آلية Shu-Mu الدماغ والكلى المضغوطة في علاج قلة الوحدة في الفئران عبر محور ما تحت المهاد والغدة النخامية والخصية

Summary

تهدف هذه الدراسة إلى التحقق من التأثير العلاجي لنقطة الوخز بالإبر في الدماغ والكلى Shu-Mu على قلة وحدة النطاف في الفئران واستكشاف آليتها الأساسية من خلال محور ما تحت المهاد والغدة النخامية والخصية (HPT).

Abstract

قلة وهن النطاف هو سبب شائع للعقم عند الذكور. ينظم محور الغدة النخامية والخصية (HPT) تمايز الغدد التناسلية ونضجها من خلال تخليق الهرمونات التناسلية وإطلاقها ، مما يلعب دورا حيويا في خصوبة الذكور. يؤدي تعطيل استقرار محور HPT إلى إضعاف إنتاج الحيوانات المنوية ، مما يقلل من جودة السائل المنوي. قد يوفر التحقيق في تأثير الوخز بالإبر الكهربائية على تنظيم محور HPT رؤى حول علاج قلة وهن النطاف. تم تقسيم خمسين من ذكور الفئران SD البالغة من العمر 8 أسابيع بشكل عشوائي إلى مجموعات فارغة ، ونموذجية ، و Shu-Mu Brain-Kidney ، وغير نقطة البر ، و L-carnitine (ن = 10 لكل مجموعة). باستثناء المجموعة الفارغة ، تلقت الفئران الأدينين داخل المعدة لمدة 28 يوما لإنشاء النموذج. بعد النمذجة ، خضعت مجموعة Shu-Mu Brain-Kidney للوخز بالإبر الكهربائية في نقاط الوخز بالإبر المحددة ، بينما تلقت المجموعة غير الوخز بالإبر علاجا زائفا لمدة 30 دقيقة يوميا. تلقت مجموعة L-carnitine L-carnitine (10 مل / كغ) داخل المعدة مرة واحدة يوميا. استمرت العلاجات لمدة 28 يوما. تم تقييم الظروف العامة ومعاملات الأعضاء وجودة السائل المنوي. قام تلطيخ HE بتحليل مورفولوجيا الأنسجة ، واكتشفت ELISA تغيرات هرمون المصل. بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، أظهرت مجموعات Shu-Mu Brain-Kidney و L-carnitine تحسنا كبيرا في حركات الروح والنظام الغذائي والأمعاء ، مع زيادة وزن الجسم ، بينما لم تظهر المجموعة غير الوخز بالإبر أي تغيير كبير. انخفضت معاملات الأعضاء الكلوية بشكل ملحوظ في مجموعات Shu-Mu Brain-Kidney و L-carnitine ولكنها ظلت دون تغيير في المجموعة غير السر. لم تظهر معاملات أعضاء الخصية فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعات العلاج. تحسن عدد المنوية وكثافتها وبقائها ومعدلات الحركة بشكل ملحوظ في مجموعات Shu-Mu Brain-Kidney و L-carnitine ، ولكن ليس في المجموعة غير الوخز بالإبر. أظهر تلطيخ H & E تلفا محفنا في الكلى وأنسجة الخصية في مجموعات Shu-Mu Brain Kidney و L-carnitine. كشفت ELISA عن زيادة T و GnRH و INHB وانخفاض مستويات LH و FSH و E2 و PRL في هذه المجموعات (ص < 0.001) ، مع عدم وجود تغييرات ذات دلالة إحصائية في المجموعة غير الوخز بالإبر. تشير هذه النتائج إلى أن العلاج بنقطة الوخز بالدماغ والكلى Shu-Mu يحسن جودة المنوية من خلال تنظيم محور HPT ، مما يوفر علاجا محتملا لقلة وهن النطاف.

