Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Özet

Hem erkeklerde hem de kadınlarda çalışan ve ayrı ergenlik dönemlerinde maruz kalmaya izin veren ergen C57BL / 6 fareleri için hızlandırılmış bir sosyal yenilgi stres modeli geliştirdik. Bu modele maruz kalmak, sosyal kaçınmaya neden olur, ancak yalnızca mağlup erkek ve dişi farelerin bir alt kümesinde.

Özet

Ergenlik döneminde sosyal sıkıntı yaygındır ve ruh sağlığı yörüngelerini olumsuz yönde etkileyebilir. Ergen erkek ve dişi kemirgenlerde sosyal stresin modellenmesi, devam eden beyin gelişimi ve davranışsal sonuçlar üzerindeki etkilerini anlamak için gereklidir. Kronik sosyal yenilgi stresi paradigması (CSDS), yetişkin bir erkek kemirgenin kendi bölgesini istila eden bir davetsiz misafire karşı sergilediği saldırgan davranıştan yararlanarak yetişkin C57BL / 6 erkek farelerde sosyal stresi modellemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu paradigmanın bir avantajı, mağlup fareleri, son yenilgi seansından 24 saat sonra sosyal davranışlarındaki bireysel farklılıklarına dayanarak esnek ve duyarlı gruplara ayırmaya izin vermesidir. Bu modeli ergen C57BL / 6 farelerinde uygulamak zor olmuştur çünkü yetişkin veya ergen fareler tipik olarak erken ergen erkek veya dişi farelere saldırmaz ve ergenlik kısa bir yaşam periyodu olduğu için gizli zamansal kırılganlık pencerelerini kapsar. Bu sınırlama, ergen erkek ve dişi fareler için kullanılacak CSDS'nin hızlandırılmış bir versiyonunun uyarlanmasıyla aşıldı. Günde 2 fiziksel saldırı seansı içeren bu 4 günlük stres paradigması, CD-1 faresini erkek veya dişi ergen fareye kolayca saldıracak şekilde saldırganlığa hazırlamak için bir C57BL / 6 erkek yetişkin kullanır. Bu model, ergen fareler için hızlandırılmış sosyal yenilgi stresi (AcSD) olarak adlandırıldı. Ergenlerin AcSD'ye maruz kalması, hem erkeklerde hem de kadınlarda 24 saat sonra sosyal kaçınmaya neden olur, ancak yalnızca mağlup farelerin bir alt kümesinde. Bu güvenlik açığı, saldırı sayısının dayanıklı ve duyarlı gruplar arasındaki oturumlar arasında tutarlı olmasına rağmen oluşur. AcSD modeli, ergenlik dönemindeki ayrı dönemlerde maruz kalmaya izin verecek kadar kısadır, farelerin sosyal kaçınma davranışının varlığına veya yokluğuna göre ayrılmasına izin verir ve ergen C57BL / 6 dişi farelerde sosyal yenilgi stresini incelemek için mevcut olan ilk modeldir.

Giriş

Kronik sosyal yenilgi stresi paradigması, yetişkin doğum sonrası gün (PND) >65 erkek kemirgende sosyal stresi modellemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu paradigma, bir davetsiz misafir bölgesini istila ettiğinde yetişkin bir erkek kemirgenin doğal saldırgan davranışına dayanmaktadır. Bu model, sıçanlar, hamsterlar ve fareler 1,2,3,4,5,6,7,8,9 dahil olmak üzere çeşitli kemirgen türlerinde kullanılır ve yaklaşık 10 gün süren fiziksel saldırganlık ve psikolojik stresin bir kombinasyonundan oluşur, bu sırada bir davetsiz misafir kemirgen, yerleşik kemirgenden birkaç dakikalık fiziksel saldırganlık deneyi yapar.<....

