Модель социального поражения для мышей-подростков C57BL/6 мужского и женского пола

Резюме

Мы разработали модель ускоренного социального поражения для мышей-подростков C57BL/6, которая работает как у самцов, так и у самок и позволяет воздействовать на них в дискретные подростковые периоды. Воздействие этой модели вызывает социальное избегание, но только у подмножества побежденных самцов и самок мышей.

Аннотация

Социальные невзгоды в подростковом возрасте широко распространены и могут негативно влиять на траектории психического здоровья. Моделирование социального стресса у подростков мужского и женского пола грызунов необходимо для понимания его влияния на текущее развитие мозга и поведенческие результаты. Парадигма стресса хронического социального поражения (CSDS) широко используется для моделирования социального стресса у взрослых самцов мышей C57BL/6 путем использования агрессивного поведения, проявляемого взрослым самцом грызуна по отношению к вторгшемуся на его территорию. Преимущество этой парадигмы заключается в том, что она позволяет классифицировать побежденных мышей на устойчивые и восприимчивые группы на основе их индивидуальных различий в социальном поведении через 24 ч после последнего сеанса поражения. Реализация этой модели на мышах-подростках C57BL/6 была сложной задачей, потому что взрослые мыши или мыши-подростки обычно не нападают на мышей раннего подросткового возраста или самки, а также потому, что подростковый возраст — это короткий период жизни, охватывающий дискретные временные окна уязвимости. Это ограничение было преодолено путем адаптации ускоренной версии CSDS для использования на мышах-подростках мужского и женского пола. Эта парадигма 4-дневного стресса с 2 сеансами физической атаки использует взрослого самца C57BL/6, чтобы подготовить мышь CD-1 к агрессивности таким образом, что она легко атакует самца или самку мыши-подростка. Эта модель была названа ускоренным стрессом социального поражения (AcSD) для мышей-подростков. Воздействие AcSD на подросткового возраста вызывает социальное избегание через 24 часа как у самцов, так и у самок, но только у подгруппы побежденных мышей. Эта уязвимость возникает, несмотря на то, что количество атак одинаково в сеансах между устойчивыми и восприимчивыми группами. Модель AcSD достаточно коротка, чтобы обеспечить воздействие в дискретные периоды в подростковом возрасте, позволяет сегрегировать мышей в соответствии с наличием или отсутствием социального избегающего поведения, и является первой моделью, доступной для изучения стресса социального поражения у самок мышей-подростков C57BL/6.

Введение

Парадигма стресса хронического социального поражения широко используется для моделирования социального стресса у взрослых самцов грызунов в послеродовой период (ПНД) >65 лет. Эта парадигма основана на естественном агрессивном поведении взрослого самца грызуна, когда злоумышленник вторгается на его территорию. Эта модель используется на различных видах грызунов, включая крыс, хомяков и мышей 1,2,3,4,5,6,7,8,9, и состоит из комбинации физической агрессии и психологического стресса продолжительностью около 10 дней, в течение которых вторгшийся грызун испытывает несколько минут физической агрессии со стороны местного грызуна.

протокол

Экспериментальные процедуры проводились в соответствии с руководящими принципами Канадского совета по уходу за животными и одобрены Университетом Макгилла и Комитетом по уходу за животными больницы Дугласа (номер разрешения эксперимента на животных: 2005-5084). Все мыши были размещены в комнате колонии с контролируемой температурой и влажностью (21-22 °C; 60%) и в 12-часовом цикле свет-темнота (свет включается в 8:00 часов) в Центре нейрофенотипирования Института психического здоровья Университета Дугласа. Мыши имели свободный доступ к пище и воде на протяжении всего эксперимента. Мыши были случайным образом распределены по каждому экспериментальному состояни....

Результаты

В общей сложности было проведено четыре различных эксперимента с использованием модели стресса хронического социального поражения у мышей-подростков C57BL/6 самцов (PND 21). Тем не менее, эта модель имела существенные ограничения для ее использования на мышах C57BL/6 в раннем подростковом возр.......

Обсуждение

Последовательное агрессивное поведение у мышей с CD-1
На этапе скрининга очень важно обратить внимание на все поведения, демонстрируемые CD-1 (преследование, поведение при монтировании, обнюхивание, груминг или кусание) и внимательно следить за этими записями при выборе мышей CD.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 adolescent mice	In house breeding		Mice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 027	Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice	Jackson Labs	Strain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664	Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 022	Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution	Virox Animal Health	DIN 02537222	Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider	Manufactured by Douglas Hospital, custom order		0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages	Allentown		24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for bedding	Inotiv Envigo	T.6060 iso-BLOX	2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip bedding	Inotiv Envigo	Teklad 7090, 7115	Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire tops	STAPLES	Item #: 132429, Model #: 24178-CA	51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire tops		Item #: 132367, Model #: 24172-CA	32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief cream	Polysporin		Plus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops			24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure	Johnston industrial plastics		11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arena	PEXIGLAS		45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas)
Stopwatch			For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights	Swann	SRDVR-44580V	Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software	Topscan		2.0 Clever Systems Inc.