Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Orta Serebral Arter Oklüzyonu Reperfüzyonu için Modifiye Bir Model Hazırlığı
Bu Makalede
Özet
Bu protokol, ortak karotis arter yoluyla orta serebral arter oklüzyonu reperfüzyonu için hazırlık sürecini tanımlar.
Özet
Orta serebral arter oklüzyonu reperfüzyon (MCAO/R) modeli, inmenin patolojik mekanizmalarının anlaşılması ve ilaç geliştirilmesi için çok önemlidir. Bununla birlikte, yaygın olarak kullanılan modelleme yöntemleri arasında, Koizumi yöntemi, ortak karotis arterin (CCA) ligasyonu ve yeterli reperfüzyon elde edememesi nedeniyle sıklıkla incelemeyle karşı karşıyadır. Benzer şekilde, Longa yöntemi, dış karotis arterin (ECA) bağlantısını kesmek ve bağlamak için eleştirilmiştir. Bu çalışma, ECA'nın bütünlüğünü koruyan, CCA'dan monofilament naylon sütürün sokulmasını, bağlanmış CCA insizyonunun onarılmasını ve CCA'dan reperfüzyonun sürdürülmesini içeren modifiye bir model hazırlama yöntemini tanıtmayı amaçlamaktadır. Kan akımının reperfüzyonu, lazer benek akışı görüntüleme kullanılarak doğrulandı. Longa ölçeği, Modifiye Nörolojik Şiddet Skoru, trifeniltetrazolyum klorür (TTC) boyaması ve nöronların immünofloresan etiketlemesi gibi değerlendirme yöntemleri, bu yaklaşımın stabil iskemik sinir hasarına neden olabileceğini göstermiştir. Bu modifiye MCAO/R model protokolü basit ve stabil olup, serebral iskemi alanındaki uygulayıcılar için değerli rehberlik sağlar.
Giriş
Dünya Sağlık Örgütü'ne göre, inme, yüksek insidans oranı, yüksek mortalite ve yüksek sakatlık oranı 1,2 ile son on yılda dünya çapında ikinci önde gelen ölüm nedeni olmaya devam etmiştir. Küresel nüfus yaşlandıkça, gelişmekte olan ülkelerde inme insidansının artması ve potansiyel olarak yetişkinlerde erken ölüm ve sakatlığın önde gelen nedeni haline gelmesi beklenmektedir. Ek olarak, felçlerin daha genç yaşta ortaya çıkma eğilimi vardır3. Felç sonrası iş gücü kaybı da ailelere ve topluma ağır bir yük getirmektedir4. Bu nedenle, güvenli ve etkili tedavilerin geliş....
Protokol
Deney protokolü, Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nde Laboratuvar Hayvanlarının Kullanımı ve Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi yönergelerine uygun olarak yürütülmüştür (Kayıt numarası: 2019-DL-002). Tüm hayvan araştırma verileri, ARRIVE (Hayvan Araştırmaları: İn Vivo Deneylerin Raporlanması) yönergelerine göre belgelenmiştir. Bu çalışma için 250 g ± 20 g ağırlığında ve 6-8 haftalık erkek Sprague Dawley (SD) sıçanları kullanıldı. Kullanılan hayvanlar, reaktifler ve ekipmanla ilgili ayrıntılar Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. Hayvan hazırlama
- Zoletil 50 (50 mg / kg,....
Temsili Sonuçlar
Lazer benek akımı görüntüleme, monofilament naylon sütürün tıkanmasından önce orta serebral arter (MCA) bölgesinde bol miktarda kan akımı olduğunu gösterdi ve sıçanların başlangıç kan akış değerleri kaydedildi. MCA'nın tıkanmasını takiben, beynin iskemik tarafındaki kan akış değeri hızla azaldı. Sütür çekilmeden önce, iskemik taraftaki kan akış değerleri, sütürün MCA'yı tıkayıp tıkamadığını doğrulamak için tekrar kontrol edildi. Sonuçlar kan akışında sadece hafif.......
Tartışmalar
Monofilament naylon sütür ile indüklenen orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) modeli, MCAO modellerinin hazırlanmasında kullanılan en yaygın yöntemdir. Bu yaklaşım klinik öncesi çalışmalarda yaygın olarak benimsenmiştir ve basitliği, kraniyotomi ihtiyacının olmaması, minimal cerrahi travma ve reperfüzyon elde etme yeteneği nedeniyle birçok uygulayıcı tarafından kabul görmüştür.
İntraluminal filament MCAO için iki klasik cerrahi teknik vardır: Koizumi yöntemi<.......
Açıklamalar
Hiç kimse.
Teşekkürler
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82173781 ve 82373835), Doktora Sonrası araştırma projesi (BKS212055), Foshan Bilim ve Teknoloji Bürosu Bilim ve Teknoloji İnovasyon Projesi (2320001007331), Guangdong Temel ve Uygulamalı Temel Araştırma Vakfı (2019A1515010806), Guangdong Eyaletindeki Genel Üniversitelerin Anahtar Alan Projeleri (Akıllı Üretim) (2020ZDZX2057) ve Genel Bilimsel Araştırma Projeleri (Karakteristik Yenilik) tarafından desteklenmiştir. Guangdong Eyaletindeki Üniversiteler (2019KTSCX195).
....Malzemeler
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal anesthesia system | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Cy3 secondary antibody | Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd | GB21303 | |
| DAP1 antibody | Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd | G1012 | |
| DCX antibody | Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd | GB13434 | |
| Goat serum | Beyotime Biotechnology Co., LTD | C0265 | |
| GraphPad Prism | GraphPad Software | GraphPad Prism 8.0 | |
| ImageJ | National Institutes of Health | ImageJ software | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Laser speckle blood flow imaging system | Rayward Life Technology Co., Ltd | PeriCam PSI NR | |
| MAP-2 antibody | Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd | GB11128 | |
| Miniature hand-held skull drill | Rayward Life Technology Co., Ltd | 87001 | |
| monofilament suture | Rayward Life Technology Co., Ltd | 250-280g | |
| NeuN antibody | Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd | GB11138 | |
| OCT embedding agent | BIOSHARP | BL557A | |
| Penicillin sodium | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 17121709-2 | |
| Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections | Beyotime Biotechnology Co., LTD | P0090 | |
| SD rats | SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd. | 250-280g | |
| Triton X-100 | Beyotime Biotechnology Co., LTD | ST795 | |
| TTC | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 2019030101 |
Referanslar
- Paul, S., Candelario-Jalil, E. Emerging neuroprotective strategies for the treatment of ischemic stroke: An overview of clinical and preclinical studies. Exp Neurol. 335, 113518 (2021).
- Feigin, V. L., Owolabi, M. O.
Yeniden Basımlar ve İzinler
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır