Methoden zum Tätowieren von Xenopus laevis mit einer rotierenden Tätowiermaschine

Zusammenfassung

Hier beschreiben wir Methoden zum Tätowieren von adulten Xenopus laevis (Afrikanischer Krallenfrosch) mit einer rotierenden Tätowiermaschine. Das richtige Tätowieren führt zu dunklen, gut lesbaren Ziffern, die mehrere Monate halten und die Tiere für Forschungs- und Aufzeichnungszwecke leicht unterscheidbar machen.

Zusammenfassung

Tiermodelle erweitern den Anwendungsbereich der biomedizinischen Forschung, erweitern unser Verständnis der Entwicklungs-, Molekular- und Zellbiologie und ermöglichen es Forschern, menschliche Krankheiten zu modellieren. Die Aufzeichnung und Verfolgung einzelner Tiere ermöglicht es den Forschern, die Anzahl der für Studien erforderlichen Tiere zu reduzieren und die Praktiken zur Verbesserung des Tierwohls zu verfeinern. Es gibt mehrere gut dokumentierte Methoden zur Markierung und Verfolgung von Säugetieren, darunter Ohrstanzen und Ohrmarken. Die Methoden zur Markierung aquatischer Amphibienarten sind jedoch begrenzt, da die vorhandenen Ressourcen veraltet, ineffektiv oder unerschwinglich teuer sind. In diesem Manuskript skizzieren wir Methoden und Best Practices für die Markierung von Xenopus laevis mit einer rotierenden Tätowiermaschine. Die richtige Tätowierung führt zu qualitativ hochwertigen Tätowierungen, die Individuen für Forscher leicht unterscheidbar machen und ein minimales Risiko für die Gesundheit der Tiere darstellen. Wir beleuchten auch die Ursachen für minderwertige Tätowierungen, die dazu führen können, dass Tätowierungen schnell verblassen und Tieren unnötigen Schaden zufügen. Dieser Ansatz ermöglicht es Forschern und Tierärzten, Amphibien zu markieren, wodurch sie biologische Replikate und transgene Linien verfolgen und genaue Aufzeichnungen über die Tiergesundheit führen können.

Einleitung

Tiermodelle sind nützliche Werkzeuge, um Fragen der menschlichen Gesundheit zu untersuchen. In der Praxis erfordert die biomedizinische Forschung mit Tiermodellen eine sorgfältige Organisation und Pflege einer gesunden Tierkolonie. Best Practices für einen ethischen Umgang und eine ethische Tierhaltung zielen darauf ab, die Anzahl der für Versuche benötigten Tiere zu reduzieren und die Praktiken zu verfeinern, um den Tierschutz zu gewährleisten¹. Die Gattung der Krallenfrösche, zu denen auch Xenopus laevis (X. laevis; Afrikanischer Krallenfrosch) und Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Westlicher Krallenfrosch....

Protokoll

Alle beschriebenen Tierverfahren wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee des Dartmouth College genehmigt.

1. Einrichtung der Ausrüstung

HINWEIS: Ein Workflow für das Verfahren und ein Beispiel für die Einrichtung einer Prüfbank sind enthalten (Abbildung 1).

1. Verbinde die Tattoopistole und das Fußpedal mit dem Stromnetz. Positionieren Sie das Fußpedal unter der Arbeitsfläche.
2. Zusammenbau der Tattoo-Pistole
   1. Lösen Sie mit einem Inbusschlüssel oder einem Inbusschraubendreher die Schrauben im Griff (Abbildung 2....

Diskussion

Das Tätowieren von Menschen ist eine Kunstform, die Tausende von Jahren zurückreicht, und solange Menschen sich selbst tätowiert haben, haben sie auch Tiere tätowiert oder gebrandmarkt²³. Die Ausrüstung und die Techniken zur Markierung von Tieren, insbesondere von Säugetieren, sind gut etabliert, gut dokumentiert und allgemein zugänglich. Während die Kennzeichnung von Tieren ursprünglich zur Unterscheidung von Nutztieren und zur Abschreckung von Diebstahl diente²³,.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
3 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1203RLB	Packaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRA	Worldwide Tattoo Supply	HTIPRS5-U	Packaged sterile
5 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1205RLB	Packaged sterile
7 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1207RLB	Packaged sterile
Clip Cord	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Foot pedal	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Inkpots	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Kimwipes, delicate task wipes	Fisher Scientific	06-666A
RCA Connection	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Scream Ink Pitch Black, 1oz	Worldwide Tattoo Supply	SI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
Stainless steel grips	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set	Worldwide Tattoo Supply	STEALTH2-SET
Styrofoam island	N/A	N/A	This is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)	Sigma-Aldrich	E10521	CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towels	Grainger	2U229	Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage Supply	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Wash bottle (with frog-safe water)	Fisher Scientific	FB0340923T	Frog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult female	Xenopus1	N/A
Zip-top plastic bag	N/A	N/A	This bag should be large enough to hold the styrofoam island