Protokol

Deneysel prosedürler, Kanada Hayvan Bakımı Konseyi'nin yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi ve McGill Üniversitesi ve Douglas Hastanesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylandı (hayvan deneyi onay numarası: 2005-5084). Tüm fareler, Douglas Ruh Sağlığı Üniversitesi Enstitüsü Nörofenotipleme Merkezi'nde sıcaklık ve nem kontrollü (21-22 ° C; % 60) bir koloni odasında ve 12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsünde (8: 00 saatte yanar) barındırıldı. Fareler, deneyler boyunca yiyecek ve suya ad libitum erişimine sahipti. Fareler her deney koşuluna rastgele atandı. Deney hayvanları ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bkz . Tablo 2....

Temsili Sonuçlar

Ergen C57BL / 6 erkek farelerde (PND 21) kronik sosyal yenilgi stresi modeli kullanılarak toplam dört farklı deney yapıldı. Bununla birlikte, bu model, erken ergen C57BL / 6 farelerinde kullanımı için önemli sınırlamalar sunmuştur.

Ergen C57BL/6 fareler için gerekli ekipman modifikasyonları
İlk sınırlama, sosyal yenilgi aygıtı için kullanılan ekipmanın yetişkin fareler için tasarlanmış olmasıydı. Büyüklükleri nedeniyle, PND 21'deki ergen C57BL.......

Tartışmalar

CD-1 farelerinde tutarlı, agresif davranış
Tarama aşamasında, CD-1 tarafından görüntülenen tüm davranışları (kovalama, takma davranışları, koklama, tımar etme veya ısırma) not etmek ve AcSD için CD-1 farelerini seçerken bu kayıtları yakından takip etmek çok önemlidir. Ergen fareye saldırmadan etkileşime giren bir CD-1 faresinin, hazırlama sırasında ergen farelere karşı saldırganlık geliştirmesi muhtemeldir. Buna karşılık, yetişkin bir fareye saldıran ancak erge.......

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri tarafından finanse edilmiştir (CF Hibe Numaraları: MOP-74709; PJT 190045), Ulusal Uyuşturucu Bağımlılığı Enstitüsü (CF Hibe numarası: R01DA037911), Kanada Doğa Bilimleri ve Mühendislik Araştırma Konseyi (CF Hibe Numarası: 2982226). Andrea Pantoja-Urban, Meksika'dan Ulusal Beşeri Bilimler, Bilim ve Teknoloji Konseyi / Consejo Nacional de Humanidades, Ciencias y Tecnologías (CONAHCYT) ve FRQNT - Yabancı öğrenciler için Başarı burs programı (PBEEE) tarafından desteklendi. Samuel Richer, McGill Üniversitesi'ndeki Entegre Sinirbilim Programı'ndan bir bursla desteklendi. Figür çizimleri BioRender.com'dan şablonlar kullanıla....

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
C57BL/6 adolescent mice In house breedingMice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice Charles River LaboratoriesStrain Code: 027Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice Jackson LabsStrain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice Charles River LaboratoriesStrain Code: 022Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution Virox Animal HealthDIN 02537222Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider Manufactured by Douglas Hospital, custom order0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages Allentown24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for beddingInotiv EnvigoT.6060 iso-BLOX2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip beddingInotiv EnvigoTeklad 7090, 7115Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire topsSTAPLESItem #: 132429, Model #: 24178-CA51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire topsItem #: 132367, Model #: 24172-CA32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief creamPolysporinPlus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops 24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure Johnston industrial plastics11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arenaPEXIGLAS45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas) 
Stopwatch For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights SwannSRDVR-44580V Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software Topscan2.0 Clever Systems Inc.

Referanslar

  1. Miczek, K. A. A new test for aggression in rats without aversive stimulation: Differential effects of d-amphetamine and cocaine. Psychopharmacology. 60, 253-259 (1979).
  2. Kudryavtseva, N., Bakshtanovskaya, I., Koryakina, L.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

This article has been published

Video Coming Soon

Sitemizdeki deneyiminizi iyileştirmek için çerezleri kullanıyoruz

Sitemizi kullanmaya devam ederek ya da "Devam et" butonuna tıklayarak, çerezleri kabul edebilirsiniz.