Методы нанесения татуировки Xenopus laevis с помощью ротационной тату-машинки

Резюме

Здесь мы опишем методы нанесения татуировки взрослой особи Xenopus laevis (африканская когтистая лягушка) с помощью ротационной тату-машинки. Правильная татуировка приводит к темным, легко читаемым цифрам, которые сохраняются в течение нескольких месяцев и делают животных легко различимыми для исследований и ведения учета.

Аннотация

Животные модели расширяют сферу биомедицинских исследований, углубляя наше понимание биологии развития, молекулярной и клеточной биологии и позволяя исследователям моделировать болезни человека. Регистрация и отслеживание отдельных животных позволяет исследователям сократить количество животных, необходимых для исследования, и усовершенствовать методы для улучшения благополучия животных. Существует несколько хорошо задокументированных методов маркировки и отслеживания млекопитающих, включая пробивание ушей и ушные бирки. Тем не менее, методы маркировки водных видов амфибий ограничены, а существующие ресурсы устарели, неэффективны или непомерно дороги. В этой рукописи мы описываем методы и лучшие практики маркировки Xenopus laevis с помощью ротационной тату-машинки. Правильная татуировка приводит к получению высококачественных татуировок, что делает людей легко различимыми для исследователей и представляет минимальный риск для здоровья животных. Мы также выделяем причины некачественных татуировок, результатом которых могут стать татуировки, которые быстро выцветают и причиняют ненужный вред животным. Такой подход позволяет исследователям и ветеринарам маркировать амфибий, что позволяет им отслеживать биологические репликации и трансгенные линии, а также вести точные записи о здоровье животных.

Введение

Животные модели являются полезными инструментами для исследования вопросов, относящихся к здоровью человека. На практике биомедицинские исследования на животных моделях требуют тщательной организации и содержания здоровой колонии животных. Передовые методы этичного обращения с животными и их содержания направлены на сокращение количества животных, необходимых для экспериментов, и совершенствование методов обеспечения благополучия животных¹. Род когтистых лягушек, включая Xenopus laevis (X. laevis; Африканская когтистая лягушка) и Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Западная когтистая лягушка) использовались в ....

протокол

Все описанные процедуры для животных были одобрены Комитетом по институциональному уходу за животными и их использованию Дартмутского колледжа.

1. Настройка оборудования

ПРИМЕЧАНИЕ: В комплект входят рабочий процесс для процедуры и пример настройки стенда (Рисунок 1).

1. Подключите тату-пистолет и ножную педаль к источнику питания. Расположите ножную педаль под рабочей поверхностью.
2. Сборка тату-пистолета
   1. С помощью шестигранного ключа или шестигранной отвертки ослабьте винты в рукоятке (рисунок 2A, обведен красным ....

Результаты

Высококачественные татуировки будут иметь темные, разборчивые штрихи на груди лягушки и могут быть четко различимы с расстояния в несколько футов (Рисунок 5А). В целом, более крупные цифры и маркировки лучше для удобочитаемости, но более длинные имена и номера можно сдел.......

Обсуждение

Татуировка людей — это форма искусства, насчитывающая тысячи лет, и до тех пор, как люди татуируют себя, они также татуируют или клеймят животных^. Оборудование и методы маркировки животных, особенно млекопитающих, хорошо зарекомендовали себя, хорошо задокументированы и ши?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
3 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1203RLB	Packaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRA	Worldwide Tattoo Supply	HTIPRS5-U	Packaged sterile
5 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1205RLB	Packaged sterile
7 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1207RLB	Packaged sterile
Clip Cord	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Foot pedal	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Inkpots	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Kimwipes, delicate task wipes	Fisher Scientific	06-666A
RCA Connection	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Scream Ink Pitch Black, 1oz	Worldwide Tattoo Supply	SI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
Stainless steel grips	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set	Worldwide Tattoo Supply	STEALTH2-SET
Styrofoam island	N/A	N/A	This is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)	Sigma-Aldrich	E10521	CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towels	Grainger	2U229	Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage Supply	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Wash bottle (with frog-safe water)	Fisher Scientific	FB0340923T	Frog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult female	Xenopus1	N/A
Zip-top plastic bag	N/A	N/A	This bag should be large enough to hold the styrofoam island