Introduction

قلة الوهن الوحد، مقسمة إلى "قلة النطاف" و "وهن النطاف" ، هي واحدة من الأنواع الشائعة للعقم عند الذكور ، حيث يمثل معدل الإصابة حوالي 75٪ من حالات العقم عند الذكور¹. تتميز قلة الوهن النطاف بشكل أساسي بانخفاض كثافة المنوية وحركتها في الخصيتين وتتجلى في الغالب سريريا في اضطراب تكوين المنوية ، وانخفاض عدد المنوية ، وانخفاض حركة المنوية^2،3. في السنوات الأخيرة ، زاد معدل الإصابة بقليل الوهن السماف عاما بعد عام⁴. بدون علاج فعال ، سيكون له آثار ضارة طويلة المدى على الصحة الجسدية والعقلية للمرضى وحتى الانسجام الأسري⁵. أظهرت الدراسات أن المشاكل الوراثية⁶ ، واضطرابات الغدد الصماء التناسلية⁷ ، والتهابات الجهاز البولي التناسلي⁸ ، والأدوية الكيميائية⁹ يمكن أن تؤثر على إنتاج الحيوانات المنوية ونضجها ، مما يؤدي إلى انخفاض جودة السائل المنوي. في الوقت الحالي ، أصبح تحسين جودة المنوية التالفة مشكلة صعبة في المجال الطبي.

محور الغدة النخامية والخصية (HPT) هو المسار الرئيسي للتنظيم الإنجابي في الجسم ، والذي يمكن أن ينظم تمايز ونضج الغدد التناسلية عن طريق تحفيز تخليق وإفراز الهرمونات التناسلية المتعلقة بمنطقة ما تحت المهاد والغدة النخامية والخصيتين ، ويلعب دورا مهما في الحفاظ على الوظيفة الإنجابية الطبيعية للذكور¹⁰. إذا تعطل استقرار وظيفة محور HPT ، فسوف يتسبب ذلك في عدم كفاية إفراز الخصية للوصول إلى التركيز الفسيولوجي لهرمون التستوستيرون ، مما يؤدي إلى انخفاض عدد وجودة المنوية في الخصية¹¹. لذلك ، يهدف علاج قلة وهن النطاف بشكل أساسي إلى تنظيم وظيفة محور HPT وتحقيق الغرض من الحفاظ على توازن هرمونات الغدد الصماء ذات الصلة ، وبالتالي زيادة عدد الحيوانات المنوية في السائل المنوي ، وتعزيز نشاط الحيوانات المنوية ، وتحسين جودة السائل المنوي.

في العلاج السريري لقلة وهن النطاف ، يعتمد الطب الحديث بشكل أساسي طرقا مثل الجراحة والأدوية المضادة للأكسدة وتعزيز حركة المنوية^12،13 ، بينما يجمع العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية بين الوخز بالإبر الصينية التقليدية والكهرباء الحيوية الطبية الحديثة. تتميز بمزايا كونها سريعة ودقيقة ، ولها تأثير علاجي واضح ، ولها عدد قليل من ردود الفعل السلبية ، ومجموعة واسعة من الأمراض المناسبة ، وتكلفة العلاج المنخفضة ، ولها تأثير علاجي جيد على قلة وهن النطاف^14،15. "الظهر يانغ ، والبطن ين." تجمع تركيبة نقطة الوخز بالإبر Shu-Mu بين نقاط Shu ونقاط Mu ، واحدة في الأمام وواحدة في الخلف ، وواحدة يين وواحدة يانغ ، تعمل معا ، والمعروفة أيضا باسم طريقة الجمع بين نقطة الوخز بالإبر الأمامية والخلفية. يعتقد الطب الصيني التقليدي (TCM) أن الكلى هي جذر جوهر ما قبل الولادة ، ويقع المرض في الكلى. يتم اختيار نقطة Front-mu للكلي, Jingmen (GB25), ونقطة Back-shu, Shenshu (BL23), التي لها تأثير في تدفئة الكلى, مساعدة يانغ, والبحث عن يانغ داخل يين^16,17; تخزن الكلى الجوهر وتتحكم في إنتاج النخاع ، والدماغ هو بحر النخاع ومكان التقاء كل يانغ ، و Taixi (KI3) هي نقطة مصدر خط الزوال الكلوي Shaoyin للقدم ، والذي يمكنه تنظيم وتنشيط الكبد والكلى ، وتغذية الين ، وتوليد النخاع¹⁸. إلى جانب Epangsanxian (MS4) ، فإنه يربط الكلى والدماغ ، مما يعكس فكرة "تركيبة الوخز بالإبر بين الدماغ والكلى" في الطب الصيني^{التقليدي 19} ، والتأثير العلاجي أكثر وضوحا من تأثير الوخز بالإبر العادي.

