till flera fysiologiska funktioner. Till exempel hjälper östrogen till att upprätthålla benhomeostas genom att förhindra resorption av ben av osteoklaster. Av denna anledning kan ovariektomerade musmodeller användas för att studera fysiologin hos bensjukdomar som osteoporos 5,6,7. Testosteron och östrogen är också forskningsmål för många kardiovaskulära och neurodegenerativa sjukdomar. Nyligen har förhöjd testosteronproduktion i kombination med fettrik kost kopplats till vaskulär oxidativ stress8. I hjärnan har förändringar i LH efter ovariektomi orsakat förändringar i det spatiala minnet9. Minskning av östrogener efter ovariektomi har också blivit ett modellsystem för att studera celldöd i hippocampus, eftersom detta kan inducera apoptos, vilket resulterar i minnesbrister10. Testosteron har också visat sig spela en roll i tillväxten av njurar både i musmodeller och hos människor efter njurtransplantation11.
Skapandet av en hormonberövad musmodell gör det möjligt att studera könshormoner och deras hormonkaskader på olika sjukdomar eller vävnader. Detta kan åstadkommas genom kirurgiskt avlägsnande av testiklarna (orkidektomi) eller äggstockarna (ovariektomi). Denna procedur kan utföras på möss av vilken stam som helst när de är så unga som avvänjningsålder (tjugoen dagar) eller vilken vuxen ålder som helst. Ovariektomi utförs på honmöss, medan orkidektomi utförs på hanmöss. Genom att ta bort dessa organ kan nivåerna av östrogen och testosteron och många av deras derivat, såsom progesteron, minskas kraftigt12,13. Processen att utföra orkidektomier eller ovariektomier på möss kan vara snabb och minimalt invasiv med rätt teknik. Snabb excision av dessa organ på ett säkert och effektivt sätt kan möjliggöra snabb kirurgisk bearbetning samtidigt som antalet möss hålls minimalt genom att ha en överlevnadsgrad på 100 % när det utförs korrekt. Här beskriver vi ett protokoll för snabb excision av testiklarna och äggstockarna och visar korrekt postoperativ övervakning för att göra det möjligt för forskare att utföra denna operation snabbt och säkert. Vi inkluderar också visuella exempel på könsorganen och omgivande vävnader för att ge kirurgen anatomiska landmärken när han utför denna procedur.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G 1/2&#34; Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0158124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-000-692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double -ended Micro Spatula</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10091-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Galilean Loupes</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>28050-30</td>
			<td>Optional, can provide better clarity during procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges, 4&#34;x4&#34;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Temp Cautery Kit</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>Using the fine tip attachment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29242</td>
			<td>4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Locking Micro Needle Holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12060-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>140-60-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue&#160;</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>#9861-900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine orchiectomy and ovariectomy to reduce sex hormone production

Könshormonsignalering spelar en avgörande roll i flera organsystem samt i utvecklingen av olika sjukdomar, inklusive neurodegenerativa sjukdomar. Manipulering av könshormonnivåer i det murina modellsystemet gör det möjligt att studera deras inverkan på organ/vävnader och inom sjukdomsprogression. Orkidektomi - kirurgiskt avlägsnande av testiklarna - och ovariektomi - kirurgiskt avlägsnande av äggstockarna - ger en metod för att tömma de endogena könshormonerna så att de exakta hormonnivåerna kan tillhandahållas genom läkemedel eller andra leveransmetoder. Här tillhandahåller vi snabba och minimalt invasiva metoder för både orkidektomi och ovariektomi i det murina modellsystemet för reduktion av könshormoner. Detta protokoll beskriver den kirurgiska förberedelsen och excisionen av testiklarna genom pungsäcken och excision av äggstockarna via två snitt i höger och vänster laterala dorsum.

