Modelo de estresse de derrota social para camundongos adolescentes C57BL / 6 machos e fêmeas

Resumo

Desenvolvemos um modelo de estresse de derrota social acelerada para camundongos adolescentes C57BL/6, que funciona em machos e fêmeas e permite a exposição durante períodos discretos da adolescência. A exposição a esse modelo induz evitação social, mas apenas em um subconjunto de camundongos machos e fêmeas derrotados.

Resumo

A adversidade social na adolescência é prevalente e pode impactar negativamente as trajetórias de saúde mental. A modelagem do estresse social em roedores adolescentes machos e fêmeas é necessária para entender seus efeitos no desenvolvimento contínuo do cérebro e nos resultados comportamentais. O paradigma de estresse de derrota social crônica (CSDS) tem sido amplamente utilizado para modelar o estresse social em camundongos machos C57BL/6 adultos, aproveitando o comportamento agressivo exibido por um roedor macho adulto a um intruso que invade seu território. Uma vantagem desse paradigma é que ele permite categorizar camundongos derrotados em grupos resilientes e suscetíveis com base em suas diferenças individuais de comportamento social 24 horas após a última sessão de derrota. A implementação deste modelo em camundongos C57BL/6 adolescentes tem sido um desafio porque camundongos adultos ou adolescentes normalmente não atacam camundongos machos ou fêmeas adolescentes precoces e porque a adolescência é um curto período de vida, abrangendo discretas janelas temporais de vulnerabilidade. Essa limitação foi superada com a adaptação de uma versão acelerada do CSDS para ser usada em camundongos adolescentes machos e fêmeas. Este paradigma de estresse de 4 dias com 2 sessões de ataque físico por dia usa um adulto masculino C57BL/6 para preparar o camundongo CD-1 para agressividade de tal forma que ele ataque prontamente o camundongo adolescente macho ou fêmea. Este modelo foi denominado estresse de derrota social acelerada (AcSD) para camundongos adolescentes. A exposição de adolescentes à AcSD induz evitação social 24 horas depois em machos e fêmeas, mas apenas em um subconjunto de camundongos derrotados. Essa vulnerabilidade ocorre apesar do número de ataques ser consistente entre sessões entre grupos resilientes e suscetíveis. O modelo AcSD é curto o suficiente para permitir a exposição durante períodos discretos na adolescência, permite a segregação de camundongos de acordo com a presença ou ausência de comportamento de evitação social e é o primeiro modelo disponível para estudar o estresse de derrota social em camundongos fêmeas C57BL / 6 adolescentes.

Introdução

O paradigma do estresse de derrota social crônica é amplamente utilizado para modelar o estresse social em roedores machos adultos pós-natal (PND) >65. Este paradigma é baseado no comportamento agressivo natural de um roedor macho adulto quando um intruso invade seu território. Este modelo é usado em uma variedade de espécies de roedores, incluindo ratos, hamsters e camundongos 1,2,3,4,5,6,7,8,9, e consiste em uma combinação de agressão física e estresse psicológico com duração de cerca de 10 dias, durante os quais um roedor intruso experimenta alguns minutos de agressão física do roedor residente.<....

Protocolo

Os procedimentos experimentais foram realizados de acordo com as diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com Animais e aprovados pela Universidade McGill e pelo Comitê de Cuidados com Animais do Hospital Douglas (número de aprovação do experimento com animais: 2005-5084). Todos os camundongos foram alojados em uma sala de colônias com temperatura e umidade controladas (21-22 ° C; 60%) e em um ciclo claro-escuro de 12 h (luz acesa às 8:00 h) no Centro de Neurofenotipagem do Douglas Mental Health University Institute. Os camundongos tiveram acesso ad libitum a comida e água durante os experimentos. Os camundongos foram designados aleatoriamente para cada c....

Discussão

Comportamento consistente e agressivo em camundongos CD-1
Durante a fase de triagem, é muito importante observar todos os comportamentos exibidos pelo CD-1 (perseguir, montar comportamentos, cheirar, escovar ou morder) e seguir de perto esses registros ao selecionar os camundongos CD-1 para o AcSD. É provável que um camundongo CD-1 que interaja com o camundongo adolescente sem atacá-lo desenvolva agressividade em relação a camundongos adolescentes durante o priming. Em contraste, um camundongo C.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 adolescent mice	In house breeding		Mice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 027	Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice	Jackson Labs	Strain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664	Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 022	Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution	Virox Animal Health	DIN 02537222	Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider	Manufactured by Douglas Hospital, custom order		0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages	Allentown		24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for bedding	Inotiv Envigo	T.6060 iso-BLOX	2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip bedding	Inotiv Envigo	Teklad 7090, 7115	Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire tops	STAPLES	Item #: 132429, Model #: 24178-CA	51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire tops		Item #: 132367, Model #: 24172-CA	32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief cream	Polysporin		Plus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops			24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure	Johnston industrial plastics		11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arena	PEXIGLAS		45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas)
Stopwatch			For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights	Swann	SRDVR-44580V	Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software	Topscan		2.0 Clever Systems Inc.