A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يصف هذا البروتوكول عملية التحضير لإعادة تروية انسداد الشريان الدماغي الأوسط عبر الشريان السباتي المشترك.

Abstract

يعد نموذج إعادة ضخ انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO / R) أمرا بالغ الأهمية لفهم الآليات المرضية للسكتة الدماغية ولتطوير الأدوية. ومع ذلك ، من بين طرق النمذجة الشائعة الاستخدام ، غالبا ما تواجه طريقة كويزومي تدقيقا بسبب ربطها بالشريان السباتي المشترك (CCA) وعدم قدرتها على تحقيق التروية الكافية. وبالمثل ، تم انتقاد طريقة لونجا لفصل وربط الشريان السباتي الخارجي (ECA). تهدف هذه الدراسة إلى تقديم طريقة إعداد نموذج معدل تحافظ على سلامة ECA ، وتتضمن إدخال خياطة نايلون أحادية الشعيرات من خلال CCA ، وإصلاح شق CCA المربوط ، والحفاظ على إعادة التروية من CCA. تم تأكيد إعادة ضخ تدفق الدم باستخدام تصوير تدفق البقع بالليزر. أظهرت طرق التقييم مثل مقياس لونجا ، ودرجة الخطورة العصبية المعدلة ، وتلطيخ كلوريد ثلاثي فينيل تترازوليوم (TTC) ، ووضع العلامات المناعية للخلايا العصبية أن هذا النهج يمكن أن يؤدي إلى تلف الأعصاب الإقفارية المستقرة. هذا البروتوكول النموذجي المعدل MCAO / R بسيط ومستقر ، ويوفر إرشادات قيمة للممارسين في مجال نقص التروية الدماغية.

Introduction

وفقا لمنظمة الصحة العالمية ، ظلت السكتة الدماغية السبب الرئيسي الثاني للوفاة في جميع أنحاء العالم على مدى العقد الماضي ، مع ارتفاع معدل الإصابة ، وارتفاع معدل الوفيات ، وارتفاع معدل الإعاقة 1,2. مع تقدم سكان العالم في السن ، من المتوقع أن يزداد معدل الإصابة بالسكتة الدماغية في البلدان النامية ، مما قد يصبح السبب الرئيسي للوفاة المبكرة والعجز لدى البالغين. بالإضافة إلى ذلك ، هناك اتجاه لحدوث السكتات الدماغية في سن أصغر3. كما أن فقدان القوى العاملة بعد السكتة الدماغية يضع عبئا ثقيلا على الأسر والمجتمع4. لذلك ، فإن تطوير علاجات آمنة وفعالة يشكل تحديا كبيرا في أبحاث ....

Protocol

تم إجراء البروتوكول التجريبي وفقا لإرشادات استخدام المختبر واللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامها في جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (رقم السجل: 2019-DL-002). تم توثيق جميع بيانات البحوث الحيوانية باتباع إرشادات REACH (البحوث الحيوانية: الإبلاغ في تجارب الجسم الحي ). تم استخدام ذكور الفئران Sprague Dawley (SD) التي تزن 250 جم ± 20 جم وتتراوح أعمارهم بين 6-8 أسابيع لهذه الدراسة. يتم سرد التفاصيل المتعلقة بالحيوانات والكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.

1. إعداد

  1. تحفيز والحفاظ على التخدير العميق في الفئران باستخدام زوليتيل 50 (50 ملغ / كغ ، IM) وزيلازين هيدروكلوريد (40 ملغ / كغ ، IP). تأ....

النتائج

أظهر تصوير تدفق البقع بالليزر أنه قبل انسداد خياطة النايلون أحادية الشعيرات ، كان هناك تدفق دم وفير في منطقة الشريان الدماغي الأوسط (MCA) ، وتم تسجيل قيم تدفق الدم الأساسية للفئران. بعد انسداد MCA ، انخفضت قيمة تدفق الدم على الجانب الإقفاري من الدماغ بسرعة. قبل سحب الخيط ، تم إعادة فحص قيم تدفق.......

Discussion

نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) الناجم عن خياطة نايلون أحادية الشعيرات هو الطريقة الأكثر شيوعا المستخدمة لإعداد نماذج MCAO. تم اعتماد هذا النهج على نطاق واسع في الدراسات قبل السريرية واكتسب اعترافا من العديد من الممارسين بسبب بساطته ، وعدم الحاجة إلى حج القحف ، والحد الأدنى من الصد.......

Disclosures

اي.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82173781 و 82373835) ، ومشروع أبحاث ما بعد الدكتوراه (BKS212055) ، ومشروع الابتكار العلمي والتكنولوجي لمكتب فوشان للعلوم والتكنولوجيا (2320001007331) ، ومؤسسة قوانغدونغ للبحوث الأساسية والتطبيقية (2019A1515010806) ، والمشاريع الميدانية الرئيسية (التصنيع الذكي) للجامعات العامة في مقاطعة قوانغدونغ (2020ZDZX2057) ، ومشاريع البحث العلمي (الابتكار المميز) من جنرال الجامعات في مقاطعة قوانغدونغ (2019KTSCX195).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Animal anesthesia systemRayward Life Technology Co., LtdR500IE
Animal temperature maintainerRayward Life Technology Co., Ltd69020
Cy3 secondary antibodyWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdGB21303
DAP1 antibodyWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdG1012
DCX antibodyWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdGB13434
Goat serumBeyotime Biotechnology Co., LTDC0265
GraphPad PrismGraphPad SoftwareGraphPad Prism 8.0
ImageJNational Institutes of HealthImageJ software
IsofluranRayward Life Technology Co., LtdR510-22
Laser speckle blood flow imaging systemRayward Life Technology Co., LtdPeriCam PSI NR
MAP-2 antibodyWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdGB11128
Miniature hand-held skull drillRayward Life Technology Co., Ltd87001
monofilament sutureRayward Life Technology Co., Ltd250-280g
NeuN antibodyWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdGB11138
OCT embedding agentBIOSHARPBL557A
Penicillin sodiumChengdu Kelong Chemical Co., Ltd.17121709-2
Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen SectionsBeyotime Biotechnology Co., LTDP0090
SD ratsSPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd.250-280g
Triton X-100Beyotime Biotechnology Co., LTDST795
TTCChengdu Kelong Chemical Co., Ltd.2019030101

References

  1. Paul, S., Candelario-Jalil, E. Emerging neuroprotective strategies for the treatment of ischemic stroke: An overview of clinical and preclinical studies. Exp Neurol. 335, 113518 (2021).
  2. Feigin, V. L., Owolabi, M. O.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

MCAO R TTC

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved