Modello di stress di sconfitta sociale per topi maschi e femmine adolescenti C57BL / 6

Riepilogo

Abbiamo sviluppato un modello di stress da sconfitta sociale accelerata per topi adolescenti C57BL/6, che funziona sia nei maschi che nelle femmine e consente l'esposizione durante periodi discreti dell'adolescenza. L'esposizione a questo modello induce l'evitamento sociale, ma solo in un sottogruppo di topi maschi e femmine sconfitti.

Abstract

Le avversità sociali nell'adolescenza sono prevalenti e possono avere un impatto negativo sulle traiettorie della salute mentale. La modellazione dello stress sociale nei roditori adolescenti maschi e femmine è necessaria per comprenderne gli effetti sullo sviluppo cerebrale in corso e sui risultati comportamentali. Il paradigma dello stress da sconfitta sociale cronica (CSDS) è stato ampiamente utilizzato per modellare lo stress sociale in topi maschi adulti C57BL/6 facendo leva sul comportamento aggressivo mostrato da un roditore maschio adulto nei confronti di un intruso che invade il suo territorio. Un vantaggio di questo paradigma è che permette di classificare i topi sconfitti in gruppi resilienti e suscettibili in base alle loro differenze individuali nel comportamento sociale 24 ore dopo l'ultima sessione di sconfitta. L'implementazione di questo modello nei topi C57BL/6 adolescenti è stata impegnativa perché i topi adulti o adolescenti non attaccano tipicamente i topi maschi o femmine adolescenti e perché l'adolescenza è un breve periodo di vita, che comprende discrete finestre temporali di vulnerabilità. Questa limitazione è stata superata adattando una versione accelerata del CSDS da utilizzare per topi maschi e femmine adolescenti. Questo paradigma di stress di 4 giorni con 2 sessioni di attacco fisico al giorno utilizza un maschio adulto C57BL/6 per innescare l'aggressività del topo CD-1 in modo tale da attaccare prontamente il topo adolescente maschio o femmina. Questo modello è stato definito stress da sconfitta sociale accelerata (AcSD) per i topi adolescenti. L'esposizione adolescenziale all'AcSD induce l'evitamento sociale 24 ore dopo sia nei maschi che nelle femmine, ma solo in un sottogruppo di topi sconfitti. Questa vulnerabilità si verifica nonostante il numero di attacchi sia coerente tra le sessioni tra gruppi resilienti e suscettibili. Il modello AcSD è abbastanza breve da consentire l'esposizione durante periodi discreti all'interno dell'adolescenza, consente la segregazione dei topi in base alla presenza o all'assenza di comportamenti di evitamento sociale ed è il primo modello disponibile per studiare lo stress da sconfitta sociale in topi femmine adolescenti C57BL/6.

Introduzione

Il paradigma dello stress cronico da sconfitta sociale è ampiamente utilizzato per modellare lo stress sociale nei roditori maschi adulti del giorno postnatale (PND) >65. Questo paradigma si basa sul comportamento aggressivo naturale di un roditore maschio adulto quando un intruso invade il suo territorio. Questo modello viene utilizzato in una varietà di specie di roditori, tra cui ratti, criceti e topi 1,2,3,4,5,6,7,8,9, e consiste in una combinazione di aggressione fisica e stress psicologico della durata di circa 10 giorni, durante i quali un roditore intruso sperimenta alcuni minuti di aggressione fisica da parte del roditore re....

Protocollo

Le procedure sperimentali sono state eseguite in conformità con le linee guida del Canadian Council of Animal Care e approvate dalla McGill University e dal Douglas Hospital Animal Care Committee (numero di approvazione per esperimenti sugli animali: 2005-5084). Tutti i topi sono stati alloggiati in una stanza di colonia a temperatura e umidità controllate (21-22 °C; 60%) e su un ciclo luce-buio di 12 ore (luce accesa alle 8:00) presso il Neurophenotyping Centre del Douglas Mental Health University Institute. I topi hanno avuto accesso ad libitum a cibo e acqua durante gli esperimenti. I topi sono stati assegnati in modo casuale a ciascuna condizione sperimen....

Discussione

Comportamento coerente e aggressivo nei topi CD-1
Durante la fase di screening, è molto importante prendere nota di tutti i comportamenti mostrati dal CD-1 (inseguimento, comportamenti di montaggio, annusare, toelettare o mordere) e seguire attentamente questi record quando si selezionano i topi CD-1 per l'AcSD. È probabile che un topo CD-1 che interagisce con il topo adolescente senza attaccarlo svilupperà aggressività nei confronti dei topi adolescenti durante l'adescamento. Al contrario, un top.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
C57BL/6 adolescent mice	In house breeding		Mice were breeded at the Neurophenotyping Centre of the Douglas Mental Health University Institute.
C57BL/6 adult mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 027	Mice are ordered so as to arrive at PND>65 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
C57BL/6J adolescent mice	Jackson Labs	Strain Code: 000664; RRID:IMSR_JAX:000664	Mice are ordered so as to arrive at PND 24 and are group housed (four mice per cage) in standard mice cages.
CD-1 mice	Charles River Laboratories	Strain Code: 022	Mice retired breeders more than three months of age and singled housed throughout.
Cleaning solution	Virox Animal Health	DIN 02537222	Prevail: Accelerated Hydrogen Peroxide. Desinfectant cleaner and deodorizer.
Clear perforated acrylic glass divider	Manufactured by Douglas Hospital, custom order		0.6 cm (w) × 45.7 cm (d) × 22.23 cm (h); perforations of 0.6 cm diameter. The dividers are perforated allowing sensory but no physical contact between the pair of mice.
Clear rectangular rat cages	Allentown		24 cm (w) × 48.3 cm (d) × 22.23 (h).
Cotton squares for bedding	Inotiv Envigo	T.6060 iso-BLOX	2.5 cm x 2.5 cm. Added to the social defeat apparatus.
Hard woodchip bedding	Inotiv Envigo	Teklad 7090, 7115	Sani-chip bedding.
Large binder clips to secure the steel-wire tops	STAPLES	Item #: 132429, Model #: 24178-CA	51 mm
Medium binder clips to secure the steel-wire tops		Item #: 132367, Model #: 24172-CA	32 mm, in case the cover lids of the rat cages do not close with the large clips
Pain relief cream	Polysporin		Plus Pain Relief Cream (red format, NOT ointment), 2 Antibiotics plus lidocaine hydrochloride
Paired Steel-wire tops			24 cm (w) × 48 cm (d) with 0.6 cm (w) of separation between the grill
Removable wire-mesh enclosure	Johnston industrial plastics		11 cm (w) × 6.8 cm (d) × 42 cm (h) custom order; two per social interaction test arena secured in precut clear polycarbonate
Social interaction open-field arena	PEXIGLAS		45 cm (w) × 45 cm (d) × 49 cm (h), custom-crafted from opaque acrylic glass (Plexiglas)
Stopwatch			For timing defeat sessions
Video camera with infrared lights	Swann	SRDVR-44580V	Swann Camera - 4 Channel 1080p Digital Video Recorder & 2 x PRO-T853
Video tracking software	Topscan		2.0 Clever Systems Inc.