نموذج الإجهاد للهزيمة الاجتماعية للمراهقين C57BL / 6 ذكور وإناث الفئران

Summary

قمنا بتطوير نموذج إجهاد الهزيمة الاجتماعية المتسارع للفئران المراهقة C57BL / 6 ، والذي يعمل في كل من الذكور والإناث ويسمح بالتعرض خلال فترات المراهقة المنفصلة. يؤدي التعرض لهذا النموذج إلى تجنب اجتماعي ، ولكن فقط في مجموعة فرعية من ذكور وإناث الفئران المهزومة.

Abstract

الشدائد الاجتماعية في مرحلة المراهقة سائدة ويمكن أن تؤثر سلبا على مسارات الصحة العقلية. هناك حاجة إلى نمذجة الإجهاد الاجتماعي في القوارض الذكور والإناث المراهقين لفهم آثاره على نمو الدماغ المستمر والنتائج السلوكية. تم استخدام نموذج الإجهاد الاجتماعي المزمن (CSDS) على نطاق واسع لنمذجة الإجهاد الاجتماعي في الفئران الذكور C57BL / 6 البالغة من خلال الاستفادة من السلوك العدواني الذي يظهره ذكر القوارض البالغ لدخيل يغزو أراضيها. ميزة هذا النموذج هو أنه يسمح بتصنيف الفئران المهزومة إلى مجموعات مرنة وحساسة بناء على اختلافاتهم الفردية في السلوك الاجتماعي بعد 24 ساعة من جلسة الهزيمة الأخيرة. كان تنفيذ هذا النموذج في الفئران المراهقة C57BL / 6 يمثل تحديا لأن الفئران البالغة أو المراهقة لا تهاجم عادة ذكور أو إناث الفئران المراهقة المبكرة ولأن المراهقة هي فترة قصيرة من الحياة ، تشمل نوافذ زمنية سرية للضعف. تم التغلب على هذا القيد من خلال تكييف نسخة سريعة من CSDS لاستخدامها في الفئران من الذكور والإناث المراهقين. يستخدم نموذج الإجهاد هذا لمدة 4 أيام مع جلسات هجوم جسدي 2 يوميا C57BL / 6 من الذكور البالغين لتجهيز الماوس CD-1 للعدوانية بحيث يهاجم بسهولة الفأر المراهق الذكر أو الأنثى. أطلق على هذا النموذج اسم إجهاد الهزيمة الاجتماعية المتسارع (AcSD) للفئران المراهقة. يؤدي تعرض المراهقين ل AcSD إلى تجنب اجتماعي بعد 24 ساعة في كل من الذكور والإناث ، ولكن فقط في مجموعة فرعية من الفئران المهزومة. تحدث هذه الثغرة الأمنية على الرغم من اتساق عدد الهجمات عبر الجلسات بين المجموعات المرنة والحساسة. نموذج AcSD قصير بما يكفي للسماح بالتعرض خلال فترات منفصلة خلال فترة المراهقة ، ويسمح بفصل الفئران وفقا لوجود أو عدم وجود سلوك التجنب الاجتماعي ، وهو أول نموذج متاح لدراسة إجهاد الهزيمة الاجتماعية في إناث الفئران C57BL / 6 المراهقة.

Introduction

يستخدم نموذج الإجهاد الاجتماعي المزمن على نطاق واسع لنمذجة الإجهاد الاجتماعي في يوم ما بعد الولادة للبالغين (PND) >65 من ذكور القوارض. يعتمد هذا النموذج على السلوك العدواني الطبيعي للقوارض الذكور البالغين عندما يغزو متسلل أراضيه. يستخدم هذا النموذج في مجموعة متنوعة من أنواع القوارض ، بما في ذلك الجرذان والهامستر والفئران^{1،2،3،4،5،6،7،8،9} ، ويتكون من مزيج من العدوان الجس....

Protocol

تم تنفيذ الإجراءات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي لرعاية ووافقت عليها جامعة ماكجيل ولجنة رعاية في مستشفى دوغلاس (رقم الموافقة على التجارب على: 2005-5084). تم إيواء جميع الفئران في غرفة مستعمرة يتم التحكم في درجة حرارتها ورطوبتها (21-22 درجة مئوية ؛ 60٪) وفي دورة 12 ساعة من الضوء والظلام (الضوء في الساعة 8:00) في مركز التنميط العصبي في معهد جامعة دوغلاس للصحة العقلية. كان لدى الفئران إمكانية الوصول إلى الطعام والماء طوال التجارب. تم تعيين الفئران بشكل عشوائي لكل حالة تجريبية. تم الحصول على التجارب من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). يلخص الجدول 2 خصائص لكل مرحلة تجريبية. في المجموع ، تم استخدام 489 فأرا مراهقا C5....

النتائج

تم إجراء ما مجموعه أربع تجارب مختلفة باستخدام نموذج الإجهاد الاجتماعي المزمن في الفئران الذكور C57BL / 6 المراهقين (PND 21). ومع ذلك ، قدم هذا النموذج قيودا مهمة لاستخدامه في الفئران C57BL / 6 في سن المراهقة المبكرة.

التعديلات المطلوبة للمعدات للفئران المراهقة C57BL / 6
كان الق.......

Discussion

سلوك عدواني متسق في فئران CD-1
أثناء مرحلة الفحص ، من المهم جدا ملاحظة جميع السلوكيات التي يعرضها CD-1 (المطاردة ، أو سلوكيات التركيب ، أو الاستنشاق ، أو الاستمالة ، أو العض) ومتابعة هذه السجلات عن كثب عند اختيار فأرة CD-1 ل AcSD. من المحتمل أن الماوس CD-1 الذي يتفاعل مع الفأر المراهق دون مه.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 adolescent mice	In house breeding		Mice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 027	Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice	Jackson Labs	Strain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664	Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 022	Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution	Virox Animal Health	DIN 02537222	Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider	Manufactured by Douglas Hospital, custom order		0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages	Allentown		24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for bedding	Inotiv Envigo	T.6060 iso-BLOX	2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip bedding	Inotiv Envigo	Teklad 7090, 7115	Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire tops	STAPLES	Item #: 132429, Model #: 24178-CA	51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire tops		Item #: 132367, Model #: 24172-CA	32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief cream	Polysporin		Plus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops			24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure	Johnston industrial plastics		11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arena	PEXIGLAS		45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas)
Stopwatch			For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights	Swann	SRDVR-44580V	Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software	Topscan		2.0 Clever Systems Inc.