تركز دراسات العلاج الحالية على جودة السائل المنوي في المقام الأول على تحسين بنية الخصية ووظيفتها ، بينما أجريت أبحاث محدودة حول تنظيم مستويات هرمون المصل عبر الأنسجة المختلفة لمحور الغدة النخامية والخصية (HPT)²⁰. في البحث الأولي ، تم استخدام تسلسل الحمض النووي الريبي (RNA-Seq) لتحديد الجينات المرشحة والمسارات التنظيمية المشاركة في تنظيم جودة السائل المنوي داخل أنسجة ما تحت المهاد والغدة النخامية والخصية للفئران السليمة والفئران النموذجية قليلة النطاف التي يسببها^{الأدينين 21}. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء اختبار جودة السائل المنوي والتحليل النسيجي لأنسجة الخصية في كلتا المجموعتين. قدمت هذه النتائج نظرة ثاقبة حول الآليات الجزيئية الكامنة وراء جودة السائل المنوي في فئران قلة الوهن النطاف الناجم عن الأدينين. يمكن أن يؤدي العلاج بالوخز بالإبر الكهربائية باستخدام نقطة الوخز بالإبر البعيدة التقريبية إلى تحسين جودة المنوية في الفئران قليلة الوهن النطاف عن طريق تنظيم محور HPT ، ويرتبط التأثير بعملية الإجهاد التأكسدي²². ومع ذلك ، من غير المعروف ما إذا كانت نقطة الوخز بالإبر الدماغية والكلى Shu-Mu يمكن أن تحسن جودة السائل المنوي للفئران من خلال تنظيم محور HPT. لمزيد من استكشاف الآلية التنظيمية لتحسين جودة السائل المنوي في فئران قلة وهن النطاف وطرق العلاج الفعالة ، استخدمت هذه الدراسة نموذجا للفئران الناجم عن الأدينين من قلة وهن النطاف واختارت أربع نقاط وخز بالإبر ، Epangsanxian و Shenshu و Jingmen و Taixi ، لاستكشاف الآلية ذات الصلة للتأثير العلاجي لنقطة الوخز بالإبر الدماغية والكلى Shu-Mu على قلة وهن النطاف في الفئران من جانب محور HPT ، توفير أساس علمي أكثر للعلاج السريري.

Protocol

تمت مراجعة جميع التجارب على والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات بجامعة نينغشيا الطبية (رقم الموافقة: IACUC-NYLAC-2021-130). أجريت الدراسة بما يتفق بدقة مع إرشادات ARRIVE 2.0 للتجارب على والتزمت بمبادئ رعاية الموضحة في دليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر. استخدمت هذه الدراسة العشوائية ذات الشواهد على تحليلا أحادي الاتجاه للتباين وتم إجراؤها في مركز التجارب على بجامعة نينغشيا الطبية في الفترة من مارس إلى مايو 2023. تم استخدام ذكور الفئران SD البالغة من العمر ثمانية أسابيع من درجة SPF والتي تزن 180-220 جم في هذه الدراسة. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد.

