هذه الطريقة تمكن من فحص ديناميات البروتين في الجسم الحي داخل الجهاز العصبي المركزي سليمة لمعالجة الأسئلة في علم الأعصاب وعلم المناعة. المزايا الرئيسية لهذا الإجراء هي استقرار الحركة ممتازة للحصول على صورة، وقت جراحية قصيرة، وانخفاض تعرض المشغل للتخدير الغازي، واللوحات الخلفية غير مكلفة للتخصيص. المرئية مظاهرة من هذه الطريقة أمر بالغ الأهمية لأنه من الصعب إزالة العظام دون إتلاف الأنسجة العصبية الكامنة بشكل وثيق خلال خطوات استئصال لامينيك من الإجراء.
قبل البدء في الإجراء، استخدم برنامج تصميم حاسوبي ثلاثي الأبعاد يساعد على إنشاء نموذج للأبعاد المشار إليها. اذاً لدينا جسم، وهو الكائن ثلاثي الأبعاد، هذا ما يمكننا ان نبدأ به. ما يمكنني القيام به بعد ذلك هو أننا يمكن أن تضع على أن إعدادات لإصدار الطباعة.
حتى إذا فتحت هذا تحرير، انتقل إلى خيارات متقدمة، وفتح نافذة التي تمكنني من إلقاء نظرة على كل من هذه الإعدادات. تعيين درجة حرارة فوهة إلى 205 درجة مئوية، ودرجة حرارة السرير إلى 45 درجة مئوية، وسرعة الطباعة إلى 45 ملليمتر في الثانية على طابعة 3D. استخدم فوهة ent 0.4 millimeter الساخنة وارتفاع طبقة 0.2 ملليمتر لطباعة اللوحات الخلفية.
ثم تقييم لوحات الظهر المطبوعة بصريا لسلامتها الهيكلية. تشير الأعطال الهيكلية الإجمالية إلى عيوب الطباعة. عندما تكون اللوحات الخلفية جاهزة، ضع رأس فأر تخدير عمره ثمانية إلى 12 أسبوعًا على وسادة حرارية بين قضبان الأذن لمقيد جراحي وطبق مرهم على عيني الحيوان.
بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القارص، استخدم شفرة رقم 11 لصنع فتحة 1.5 سنتيمترًا من الضمور إلى خط الوسط السفلي فوق المنطقة القطنية العليا الصدرية السفلية وفصل الجلد عن الصفاق. استخدام ملقط لقشر مرة أخرى أي الأنسجة الضامة الشفافة المتبقية تحت الجلد لفضح العضلات السطحية. ازاح العضلات برمح رغوة الجراحية جنبا إلى جنب مع العضلات العميقة المتبقية من الفقرات المستهدفة.
لإنشاء مقعد لللوحة الخلفية، امسح العضلة من الجانب الخلفي من الصدر 11 والجانب الأمامي من الصدر 13. استخدام ملقط لإزالة العضلات المتبقية من الأوتار حسب الضرورة. عندما تم إزالة كل من العضلات، وقطع بعناية الأوتار مع ملقط حتى يتم تحقيق مساحة كافية لتصور والتلاعب في الحبل الشوكي.
تأكد من أن ماطر الجافية في الفضاء الفقري ، وعظم اللامينار شبه الشفاف ، والأوعية الدموية السطحية المركزية تحت العظم ، والشريان المشع الأمامي مرئية بوضوح. تبلل المنطقة بالسوائل الشوكية الدماغية الاصطناعية الدافئة واستخدم الثقب الدقيق لرقيقة عظم اللامينة باستخدام السكتات الدماغية المستقيمة الموازية للمحور الطويل للحبل الشوكي. الامساك بلطف عملية سطحية مع ملقط، ورفع الفقرات.
يجب أن ترفع العظام بسهولة. استخدام عدد أربعة ملقط لمسح بعيدا أي شظايا العظام، والسيطرة على أي نزيف مع الرمح الجراحية وضغط ثابت لطيف حسب الضرورة. ثم شطف الأنسجة مع السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي الدافئ.
لزراعة الزجاج غطاء، وتطبيق بلطف ثلاثة ملليمتر بوروسيليكات غطاء الزجاج على الحبل المكشوف. استخدام ملعقة صغيرة لتطبيق 39 درجة مئوية درجة دافئة 2٪ agarose على حافة الزجاج والسماح للعمل الشعرية لرسم agarose تحت سطح الزجاج الغطاء. تطبيق لاصق الأنسجة على العمليات المفصلية العظمية المكشوفة من الفقرات المجاورة سليمة في مستوى الصدري 11 و 13 العمود الفقري.
تطبيق لاصق الأنسجة إضافية في حلقة حول موقع استئصال لامينك على وتر المجاورة وعملية عرضية. بعد ذلك ، استخدم ملعقة جديدة لتطبيق أسمنت الأسنان مختلطة مع المسرّع على طبقة لاصقة الأنسجة ووضع لوحة خلفية على الحقل الجراحي الذي تركز على نافذة الزجاج الغطاء. تطبيق طبقات رقيقة متعددة من الاسمنت الأسنان النتائج في التصاق لوحة خلفية أقوى، ولكن تأكد من وضع لوحة الظهر بسرعة قبل أن يبدأ الاسمنت الأسنان لتجف.
بعد السماح للأسمنت الأسنان لعلاج لمدة 10 دقائق، وملء في قاعدة الداخلية و الجانب السفلي من المكان الخلفي مع لاصقة إضافية. تطبيق الاسمنت الأسنان في طبقات رقيقة يمكن أن تساعد في الحد من خطر انتشار الاسمنت إلى الزجاج غطاء و agarose، والتي يمكن أن تعرض للخطر البروتوكول بأكمله. عندما جفف أسمنت الأسنان، تطبيق حامل لوحة الظهر شوك إلى الموضع المناسب على النافذة وبرغي لوحة الظهر في حامل لوحة الظهر.
ثم تطبيق المالحة على لوحة خلفية لاختبار التسرب. يمكن بعد ذلك نقل الحيوان والمنصة الجراحية إلى الجدول البصري من مجهر فوتون اثنين للتصوير من خلال نافذة الزجاج الغطاء. في هذه التجربة التمثيلية ، تم تصور EGFP كلودين إيجابية - 5 داخل الوصلات الضيقة المسماة فلورية في جميع أنحاء الضفيرة الوعائية.
يشير التحديد الواضح لهياكل الوصلات الضيقة في الإسقاط Z إلى أن الحد الأدنى من إزاحة الصورة XY يتم إنتاجه بعد استئصال لامينك ناجحة ووضع النافذة وغرس اللوحة الخلفية. أثناء محاولة هذا الإجراء من المهم أن نتذكر أن هذا الجراحة المجهرية أمر صعب وقد يستغرق وقتًا لإتقانه. ولكن بمجرد أن يتقن, يمكن إجراء هذه الجراحة في حوالي 30 دقيقة.
بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى، مثل المجهر الفوتوني والتصوير في الجسم الحي، للإجابة على أسئلة إضافية حول إعادة عرض الأوعية العصبية والعمليات المرضية الأخرى التي تنطوي على الحبل الشوكي.