Proceduren som presenteras här utförs på en till tre månader gamla möss i C57BL/6J-bakgrunden. Hanmöss vägde 16-28 g och honmöss vägde 14-24 g vid tidpunkten för ingreppet. Denna procedur har optimerats för att vara tillämplig på möss i många åldrar, från avvänjning till vuxen ålder.
Kirurgisk orkidektomi innebär ett enda hudsnitt i den ventrala pungsäcken, som avbildas i figur 1A. Båda testiklarna avlägsnas en i taget och skärs av genom s?...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production at JoVE.com

Murine Orchiectomy and Ovariectomy to Reduce Sex Hormone Production

Detta manuskript beskriver ett konsekvent sätt att snabbt utföra överlevnadsrodgare orkidektomier och ovariektomier.

Murin orkidektomi och ovariektomi för att minska produktionen av könshormon

Sex hormone signaling plays a critical role in multiple organ systems as well as in the progression of various diseases, including neurodegenerative ...

Det övergripande målet med denna procedur är att demonstrera kirurgiskt avlägsnande av murina testiklar och äggstockar på ett snabbt, säkert och effektivt sätt. Murin orkidektomi utförs genom ett ventralt mittlinjesnitt i pungen, där testiklarna isoleras och avlägsnas, följt av stängning av hudsnittet. Murin ovariektomi utförs genom ett dorsolateralt snitt i buken där äggstocken isoleras och avlägsnas, följt av stängning av hudsnittet, med möjlighet att upprepa denna procedur på andra sidan för att utföra en bilateral ovariektomi.För att påbörja murin orkidektomi, börja först med att registrera vikten av en hanmus och förbered dig på att administrera lämplig smärtstillande medicin och bedövningsmedel enligt dina institutionella riktlinjer. När musen är nedsövd, täck ögonen med en smörjande ögongel för att skydda dem från att torka ut under proceduren. Innan du fortsätter, se till att musen befinner sig på ett lämpligt anestesiplan genom att utföra ett tånypningstest.Raka sedan ljumsk- och pungområdena på musen. Använd en applikator med bomullsspets och applicera ett tunt lager hårborttagningskräm på operationsstället och omgivande områden. Efter 30 sekunder tar du bort hårborttagningskrämen med den rena gasvävssvampen.Överför musen till ett kirurgiskt område och se till att en värmekälla finns tillgänglig. Använd mjuk tejp för att fästa musens fötter på operationsmattan. Om testiklarna har stigit upp i buken, använd ett lätt tryck på buken för att hjälpa dem att sjunka ner.Skrubba huden med Betadine-lösning, börja i mitten över operationsområdet och arbeta dig lätt utåt mot gränsen till det rakade området. Följ upp Betadine-skrubben med en alkoholskrubb som utförs på liknande sätt. Upprepa denna process tre gånger för att säkerställa korrekt desinfektion av huden.Täck musen med operationsduken. Ta tag i huden och gör ett snitt i mittlinjen som är cirka 1 till 1 1/2 centimeter långt. Ta tag i den skurna kanten av huden och använd ett trubbigt spetsinstrument för att separera huden från den underliggande vävnaden.Ta dig tid att göra detta på snittets laterala, övre och nedre gränser. Isolera sedan en testikel genom att skjuta hudsnittet så att det ligger direkt ovanpå den. Använd en pincett för att ta tag i den tunna, genomskinliga cremastermuskeln som omger testikeln.Identifieringen av rätt vävnad kan bekräftas av dess transparens och dess förmåga att röra sig oberoende av de underliggande vävnaderna som är inneslutna i den. Snitta sedan cremastermuskeln genom att göra ett snitt i vävnadens topp. Placera en låsklämma på den bakre kanten av den skurna cremastermuskeln för att hålla spänningen på vävnaden.Använd en pincett för att ta tag i testikeln och exteriorisera den från dess cremasterskida. När testikeln är ute, rulla vävnaden i sidled och lokalisera cremaster-insättningspunkten som förbinder cremastermuskeln med testikeln och bitestiklarna på den bakre sidan av testikeln. Kläm fast och riv denna vävnad för att bryta denna förbindelse.Exteriorisera ljumskfettkudden genom att långsamt dra ut den. När du gör detta, titta efter tecken på blödning och se till att inte skada något av blodkärlen i processen. Använd sedan ett par låsande hemostater för att klämma fast sädessträngen och blodkärlen.Medan du håller en lätt spänning på testikeln, bränn sädessträngen och blodkärlen distalt om hemostatklämman. Släpp långsamt hemostaten och se till att vävnadsstumpen har god hemostas och inte fortsätter att blöda. Genom att applicera ett lätt tryck utåt på cremastermuskeln kan denna vävnadsstump dra sig tillbaka in i kroppshålan.För samman de två sidorna av cremastermuskeln. Använd 4-0 eller 5-0 absorberbara suturer och placera en sutur för att sammanfoga de två ändarna av cremastermuskeln. När suturen är klar, trimma ändarna på