1. إنشاء النموذج الحيواني وإجراءات العلاج

1. التجارب والمجموعات
   1. احصل على خمسين فأرا من الذكور SD بعمر 8 أسابيع من فئة SPF تزن 180-220 جم.
   2. قم بإيواء جميع الفئران في ظل ظروف قياسية ، مع الحفاظ على درجة حرارة الغرفة من 22 إلى 25 درجة مئوية ، ورطوبة 50٪ -60٪ ، وتوفير الوصول المجاني إلى علف القوارض القياسي والمياه.
   3. بعد أسبوع واحد من التكيف ، قسم الفئران بشكل عشوائي إلى مجموعة فارغة (ب) (ن = 10) ومجموعة نمذجة (ن = 40) باستخدام طريقة جدول الأرقام العشوائية. يتم تطبيق محلول ملحي عادي للمجموعة الفارغة والأدينين لمجموعة النمذجة عن طريق التزقيم الفموي.
   4. بعد 28 يوما ، قسم مجموعة النمذجة بشكل عشوائي إلى مجموعة نموذجية (M) ، ومجموعة Shu-Mu Brain - Kidney (S) ، ومجموعة غير نقطة الوخز (N) ، ومجموعة L-carnitine (L) (ن = 10 لكل مجموعة). اترك مجموعة النماذج دون علاج.
      1. تطبيق تدخل الوخز بالإبر الكهربائية باستخدام طريقة مطابقة الوخز بالإبر بين الدماغ والكلى Shu-Mu على مجموعة Shu-Mu Brain-Clay. يتم تطبيق العلاج غير الوخز بالإبر للمجموعة غير الوخز بالإبر والسائل الفموي ل carnitine عن طريق التزقيم لمجموعة L-carnitine. علاج جميع المجموعات بشكل مستمر لمدة 28 يوما.
2. بناء النموذج
   ملاحظة: أظهرت الدراسات أن الجرعات العالية من الأدينين يمكن أن تؤثر على وظيفة الخصية في الفئران ، مما يؤدي إلى إفراز غير طبيعي للهرمونات الجنسية ، وتعطيل الاستقرار الوظيفي لمحور HPT ، وانخفاض جودة المنوية²³. لذلك ، يستخدم الأدينين بشكل شائع لإنشاء نماذج العقم الحيواني عند الذكور.
   1. يتم تطبيق محلول ملحي عادي (1 مل/100 جم من وزن الجسم) للمجموعة الفارغة والأدينين (20 ملغ/100 جم من وزن الجسم) للمجموعة النموذجية عن طريق التزقيم الفموي (الشكل 1 أ).
   2. تأكد من التحريض المستمر أثناء التزقيم لمنع ترسيب الأدينين وانسداد إبرة التزقيم. قم بإدارة العلاج مرة واحدة يوميا لمدة 28 يوما.
3. 1.3 إجراء العلاج
   1. مجموعة Shu-Mu للدماغ والكلى
      1. ابدأ التدخل في اليوم الأول بعد النمذجة. قم بإجراء الوخز بالإبر باستخدام إبر الوخز بالإبر المعقمة التي تستخدم لمرة واحدة على النقاط الثنائية. بعد إصلاح الجرذ ، قم بتعريض وتعقيم موقع الوخز بالإبر.
      2. قم بإصلاح جلد موقع الوخز بالإبر باليد اليسرى واثقب نقطة الوخز بالإبر بسرعة بإبرة الوخز بالإبر المعقمة التي يمكن التخلص منها في اليد اليمنى. قم بتوصيل محفز كهربائي. تطبيق الموجات التوسعية بتردد الوخز بالإبر الكهربائية 2 هرتز ، وشدة تحفيز 1.5 مللي أمبير ، ورعشة طفيفة في العضلات المحلية.
      3. قم بإجراء علاج الوخز بالإبر الكهربائية لمدة 30 دقيقة في كل مرة ، مرة واحدة يوميا ، لمدة 28 يوما متتاليا (الشكل 1 ب).
         ملاحظة: حدد نقاط الوخز بالإبر في الفئران بالإشارة إلى علم الوخز بالإبر والكي التجريبي ل Yong Tang ، الملحق الثاني ، "نقاط الوخز بالإبر شائعة الاستخدام في التجارب" ، جنبا إلى جنب مع طريقة اختيار النقاط التشريحية المقارنة¹⁹. تم اختيار النقاط التالية: (1) Epangsanxian (MS4): تقع على بعد 3 مم أقل و 4 مم خارج نقطة Touwei. العملية: وخز 1-2 مم مستقيم ؛ (2) شنشو (BL23): تقع في منطقة العمود الفقري ، على جانبي العملية الشائكة السفلية للفقرة القطنية الثانية ، 6 مم بجانب الخط الظهري المتوسط. العملية: وخز 6 مم مستقيم ؛ (3) Jingmen (GB25): يقع على الخصر الجانبي ، في الطرف الحر من الضلع 13 على الجانب السفلي. العملية: وخز 1-2 مم مستقيم ؛ (4) Taixi (KI3): يقع على الجانب الداخلي من القدم ، في الاكتئاب بين النقطة العالية للكاحل الإنسي والحافة الخلفية لوتر العرقوب. العملية: وخز 3 مم مستقيم.
   2. مجموعة غير الوخز بالإبر
      1. حدد وقم بتشغيل نقاط الوخز غير 1 و 2 و 3 بنفس طريقة مجموعة Shu-Mu Brain-Kidney (الشكل 1 ب).
         ملاحظة: نظرا لأن نقاط الوخز غير الحابرة لا تتبع مبدأ اختيار النقاط على طول خطوط الطول ، ووفقا لنظرية الطب الصيني التقليدي (TCM) والملاحظة السريرية طويلة المدى ، فإن نقاط الوخز بالوخز بهذه الوخز بالإبر لها تأثير علاجي ضئيل على المرضى الذين يعانون من قلة الوهن الحيواني²⁴. (1) غير نقطة الوخز بالإبر 1: تقع في منتصف الخط الفاصل بين طرف الكوع والإبط على الجانب الداخلي من الكوع. العملية: وخز 1-2 مم مستقيم ؛ (2) غير نقطة الوخز 2: تقع في منتصف نقطة المنتصف بين اللقيمة الإنسية لعظم العضد ومعصم الزند ، على الهامش الزندي. العملية: وخز 1-2 مم مستقيم ؛ (3) غير نقطة الوخز 3: تقع عند تقاطع العضلة الدالية الأمامية وعضلة العضلة ذات الرأسين في الذراع الداخلية. عملية: وخز 1-2 مم مستقيم.
   3. مجموعة L-carnitine
      1. يتم تطبيق سائل ليفوكارنيتين الفموي عن طريق التزقيم الفموي بجرعة 10 مل/كغ من وزن الجسم، مرة واحدة يوميا، لمدة 28 يوما متتاليا (الشكل 1 أ).
4. القتل الرحيم
   1. بعد العلاج ، اسمح لجميع الفئران بالصيام لمدة 24 ساعة ، وتخديرها عن طريق الحقن داخل الصفاق من 2٪ بنتوباربيتال الصوديوم (40 مجم / كجم من وزن الجسم ، باتباع البروتوكولات المعتمدة مؤسسيا) ، وجمع الدم من قمة القلب باستخدام إبرة جمع الدم الوريدي التي يمكن التخلص منها^21،24.
   2. بعد الوفاة بقطع الرأس ، قم بإزالة جانب واحد من البربخ لقياس جودة السائل المنوي. احصد أنسجة الكلى والخصية ، ووزنها وسجلها ، وثبتها في مثبت بارافورمالدهايد في درجة حرارة الغرفة لمدة 48 ساعة قبل دمجها في البارافين²⁴.

