青少年C57BL/6雄性和雌性小鼠的社交失败应激模型

摘要

我们为青少年 C57BL/6 小鼠开发了一种加速社交失败压力模型，该模型对男性和女性都有效，并允许在离散的青春期进行暴露。暴露于这种模型会引起社会回避，但仅在被击败的雄性和雌性小鼠的子集中。

摘要

青春期的社会逆境很普遍，会对心理健康轨迹产生负面影响。需要对青少年雄性和雌性啮齿动物的社会压力进行建模，以了解其对持续大脑发育和行为结果的影响。慢性社会失败应激范式 （CSDS） 已被广泛用于模拟成年 C57BL/6 雄性小鼠的社会压力，方法是利用成年雄性啮齿动物对入侵其领土的入侵者表现出的攻击行为。这种范式的一个优点是，它允许根据它们在最后一次失败后 24 小时的社会行为的个体差异，将被击败的小鼠分为有弹性的组和易感组。在青少年C57BL / 6小鼠中实施该模型一直具有挑战性，因为成年或青少年小鼠通常不会攻击早期的青春期雄性或雌性小鼠，并且因为青春期是生命的短暂时期，包括谨慎的脆弱性时间窗口。通过调整CSDS的加速版本以用于青少年雄性和雌性小鼠，克服了这一限制。这种为期 4 天的压力范式，每天进行 2 次物理攻击，使用 C57BL/6 雄性成年小鼠来激发 CD-1 小鼠的攻击性，使其很容易攻击雄性或雌性青少年小鼠。这种模型被称为青春期小鼠的加速社会失败压力（AcSD）。青少年暴露于AcSD在男性和女性24小时后都会诱导社交回避，但仅在被击败的小鼠子集中引起。尽管在有弹性的组和易受攻击的组之间的会话中，攻击数量是一致的，但仍会发生此漏洞。AcSD模型足够短，允许在青春期的离散时期进行暴露，允许根据社会回避行为的存在与否对小鼠进行隔离，并且是第一个可用于研究青少年C57BL / 6雌性小鼠社会失败压力的模型。

引言

慢性社会失败压力范式被广泛用于模拟成年产后日 （PND） >65 雄性啮齿动物的社会压力。这种范式是基于成年雄性啮齿动物在入侵者入侵其领土时的自然攻击行为。该模型用于多种啮齿动物物种，包括大鼠、仓鼠和小鼠 1,2,3,4,5,6,7,8,9，包括持续约 10 天的身体攻击和心理压力的组合，在此期间，入侵啮齿动物实验几分钟的身体攻击来自常驻啮齿动物。这两只啮齿动物留在居民的家中笼子里，由一个隔板隔开，允许感官接触，但不允许身体接触⁷.在小鼠实验中，最常用的常驻/侵略小鼠是退休的育种瑞士CD-1小鼠，它们对入侵小鼠表现出强大的领土行为^6,7。对于入侵小鼠，最典型的品系是近交系....

研究方案

实验程序按照加拿大动物护理委员会的指导方针进行，并得到麦吉尔大学和道格拉斯医院动物护理委员会的批准（动物实验批准号：2005-5084）。所有小鼠被饲养在温度和湿度控制（21-22°C;60%）的菌落室中，并在道格拉斯心理健康大学研究所的神经表型中心进行12小时的明暗循环（8：00小时开光）。在整个实验过程中，小鼠可以 随意 获取食物和水。小鼠被随机分配到每个实验条件。实验动物是从商业来源获得的（见 材料表）。 表2 总结了每个实验阶段的动物特征。总共在20个实验队列中使用了489只青少年C57BL / 6J小鼠（259只雄性;230只雌性）。

表2：每个实验阶段的动物受试者。 ^†如果这些动物没有受到严重伤害，它们可以重新用于启动。 ^‡如果这些动物没有受到严重伤害，它们可以在AcSD期间重新用于启动， ^§道格拉斯心理健康大学研究所的神经表型中心。 ^¶对于男性的实验， ^#对于女性的实验，如果失败是混合的，请使用女性进行启动。 ^††不能用于 AcSD。缩写：AcSD = 加速的社会失败压力;PND = 产后日

讨论

CD-1小鼠中一致的攻击性行为
在筛选阶段，注意 CD-1 显示的所有行为（追逐、安装行为、嗅探、梳理或咬合）并在为 AcSD 选择 CD-1 小鼠时密切遵循这些记录非常重要。CD-1小鼠与青春期小鼠相互作用而不攻击青春期小鼠，可能会在启动过程中对青春期小鼠产生攻击性。相比之下，攻击成年小鼠但不接近青春期小鼠的CD-1小鼠可能不会对青春期小鼠产生攻击性。

CD-1?.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 adolescent mice	In house breeding		Mice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 027	Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice	Jackson Labs	Strain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664	Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 022	Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution	Virox Animal Health	DIN 02537222	Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider	Manufactured by Douglas Hospital, custom order		0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages	Allentown		24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for bedding	Inotiv Envigo	T.6060 iso-BLOX	2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip bedding	Inotiv Envigo	Teklad 7090, 7115	Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire tops	STAPLES	Item #: 132429, Model #: 24178-CA	51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire tops		Item #: 132367, Model #: 24172-CA	32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief cream	Polysporin		Plus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops			24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure	Johnston industrial plastics		11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arena	PEXIGLAS		45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas)
Stopwatch			For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights	Swann	SRDVR-44580V	Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software	Topscan		2.0 Clever Systems Inc.