طرق وشم Xenopus laevis باستخدام آلة الوشم الدوارة

Summary

هنا ، نصف طرق وشم Xenopus laevis البالغ (ضفدع أفريقي مخلبي) باستخدام آلة وشم دوارة. ينتج عن الوشم المناسب أرقام داكنة يسهل قراءتها تدوم لعدة أشهر وتجعل قابلة للتمييز بسهولة لأغراض البحث وحفظ السجلات.

Abstract

تعمل النماذج الحيوانية على توسيع نطاق البحوث الطبية الحيوية ، مما يعزز فهمنا للبيولوجيا التنموية والجزيئية والخلوية وتمكين الباحثين من نمذجة الأمراض البشرية. يسمح تسجيل وتتبع الفردية للباحثين بتقليل عدد المطلوبة للدراسة وتحسين الممارسات لتحسين رفاهية. توجد العديد من الطرق الموثقة جيدا لوضع علامات على الثدييات وتتبعها ، بما في ذلك تثقيب الأذن وعلامات الأذن. ومع ذلك ، فإن طرق تمييز أنواع البرمائيات المائية محدودة ، حيث أن الموارد الحالية قديمة أو غير فعالة أو باهظة التكلفة. في هذه المخطوطة ، نوضح الطرق وأفضل الممارسات لتمييز Xenopus laevis بآلة وشم دوارة. ينتج عن الوشم المناسب وشم عالي الجودة ، مما يجعل الأفراد قابلين للتمييز بسهولة للباحثين ويشكل الحد الأدنى من المخاطر على صحة. نسلط الضوء أيضا على أسباب الوشم ذي الجودة الرديئة ، والتي يمكن أن تؤدي إلى ظهور وشم يتلاشى بسرعة ويسبب ضررا غير ضروري للحيوانات. يسمح هذا النهج للباحثين والأطباء البيطريين بوضع علامات على البرمائيات ، مما يمكنهم من تتبع النسخ البيولوجية والخطوط المعدلة وراثيا والاحتفاظ بسجلات دقيقة لصحة.

Introduction

النماذج الحيوانية هي أدوات مفيدة للتحقيق في الأسئلة المتعلقة بصحة الإنسان. في الممارسة العملية ، تتطلب البحوث الطبية الحيوية باستخدام النماذج الحيوانية تنظيما دقيقا وصيانة مستعمرة حيوانية صحية. تهدف أفضل الممارسات للتعامل الأخلاقي مع وتربيتها إلى تقليل عدد اللازمة للتجارب وتحسين الممارسات لضمان رعاية¹. جنس الضفدع المخالب ، بما في ذلك Xenopus laevis (X. laevis; الضفدع الأفريقي ذو المخالب) و Xenopus tropicalis (X. tropicalis; الضفدع الغربي المخالب) ، وقد استخدمت في البحوث الطبية الحيوية منذ ثلاثينيات القرن العشرين عندما تم استخدام X. laevis من قبل أطباء جنوب أفريقيا لإجراء اختبارات الحمل الأولى

Protocol

تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية الموصوفة من قبل لجنة رعاية واستخدام المؤسسية في كلية دارتموث.

1. إعداد المعدات

ملاحظة: يتم تضمين سير عمل للإجراء ومثال على إعداد مقاعد البدلاء (الشكل 1).

1. قم بتوصيل مسدس الوشم ودواسة القدم بمصدر الطاقة. ضع دواسة القدم تحت سطح العمل.
2. تجميع مسدس الوشم
   1. باستخدام مفتاح ألين أو مفك البراغي السداسي ، قم بفك البراغي الموجودة في المقبض (الشكل 2 أ ، محاط باللون الأحمر).
   2. أدخل الطرف البلاستيكي بالكامل في المقبض. أحكم ربط المسمار لتثبيته في مكانه.
   3. أدخل الأنبوب ا....

النتائج

سيكون للوشم عالي الجودة ضربات داكنة ومقروءة على صدر الضفدع ويمكن تمييزه بوضوح من على بعد عدة أقدام (الشكل 5 أ). بشكل عام ، تعد الأرقام والعلامات الأكبر أفضل لسهولة القراءة ، ولكن يمكن تصغير الأسماء والأرقام الأطول لتناسب بشكل مريح صدر الضفدع. يصعب الحكم على طول عمر الوشم ، و?.......

Discussion

وشم البشر هو شكل من أشكال الفن يعود تاريخه إلى آلاف السنين ، وطالما أن البشر قد وشموا أنفسهم ، فقد قاموا أيضا بوشم أو وصفهم²³. إن معدات وتقنيات وسم ، وخاصة الثدييات ، راسخة وموثقة جيدا ويمكن الوصول إليها على نطاق واسع. في حين أن تمييز كان في الأصل للتمييز بين الماشية وردع السرقة

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
3 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1203RLB	Packaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRA	Worldwide Tattoo Supply	HTIPRS5-U	Packaged sterile
5 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1205RLB	Packaged sterile
7 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1207RLB	Packaged sterile
Clip Cord	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Foot pedal	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Inkpots	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Kimwipes, delicate task wipes	Fisher Scientific	06-666A
RCA Connection	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Scream Ink Pitch Black, 1oz	Worldwide Tattoo Supply	SI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
Stainless steel grips	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set	Worldwide Tattoo Supply	STEALTH2-SET
Styrofoam island	N/A	N/A	This is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)	Sigma-Aldrich	E10521	CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towels	Grainger	2U229	Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage Supply	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Wash bottle (with frog-safe water)	Fisher Scientific	FB0340923T	Frog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult female	Xenopus1	N/A
Zip-top plastic bag	N/A	N/A	This bag should be large enough to hold the styrofoam island