2. مؤشرات المراقبة

1. ملاحظة عامة: راقب الحالة العقلية والنظام الغذائي وحركات الأمعاء للفئران ، وراقب وزن أجسامها يوميا.
2. معاملات الأعضاء: بعد الوفاة ، قم بإزالة الدهون السطحية والأنسجة الضامة بعناية من أنسجة الكلى والخصية ، واشطفها بمحلول ملحي عادي ، وجففها بورق الترشيح ، ووزنها على ميزان ، وسجل القياسات لحساب معاملات الأعضاء. معامل العضو (٪) = (وزن العضو [جم] / وزن الجسم [جم]) × 100٪.
3. جودة السائل المنوي
   1. بعد إزالة الدهون الزائدة ، قم بإزالة ووضع جانب واحد من البربخ من كل فأر في حمام مائي بدرجة حرارة ثابتة عند 37 درجة مئوية لمدة 5 دقائق. ثم قم بقص العينة وتصفيتها ونفخها برفق واخلطها جيدا.
   2. خذ كمية 10 ميكرولتر من معلق المنوية المخفف وقم بإسقاطه على حافة زجاج الغطاء للوحة العد المسخنة مسبقا ، مما يسمح لتعليق المنوية بالتغلغل تلقائيا في غرفة العد.
   3. قياس عدد الحيوانات المنوية وكثافتها ومعدل البقاء على قيد الحياة ومعدل الحركة باستخدام نظام CASA (تحليل السائل المنوي بمساعدة الكمبيوتر^{) 21}.
4. تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين (H & E)
   ملاحظة: للحصول على تفاصيل حول الإجراء ، راجع Yang, N. et ^al.21.
   1. اشطف المناديل الثابتة بالماء الجاري وجففها وقم بتضمينها.
   2. قطع أقسام البارافين (بسمك 5 ميكرومتر) باستخدام ميكروتوم واخبزها على حرارة 65 درجة مئوية لمدة 4 ساعات.
   3. قم بإزالة الشمع من الأقسام وترطيبها بالماء.
   4. تلطخ الأقسام بمحلول تلطيخ الهيماتوكسيلين لمدة 3 دقائق ، ثم اشطفها بالماء الجاري.
   5. جفف الأقسام بنسبة 95٪ من الإيثانول لمدة 1 دقيقة ، ثم قم بتلطيخ محلول اليوزين لمدة دقيقتين.
   6. بعد إغلاق الشرائح ، قم بإجراء المسح الضوئي باستخدام ماسح ضوئي للشرائح ، وجمع الصور وتحليلها.
5. مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
   ملاحظة: للحصول على تفاصيل حول الإجراء ، راجع Yang, N. et ^al.21.
   1. لتحضير المصل ، أضف المواد القياسية والمصل من التركيزات المقابلة إلى آبار المواد القياسية وعينات الآبار المراد قياسها ، متبوعا بإضافة الكاشف المسمى بالإنزيم.
   2. قم بتنفيذ خطوات الحضانة والغسيل وتطوير اللون والإنهاء.
   3. حدد الامتصاص بطول موجي يبلغ 450 نانومتر باستخدام أداة تحمل علامة الإنزيم ، واحسب مستويات التعبير عن هرمون التستوستيرون (T) ، والهرمون المطلق لموجهة الغدد التناسلية (GnRH) ، والإنيهيبين ب (INHB) ، والهرمون اللوتيني (LH) ، والهرمون المنبه للجريب (FSH) ، والاستراديول (E2) ، والبرولاكتين (PRL).