suturmaterialet så att de är 1/2 centimeter långa.Upprepa denna process för den andra testikeln genom att skjuta hudsnittet ovanpå den andra sidan och följ samma steg som används för att ta bort den första testikeln. När båda testiklarna har tagits bort och båda sidorna av cremastern har suturerats, vänd huden uppåt och förbered dig på att applicera en sårklämma på området. Se till att suturändarna inte fastnar i sårklämman.Musen är nu redo att fortsätta med postoperativ övervakning. För att förbereda dig för murin ovariektomi, väg en mushona och administrera smärtstillande läkemedel och anestesi enligt dina institutionella riktlinjer. Administrera smörjande ögongel och kontrollera att musen inte har någon tåklämningsrespons.Raka de dorsolaterala regionerna på musens rygg för att förbereda operationsstället. Använd en bomullsapplikator och applicera ett lager hårborttagningskräm på det rakade området. Efter 30 sekunder tar du bort grädden med en ren gasbindasvamp.Överför musen till en operationsmatta och se till att en värmekälla finns tillgänglig. Skrubba huden med Betadine-lösning, börja i mitten och arbeta dig lätt utåt mot kanten av det rakade området. Följ upp detta genom att skrubba huden med 70% alkohollösning applicerad på liknande sätt.Upprepa denna process totalt tre gånger för att säkerställa korrekt desinfektion av huden. Planera det kirurgiska snittet enligt beskrivningen i det skriftliga protokollet. Placera ett kirurgiskt draperi över musens operationsställe.Ta tag i huden med en pincett och snitta huden med ett snitt på en centimeter. Använd ett trubbigt instrument eller ett par vanliga hemostater för att separera huden från den underliggande vävnaden. Ta dig tid att göra detta på snittets laterala, övre och nedre gränser.Ta tag i bukväggen och snitta med ett 1/2 centimeter snitt. Använd en pincett för att lokalisera äggstocken i snittet och dra för att exteriorisera den. När vävnaderna har identifierats, använd ett par hemostater för att klämma fast och krossa det distala livmoderhornet.Använd ett andra par hemostater eller en pincett för att klämma fast precis distalt om den första klämman. Håll den nedre hemostaten stilla, dra den övre clamp upp och bort från kroppen för att utföra en krossning och rivning av det distala livmoderhornet. Släpp långsamt hemostaten och se till att det inte kommer överdriven blödning från operationsstället.För ihop de två sidorna av bukväggen och sy ihop snittet med en enda sutur med 4-0 absorberbart suturmaterial. När suturen är säkrad, trimma ändarna på suturmaterialet så att de är 1/2 centimeter långa. För ihop de två sidorna av huden igen och förbered dig på att placera en sårklämma.Medan du evertar huden, placera en sårklämma över snittstället. Musen är nu redo att fortsätta med postoperativ övervakning. Dokumentera datum och tid för ingreppet och administrering av smärtstillande medel enligt institutionens riktlinjer.När en mus har genomgått kirurgisk orkidektomi eller ovariektomi, överför du den till en ren, uppvärmd bur. När en mus har återfått sternal liggande, placera dem i en ren bur och ge dem fuktig mat och vatten. Under återhämtningen ska du ofta kontrollera musens operationsställe och leta efter tecken på infektion eller blödning.För att förhindra skador på sårklämman, ta bort alla igloo-habitat från gnagare från buren på en ovariektomimus i en vecka efter operationen. Efter 14 dagar tar du bort sårklämmorna från musens hud. Det demonstrerade protokollet beskriver hur man utför en orkidektomi och ovariektomi på en mus för att generera en könshormonfattig modell.Detta innebär att testiklarna avlägsnas genom ett snitt i mitten av pungen, följt av exteriorisering av testiklarna och avskärning av sädessträngen i blodkärlen, vilket resulterar i avlägsnande av testikeln, bitestiklarna och ljumskfettkuddarna. Kirurgisk ovariektomi kan utföras genom ett dorsolateralt snitt i ryggen och exteriorisering av äggstocken, äggledaren och det distala livmoderhornet. Detta följs av att det distala livmoderhornet skärs av, vilket leder till att äggstocken och äggledaren avlägsnas.Noggrann kirurgisk teknik och korrekt postoperativ vård kommer att resultera i välläkta operationsställen. Dessa kirurgiska ingrepp kan valideras ytterligare genom att analysera hormonnivåerna i musserumprover en vecka efter orkidektomi. Ovariektomi kan bekräftas genom observation av livmoderatrofi efter avlägsnande av äggstockarna.Detta protokoll möjliggör ett snabbt och effektivt kirurgiskt avlägsnande av äggstockar och testiklar från möss för att generera en könshormonfattig modell. Detta kan ha många användningsområden för att studera hur utarmning av dessa hormoner påverkar olika organ och fysiologiska processer.

