Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Temsili Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Burada, yetişkin Xenopus laevis'i (Afrika pençeli kurbağası) döner bir dövme makinesi ile dövme yöntemlerini açıklıyoruz. Doğru dövme, birkaç ay süren ve hayvanları araştırma ve kayıt tutma amaçları için kolayca ayırt edilebilir hale getiren koyu, kolay okunabilir rakamlarla sonuçlanır.

Özet

Hayvan modelleri, biyomedikal araştırmaların kapsamını genişleterek gelişimsel, moleküler ve hücresel biyoloji anlayışımızı geliştirir ve araştırmacıların insan hastalıklarını modellemesine olanak tanır. Bireysel hayvanları kaydetmek ve izlemek, araştırmacıların çalışma için gereken hayvan sayısını azaltmasına ve hayvan refahını iyileştirmek için uygulamaları iyileştirmesine olanak tanır. Memelileri işaretlemek ve izlemek için kulak delme ve kulak küpeleri de dahil olmak üzere iyi belgelenmiş birkaç yöntem mevcuttur. Bununla birlikte, sucul amfibi türlerini işaretleme yöntemleri sınırlıdır, mevcut kaynaklar modası geçmiş, etkisiz veya aşırı derecede maliyetlidir. Bu el yazmasında, Xenopus laevis'i döner bir dövme makinesiyle işaretlemek için yöntemleri ve en iyi uygulamaları özetliyoruz. Doğru dövme, yüksek kaliteli dövmelerle sonuçlanır, bireyleri araştırmacılar için kolayca ayırt edilebilir hale getirir ve hayvanların sağlığı için minimum risk oluşturur. Ayrıca, hızla solan ve hayvanlara gereksiz yere zarar veren dövmelere neden olabilecek düşük kaliteli dövmelerin nedenlerini de vurguluyoruz. Bu yaklaşım, araştırmacıların ve veteriner hekimlerin amfibileri işaretlemelerine, biyolojik kopyaları ve transgenik çizgileri izlemelerine ve hayvan sağlığının doğru kayıtlarını tutmalarına olanak tanır.

Giriş

Hayvan modelleri, insan sağlığı ile ilgili soruları araştırmak için yararlı araçlardır. Uygulamada, hayvan modellerini kullanan biyomedikal araştırmalar, sağlıklı bir hayvan kolonisinin dikkatli bir şekilde düzenlenmesini ve sürdürülmesini gerektirir. Etik hayvan muamelesi ve yetiştiriciliği için en iyi uygulamalar, deney için gereken hayvan sayısını azaltmayı ve hayvan refahını sağlamak için uygulamaları iyileştirmeyi amaçlamaktadır1. Pençeli kurbağa cinsi, Xenopus laevis (X. laevis; Afrika pençeli kurbağası) ve Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Batı pençeli kurbağa), X. laevis'in Güney Afrikalı do....

Protokol

Açıklanan tüm hayvan prosedürleri, Dartmouth College'ın Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. Ekipman kurulumu

NOT: Prosedür için bir iş akışı ve örnek bir tezgah kurulumu dahildir (Şekil 1).

  1. Dövme tabancasını ve ayak pedalını güç kaynağına bağlayın. Ayak pedalını çalışma yüzeyinin altına yerleştirin.
  2. Dövme tabancasının montajı
    1. Bir Alyan anahtarı veya altıgen tornavida kullanarak tutamaktaki vidaları gevşetin (Şekil 2A, kırmızı daire içine alınmış).
    2. Plastik ucu tut....

Temsili Sonuçlar

Yüksek kaliteli dövmeler, kurbağanın göğsünde koyu, okunaklı vuruşlara sahip olacak ve birkaç metre uzaklıktan net bir şekilde ayırt edilebilecektir (Şekil 5A). Genel olarak, daha büyük sayılar ve işaretler okunabilirlik için daha iyidir, ancak daha uzun adlar ve sayılar kurbağanın göğsüne rahatça sığacak şekilde küçültülebilir. Dövmenin uzun ömürlülüğünü değerlendirmek daha zordur, ancak yüksek kaliteli kurbağa dövmeleri en az 3-6 ay boyunca kara.......

Tartışmalar

İnsanları dövmek binlerce yıl öncesine dayanan bir sanattır ve insanlar kendilerini dövme yaptıkları sürece hayvanları da dövme yapmışlardır veya markalamışlardır23. Hayvanları, özellikle memelileri işaretlemek için ekipman ve teknikler iyi kurulmuş, iyi belgelenmiş ve geniş çapta erişilebilirdir. Hayvanları işaretlemek başlangıçta hayvancılık ve hırsızlık caydırıcılarını ayırt etmek için23 olsa da, biyomedikal araştırmalardaki .......

Açıklamalar

Yazarlar hiçbir rekabet çıkarı beyan etmezler.

Teşekkürler

Dartmouth College'ın Karşılaştırmalı Tıp ve Araştırma Merkezi'ne bu protokolde kullanılan hayvanlar için günlük yetiştiricilik sağladığı için teşekkür ederiz. Ayrıca protokolün test edilmesindeki ve hayvanların fotoğraflanmasındaki yardımları için Leah Jacob ve Adwaita Bose'a da teşekkür ederiz. Son olarak, dövme pratiği eğitimi için Ann Miller'ın laboratuvarına teşekkür ederiz. Bu çalışma, NIH hibesi R00 GM147826 JL'ye tarafından desteklenmiştir.

....

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
3 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1203RLBPackaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRAWorldwide Tattoo SupplyHTIPRS5-UPackaged sterile
5 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1205RLBPackaged sterile
7 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1207RLBPackaged sterile
Clip CordWorldwide Tattoo SupplyN/A
Foot pedalWorldwide Tattoo SupplyN/A
InkpotsWorldwide Tattoo SupplyN/A
Kimwipes, delicate task wipesFisher Scientific06-666A
RCA ConnectionWorldwide Tattoo SupplyN/A
Scream Ink Pitch Black, 1ozWorldwide Tattoo SupplySI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)Sigma-AldrichS5761
Stainless steel gripsWorldwide Tattoo SupplyN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo MachineWorldwide Tattoo SupplyN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box SetWorldwide Tattoo SupplySTEALTH2-SET
Styrofoam islandN/AN/AThis is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)Sigma-AldrichE10521CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towelsGrainger2U229Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage SupplyWorldwide Tattoo SupplyN/A
Wash bottle (with frog-safe water)Fisher ScientificFB0340923TFrog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult femaleXenopus1N/A
Zip-top plastic bagN/AN/AThis bag should be large enough to hold the styrofoam island

Referanslar

  1. Hubrecht, R. C., Carter, E. The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change. Animals (Basel). 9 (10), 754 (2019).
  2. Elkan, E. R. The Xenopus pregnancy test. British Med J. 2, 1253-1256 (1938).
  3. Vi....

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Bo De erSay 208D ner D vme MakinesiHayvan ModeliaretlemezlemeAmfibiBiyomedikal Ara t rma

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır