ロータリータトゥーマシンによる Xenopus laevis のタトゥー方法

要約

ここでは、回転式タトゥーマシンで大人の Xenopus laevis (アフリカの爪のあるカエル)の入れ墨の方法について説明します。適切な入れ墨は、数ヶ月間持続し、研究や記録管理の目的で動物を簡単に区別できるようにする、暗くて読みやすい数字をもたらします。

要約

動物モデルは生物医学研究の範囲を広げ、発生生物学、分子生物学、細胞生物学の理解を深め、研究者がヒトの疾患をモデル化することを可能にします。個々の動物を記録し追跡することで、研究者は研究に必要な動物の数を減らし、動物の健康を改善するための実践を洗練させることができます。哺乳類のマーキングと追跡には、耳のパンチングや耳のタグなど、いくつかの十分に文書化された方法が存在します。しかし、水生両生類の種をマーキングする方法は限られており、既存の資源は時代遅れであったり、効果がなかったり、法外に高価であったりします。この原稿では、ロータリータトゥーマシンで Xenopus laevis をマーキングする方法とベストプラクティスを概説します。適切な入れ墨は高品質の入れ墨をもたらし、研究者が個人を簡単に区別できるようにし、動物の健康へのリスクを最小限に抑えます。また、入れ墨がすぐに消えて動物に不必要な害を及ぼす可能性のある、質の悪い入れ墨の原因を強調します。このアプローチにより、研究者や獣医師は両生類に印を付けることができ、生物学的複製やトランスジェニック系統を追跡し、動物の健康状態を正確に記録することができます。

概要

動物モデルは、人間の健康に関する問題を調査するための便利なツールです。実際には、動物モデルを用いた生物医学研究では、健康な動物コロニーを慎重に組織し、維持する必要があります。倫理的な動物の取り扱いと飼育のためのベストプラクティスは、実験に必要な動物の数を減らし、動物福祉を確保するための実践を洗練することを目的としています¹。Xenopus laevis(X. laevis;アフリカツメガエル)とXenopus tropicalis(X. tropicalis;Western Clawed frog)は、1930年代に南アフリカの医師が最初の妊娠検査を行うためにX. laevisを使用して以来、生物医学研究に使用されてきました²。現代の妊娠検査薬ではカエルは不要になりましたが、Xenopus研究の役割は続いています。生物医学研究にXenopusを使用する利点には、よく注釈されたゲノム³、大量の卵の年間にわたる排卵誘発性⁴、体外受精に適した外部産卵などがあります。これらの特徴により、脊椎動物の発生学と発生学

プロトコル

記載されているすべての動物処置は、ダートマス大学の施設内動物管理および使用委員会によって承認されました。

1. 機器のセットアップ

注:手順のワークフローとベンチセットアップの例が含まれています(図1)。

1. タトゥーガンとフットペダルを電源に接続します。フットペダルを作業面の下に置きます。
2. タトゥーガンの組み立て
   1. 六角レンチまたは六角ドライバーを使用して、グリップのネジを緩めます(図2A、赤丸で囲んだ部分)。
   2. プラスチック製の先端をグリップの奥まで挿入します。ネジを締めて所定の位置に固定します。
   3. グリップの背面に金属チューブを挿入します(図2A)。こちらは調整されますので、半分の長さに差し込んでいきます。ネジを締めて所定の位置に固定します。
   4. タトゥー針をグリップの背面に挿入して、グリップの前面にあるプラスチック製の先端に快適に収まるようにします(図2B)。
   5. 針と金属チューブの背面をチューブクランプに通します。針がプ....

ディスカッション

人間を入れ墨することは何千年も前にさかのぼる芸術形式であり、人間が自分自身を入れ墨している限り、彼らは動物にも入れ墨をしたり、ブランド化したりしてきました²³。動物、特に哺乳類をマーキングするための機器と技術は、十分に確立され、十分に文書化されており、広くアクセス可能です。動物にマーキングすることは、もともと家畜と盗難の抑止力を区別す?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
3 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1203RLB	Packaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRA	Worldwide Tattoo Supply	HTIPRS5-U	Packaged sterile
5 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1205RLB	Packaged sterile
7 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1207RLB	Packaged sterile
Clip Cord	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Foot pedal	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Inkpots	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Kimwipes, delicate task wipes	Fisher Scientific	06-666A
RCA Connection	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Scream Ink Pitch Black, 1oz	Worldwide Tattoo Supply	SI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
Stainless steel grips	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set	Worldwide Tattoo Supply	STEALTH2-SET
Styrofoam island	N/A	N/A	This is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)	Sigma-Aldrich	E10521	CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towels	Grainger	2U229	Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage Supply	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Wash bottle (with frog-safe water)	Fisher Scientific	FB0340923T	Frog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult female	Xenopus1	N/A
Zip-top plastic bag	N/A	N/A	This bag should be large enough to hold the styrofoam island