Research

JoVE Journal

Medicine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Mätning och behandling av Suppression i Amblyopi

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Isolera och använda Delar av bovint Mesenteric artär och ven som Bioassay till testet för vasoaktivitet i tunntarmen

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

En<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modell för att studera Hormone Action i Human Breast

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Povidone Iodine Rectal Preparation at Time of Prostate Needle Biopsy is a Simple and Reproducible Means to Reduce Risk of Procedural Infection

Povidon jod Rektal Tillagning Tid för prostatabiopsi är en enkel och reproducerbar sätt att minska risken för procedur infektion

Single institution and population-based studies highlight that infectious complications following transrectal ultrasound guided prostate needle biopsy ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantation av fettvävnad-Derived stamceller blad att minska läckage efter partiell kolektomi i en råtta modell

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

En klinisk prövning som bedömer säkerhet, effekt och leverans av Olivoljebaserade tre kammar påsar för parenteral nutrition

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

Mekanismerna bakom Gut hormon sekretion använder den isolerade perfusion råtta tunntarmen

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

Cooling or Warming the Esophagus to Reduce Esophageal Injury During Left Atrial Ablation in the Treatment of Atrial Fibrillation

Kylning eller uppvärmning av matstrupen för att minska matstrupen skada under vänster förmaksfomning ablation vid behandling av förmaksflimmer

Ablation of the left atrium using either radiofrequency (RF) or cryothermal energy is an effective treatment for atrial fibrillation (AF) and is the most ...

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Network Pharmacology Prediction and Experimental Validation of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Action Mechanism Against Lung Adenocarcinoma

Nätverksfarmakologi Prediktion och experimentell validering av Trichosanthes-Fritillaria thunbergii Verkningsmekanism mot lungadenokarcinom

We aimed to study the mechanism of Trichosanthes-Fritillaria thunbergii in treating lung adenocarcinoma (LUAD) based on network pharmacology and ...

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Production of Modified Autologous Conditioned Serum and Ex Vivo Assessment of Its Healing Potential in Murine Corneal Epithelium

Produktion av modifierat autologt konditionerat serum och ex vivo-bedömning av dess läkningspotential i murint hornhinneepitel

Human blood-derived topical therapies have been a boon to clinicians in recent decades. Autologous serum (AS) and platelet-rich plasma (PRP) are enriched ...