Préparation d’un modèle modifié pour la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne

Résumé

Ce protocole décrit le processus de préparation à la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide commune.

Résumé

Le modèle de reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO/R) est crucial pour comprendre les mécanismes pathologiques de l’AVC et pour le développement de médicaments. Cependant, parmi les méthodes de modélisation couramment utilisées, la méthode Koizumi fait souvent l’objet d’un examen minutieux en raison de sa ligature de l’artère carotide commune (ACC) et de son incapacité à obtenir une reperfusion adéquate. De même, la méthode Longa a été critiquée pour déconnecter et ligaturer l’artère carotide externe (ECA). Cette étude vise à introduire une méthode de préparation de modèle modifiée qui préserve l’intégrité de l’ECA, implique l’insertion d’une suture en nylon monofilament à travers l’ACC, la réparation de l’incision ligaturée de l’ACC et le maintien de la reperfusion de l’ECA. La reperfusion du flux sanguin a été confirmée à l’aide de l’imagerie laser du flux de chatoiement. Des méthodes d’évaluation telles que l’échelle de Longa, le score de gravité neurologique modifié, la coloration au chlorure de triphényltétrazolium (TTC) et le marquage par immunofluorescence des neurones ont démontré que cette approche pouvait induire des lésions nerveuses ischémiques stables. Ce protocole de modèle MCAO/R modifié est simple et stable, fournissant des conseils précieux aux praticiens dans le domaine de l’ischémie cérébrale.

Introduction

Selon l’Organisation mondiale de la santé, l’AVC est resté la deuxième cause de décès dans le monde au cours de la dernière décennie, avec un taux d’incidence élevé, une mortalité élevée et un taux d’invalidité élevé ^1,2. À mesure que la population mondiale vieillit, l’incidence des accidents vasculaires cérébraux devrait augmenter dans les pays en développement, devenant potentiellement la principale cause de décès prématurés et d’invalidité chez les adultes. De plus, les accidents vasculaires cérébraux ont tendance à survenir à un âge plus jeune de³ ans. La perte de main-d’œuvre après....

Protocole

Le protocole expérimental a été réalisé conformément aux directives du Comité d’utilisation des animaux de laboratoire et du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (Numéro d’enregistrement : 2019-DL-002). Toutes les données de la recherche animale ont été documentées conformément aux directives ARRIVE (Animal Research : Reporting In Vivo Experiments). Des rats Sprague Dawley (SD) mâles pesant 250 g ± 20 g et âgés de 6 à 8 semaines ont été utilisés pour cette étude. Les détails concernant les animaux, les réactifs et l’équipement utilisés sont énumérés dans la table des ....

Discussion

Le modèle d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) induit par une suture en nylon monofilament est la méthode la plus couramment utilisée pour préparer les modèles MCAO. Cette approche est largement adoptée dans les études précliniques et a été reconnue par de nombreux praticiens en raison de sa simplicité, de l’absence de besoin de craniotomie, d’un traumatisme chirurgical minime et de sa capacité à réaliser une reperfusion.

Il existe deux techniques chirurgic.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal anesthesia system	Rayward Life Technology Co., Ltd	R500IE
Animal temperature maintainer	Rayward Life Technology Co., Ltd	69020
Cy3 secondary antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB21303
DAP1 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	G1012
DCX antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB13434
Goat serum	Beyotime Biotechnology Co., LTD	C0265
GraphPad Prism	GraphPad Software	GraphPad Prism 8.0
ImageJ	National Institutes of Health	ImageJ software
Isofluran	Rayward Life Technology Co., Ltd	R510-22
Laser speckle blood flow imaging system	Rayward Life Technology Co., Ltd	PeriCam PSI NR
MAP-2 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11128
Miniature hand-held skull drill	Rayward Life Technology Co., Ltd	87001
monofilament suture	Rayward Life Technology Co., Ltd	250-280g
NeuN antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11138
OCT embedding agent	BIOSHARP	BL557A
Penicillin sodium	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	17121709-2
Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections	Beyotime Biotechnology Co., LTD	P0090
SD rats	SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd.	250-280g
Triton X-100	Beyotime Biotechnology Co., LTD	ST795
TTC	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	2019030101