로타리 문신 기계로 Xenopus laevis 를 문신하는 방법

요약

여기에서는 회전식 문신 기계로 성인 Xenopus laevis (아프리카 발톱 개구리)에 문신을 새기는 방법을 설명합니다. 적절한 문신을 하면 몇 달 동안 지속되는 어둡고 쉽게 읽을 수 있는 숫자가 생성되며 연구 및 기록 보관 목적으로 동물을 쉽게 구별할 수 있습니다.

초록

동물 모델은 생물 의학 연구의 범위를 확장하여 발달, 분자 및 세포 생물학에 대한 이해를 높이고 연구원이 인간 질병을 모델링할 수 있도록 합니다. 개별 동물을 기록하고 추적함으로써 연구자들은 연구에 필요한 동물의 수를 줄이고 동물 복지를 개선하기 위한 관행을 개선할 수 있습니다. 포유류를 표시하고 추적하기 위한 몇 가지 잘 문서화된 방법이 존재하며, 여기에는 귀 펀칭 및 귀 태그가 포함됩니다. 그러나 수생 양서류 종을 표시하는 방법은 제한적이며, 기존 자원은 구식이거나 비효율적이거나 엄청나게 비용이 많이 듭니다. 이 원고에서는 회전식 문신 기계로 Xenopus laevis 를 표시하는 방법과 모범 사례를 간략하게 설명합니다. 적절한 문신은 고품질 문신을 만들어 연구자들이 개인을 쉽게 구별할 수 있도록 하고 동물의 건강에 대한 위험을 최소화합니다. 우리는 또한 문신이 빨리 퇴색하고 동물에게 불필요한 해를 끼칠 수 있는 품질이 좋지 않은 문신의 원인을 강조합니다. 이 접근 방식을 통해 연구자와 수의사는 양서류를 표시하여 생물학적 복제 및 유전자 변형 계통을 추적하고 동물의 건강 상태에 대한 정확한 기록을 유지할 수 있습니다.

서문

동물 모델은 인간의 건강과 관련된 질문을 조사하는 데 유용한 도구입니다. 실제로, 동물 모델을 사용한 생물 의학 연구는 건강한 동물 군집의 신중한 조직과 유지를 필요로 합니다. 윤리적 동물 취급 및 축산을 위한 모범 사례는 실험에 필요한 동물의 수를 줄이고 동물 복지를 보장하기 위한 관행을 개선하는 것을 목표로 합니다¹. Xenopus laevis(X. laevis; 아프리카 발톱 개구리)와 Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Western clawed frog)는 1930년대 남아프리카 공화국 의사들이 X. laevis를 사용하여 최초의 임신 테스트를 실시한 이래로 생물의학 연구에 사용되어 왔다². 현대의 임신 테스트기는 더 이상 개구리를 필요로 하지 않지만, 제노푸스 연구의 역할은 여전히 유효하다. 생물 의학 연구에 Xenopus를 사용하는 장점으로는 주석이 잘 달린 게놈³, 큰 난자의 연중 유도 배란⁴, 체외 수정이 가능한 외부에서 낳은 난자 등이 있습니다. 이러한....

프로토콜

설명된 모든 동물 시술은 다트머스 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다.

1. 장비 설정

참고: 절차에 대한 작업 흐름과 벤치 설정 예가 포함되어 있습니다(그림 1).

1. 타투 건과 풋 페달을 전원 공급 장치에 연결합니다. 발 페달을 작업 표면 아래에 놓습니다.
2. 문신 총 조립
   1. 육각 렌치 또는 육각 드라이버를 사용하여 그립의 나사를 풉니다(빨간색 원으로 표시된 그림 2A).
   2. 플라스틱 팁을 그립에 완전히 삽입합니다. 나사를 조여 제자리에 고정합니다.
   3. 그립 뒤쪽에 금속 튜브를 삽입합니다(그림 2A). 이것은 조정되므로 길이의 절반으로 삽입하십시오. 나사를 조여 제자리에 고정합니다.
   4. 그립 뒤쪽을 통해 문신 바늘을 삽입하여 그립 앞쪽의 플라스틱 팁에 편안하게 앉도록 합니다(그....

토론

인간에게 문신을 새기는 것은 수천 년 전으로 거슬러 올라가는 예술 형식이며, 인간이 문신을 하는 동안 동물에게도 문신을 하거나 낙인을 찍었습니다²³. 동물, 특히 포유류를 표시하는 장비와 기술은 잘 확립되어 있고 잘 문서화되어 있으며 널리 접근할 수 있습니다. 동물에 표시를 하는 것은 원래 가축과 절도 방지를 구별하기 위한 것이었지만²³ 생물의학 연?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
3 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1203RLB	Packaged sterile
5 Needle Round Disposable ULTRA	Worldwide Tattoo Supply	HTIPRS5-U	Packaged sterile
5 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1205RLB	Packaged sterile
7 needle round liners	Worldwide Tattoo Supply	1207RLB	Packaged sterile
Clip Cord	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Foot pedal	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Inkpots	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Kimwipes, delicate task wipes	Fisher Scientific	06-666A
RCA Connection	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Scream Ink Pitch Black, 1oz	Worldwide Tattoo Supply	SI101
Sodium bicarbonate (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
Stainless steel grips	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set	Worldwide Tattoo Supply	STEALTH2-SET
Styrofoam island	N/A	N/A	This is the lid of a styrofoam cold shipping container
Tricaine (ethyl 3-aminobenzonate methanesulfate)	Sigma-Aldrich	E10521	CAUTION: IRRITANT
Unbleached paper towels	Grainger	2U229	Paper towels MUST be unbleached, bleach is toxic to amphibians
Voltage Supply	Worldwide Tattoo Supply	N/A
Wash bottle (with frog-safe water)	Fisher Scientific	FB0340923T	Frog safe water is dechlorinated, pH 7.0-8.5, conductivity 1200-1800 uS
X. laevis adult female	Xenopus1	N/A
Zip-top plastic bag	N/A	N/A	This bag should be large enough to hold the styrofoam island