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Dans cet article

  • Résumé
  • Résumé
  • Introduction
  • Protocole
  • Résultats Représentatifs
  • Discussion
  • Déclarations de divulgation
  • Remerciements
  • matériels
  • Références
  • Réimpressions et Autorisations

Résumé

Ici, nous décrivons les méthodes pour tatouer le Xenopus laevis adulte (grenouille à griffes africaines) avec une machine à tatouer rotative. Un tatouage approprié permet d’obtenir des chiffres sombres et facilement lisibles qui durent plusieurs mois et permettent de distinguer facilement les animaux à des fins de recherche et de tenue de registres.

Résumé

Les modèles animaux élargissent la portée de la recherche biomédicale, approfondissent notre compréhension de la biologie développementale, moléculaire et cellulaire et permettent aux chercheurs de modéliser les maladies humaines. L’enregistrement et le suivi des animaux individuels permettent aux chercheurs de réduire le nombre d’animaux nécessaires à l’étude et d’affiner les pratiques pour améliorer le bien-être des animaux. Il existe plusieurs méthodes bien documentées pour marquer et suivre les mammifères, notamment le poinçonnage des oreilles et les étiquettes d’oreille. Cependant, les méthodes de marquage des espèces d’amphibiens aquatiques sont limitées, les ressources existantes étant désuètes, inefficaces ou d’un coût prohibitif. Dans ce manuscrit, nous décrivons les méthodes et les meilleures pratiques pour marquer Xenopus laevis avec une machine à tatouer rotative. Un tatouage approprié permet d’obtenir des tatouages de haute qualité, ce qui rend les individus facilement distinguables par les chercheurs et présente un risque minimal pour la santé des animaux. Nous soulignons également les causes des tatouages de mauvaise qualité, qui peuvent entraîner des tatouages qui s’estompent rapidement et causent des dommages inutiles aux animaux. Cette approche permet aux chercheurs et aux vétérinaires de marquer les amphibiens, ce qui leur permet de suivre les réplicats biologiques et les lignées transgéniques et de tenir des registres précis de la santé animale.

Introduction

Les modèles animaux sont des outils utiles pour étudier des questions relatives à la santé humaine. En pratique, la recherche biomédicale utilisant des modèles animaux nécessite une organisation minutieuse et le maintien d’une colonie animale saine. Les meilleures pratiques en matière de manipulation et d’élevage éthiques des animaux visent à réduire le nombre d’animaux nécessaires à l’expérimentation et à affiner les pratiques pour assurer le bien-être des animaux1. Le genre de grenouille à griffes, y compris Xenopus laevis (X. laevis ; grenouille à griffes africaines) et Xenopus tropicalis (X. tropicalis ; ....

Protocole

Toutes les procédures décrites sur les animaux ont été approuvées par le comité institutionnel de protection et d’utilisation des animaux du Dartmouth College.

1. Configuration de l’équipement

REMARQUE : un flux de travail pour la procédure et un exemple de configuration de banc sont inclus (Figure 1).

  1. Connectez le pistolet de tatouage et la pédale à l’alimentation électrique. Placez la pédale sous la surface de travail.
  2. Assemblage du pistolet de tatouage
    1. À l’aide d’une clé Allen ou d’un tournevis hexagonal, desserrez les vis de la poignée ....

Résultats Représentatifs

Les tatouages de haute qualité auront des traits sombres et lisibles sur la poitrine de la grenouille et peuvent être clairement différenciés à plusieurs pieds de distance (Figure 5A). En général, les grands nombres et les marques sont meilleurs pour la lisibilité, mais les noms et les numéros plus longs peuvent être réduits pour s’adapter confortablement à la poitrine de la grenouille. La longévité des tatouages est plus difficile à juger, mais les tatouages de grenouilles .......

Discussion

Tatouer des humains est une forme d’art qui remonte à des milliers d’années, et depuis que les humains se tatouent eux-mêmes, ils ont également tatoué ou marqué des animaux23. L’équipement et les techniques de marquage des animaux, en particulier des mammifères, sont bien établis, bien documentés et largement accessibles. Alors que le marquage des animaux servait à l’origine à distinguer le bétail et les moyens de dissuasion contre le vol23, son rôle d.......

Déclarations de divulgation

Les auteurs ne déclarent aucun intérêt concurrent.

Remerciements

Nous remercions le Centre de médecine et de recherche comparatives du Dartmouth College d’avoir fourni un élevage quotidien aux animaux utilisés dans ce protocole. Nous remercions également Leah Jacob et Adwaita Bose pour leur aide dans la mise à l’essai du protocole et la photographie d’animaux. Enfin, nous remercions le laboratoire d’Ann Miller pour sa formation à la pratique du tatouage. Ce travail a été soutenu par la subvention R00 du NIH GM147826 à J.L.

....

matériels

NameCompanyCatalog NumberComments
3 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1203RLBPackaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRAWorldwide Tattoo SupplyHTIPRS5-UPackaged sterile
5 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1205RLBPackaged sterile
7 needle round linersWorldwide Tattoo Supply1207RLBPackaged sterile
Clip CordWorldwide Tattoo SupplyN/A
Foot pedalWorldwide Tattoo SupplyN/A
InkpotsWorldwide Tattoo SupplyN/A
Kimwipes, delicate task wipesFisher Scientific06-666A
RCA ConnectionWorldwide Tattoo SupplyN/A
Scream Ink Pitch Black, 1ozWorldwide Tattoo SupplySI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)Sigma-AldrichS5761
Stainless steel gripsWorldwide Tattoo SupplyN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo MachineWorldwide Tattoo SupplyN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box SetWorldwide Tattoo SupplySTEALTH2-SET
Styrofoam islandN/AN/AThis is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)Sigma-AldrichE10521CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towelsGrainger2U229Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage SupplyWorldwide Tattoo SupplyN/A
Wash bottle (with frog-safe water)Fisher ScientificFB0340923TFrog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult femaleXenopus1N/A
Zip-top plastic bagN/AN/AThis bag should be large enough to hold the styrofoam island

Références

  1. Hubrecht, R. C., Carter, E. The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change. Animals (Basel). 9 (10), 754 (2019).
  2. Elkan, E. R. The Xenopus pregnancy test. British Med J. 2, 1253-1256 (1938).
  3. Vi....

Réimpressions et Autorisations

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Valeur videNum ro 208Machine tatouer rotativeMod le animalMarquagePistageAmphibienRecherche biom dicale

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