3. التحليل الإحصائي

1. تحليل البيانات التجريبية باستخدام البرمجيات الإحصائية، وتقديم نتائج كل مجموعة كمتوسط ± انحراف معياري (المتوسط ± SD).
2. استخدم ANOVA أحادي الاتجاه لمقارنة وسائل العينة بين مجموعات متعددة تلبي افتراضات الحالة الطبيعية وتجانس التباين.
3. استخدم اختبار t للمقارنات بين مجموعتين ، والاختبارات غير المعلمية للبيانات التي لا تفي بالافتراضات المذكورة أعلاه.
4. ضع في اعتبارك الاختلافات ذات دلالة إحصائية عندما < p 0.05.

النتائج

تقييم النموذج

بعد النمذجة ، راقب الفئران للخمول ، والوضعية الرابضة ، والأطراف الباردة ، والإحجام عن تناول الطعام ، وفقدان الوزن ، وزيادة حجم البول ، والبراز الرخو ، وغيرها من الأعراض ، والتي تتوافق بشكل عام مع ...

Discussion

في الطب الصيني التقليدي ، تتكون "الكلى" من "الكلية الداخلية" ، في إشارة إلى وظائف الجهاز البولي في الطب الحديث ، و "الكلية الخارجية" ، في إشارة إلى محور ما تحت المهاد والغدة النخامية والغدد التناسلية والأعضاء التناسلية الخارجية^{التشريحية 25}. تنتمي الحويصلات ال?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Adenine	Beijing Solarbio Science & Technology Co. Ltd.	A8330
CASA computer-assisted semen analysis system	Nanning Songjing Tianlun Biotechnology Co., Ltd.	VICOS-SPERM
Centrifuge	Sartorius	A-14C
Differentiation fluid	Shanghai Biyuntian Biotechnology Co., Ltd	C0163M
Disposable sterile acupuncture needles	Hanyi brand	0.25mm*13mm
Drying machine	Leica	HI1220
Electrical stimulator	Hua Tuo Brand	SDZ-II
Electronic balance	Hangzhou Youheng Weighing Equipment Co., Ltd	HLD-6002
ELISA kit	Shanghai Jianglai Biotechnology Co. LTD	JL13251?JL11473?JL11525?JL12505?JL13256?JL12201
Enzyme-labeled instrument	Rayto	RT-6100
Eosin staining solution	Zhuhai Beso Biotechnology Co. LTD	BA-4024
Hematoxylin staining solution	Zhuhai Beso Biotechnology Co. LTD	BA-4041
Levocarnitine oral liquid	Northeast Pharmaceutical Group Shenyang First Pharmaceutical Co. LTD.	H19990372
Microtome	Leica	RM2255
Neutral balsam	Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co., Ltd	Zli-9555
Paraffin embedding machine	Leica	HistoCore Arcadia H
SD rat, 8-week-old, Male, 180-220 g	144 Animal Center of Ningxia Medical University
Slide scanner	Leica	Aperio LV1
Vortex oscillator	Haimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd	QL-902