هنا نقدم بروتوكولا، يستخدم لدراسة الآثار على مستويات الإجهاد البيوفيزيائي والنفسي بعد زيارة إلى ثلاثة مواقع مع مستويات مختلفة من الطبيعة. نحن مهتمون بمعرفة ما إذا كان الموقع الذي يحتوي على مستويات أعلى من الطبيعة سيكون أكثر فعالية في مساعدة المشاركين على تقليل مستويات التوتر. بالإضافة إلى استخدام تقرير الذاتي الاستبيان، والميزة الرئيسية لاستخدام هذه التقنية هو أن تحليل مستويات الكورتيزول والأميليز التي تم جمعها من المشاركين عينات اللعاب يمكن أن تعطينا قراءة أكثر دقة وفهم أفضل لكيفية استجابة الجسم فعلا بعد زيارة لمواقع الترفيه.
ومن خلال هذا الإجراء، سيكون الدكتور هوكفار، وهو أستاذ من جامعة إنديانا. ابدأ بتقديم نفسك للموضوع. تزويدهم بنموذج موافقة للتوقيع على شرح الطبيعة الطوعية للدراسة والغرض منها وإجراءاتها.
إعطاء الموضوع شريط ذراع أحمر لتحديد الهوية في المستقبل. الحصول على مقاييس فسيولوجية ونفسية لمستويات التوتر عن طريق عينات اللعاب، قبل التجربة الترفيهية مباشرة، ومباشرة بعد الانتهاء من التجربة. جمع عينة من واحد إلى اثنين ملليلتر اللعاب باستخدام طريقة لعاب سلبي.
تعليمات المواضيع للسماح لعاب بركة في أفواههم، ثم سال لعاب أسفل القش اثنين بوصة وإلى قارورة cryo حتى تم جمع ملليلتر واحد. تسمية نماذج برقم معرف وثلاثة أرقام معينة وحرف للإشارة إلى توقيت جمع البيانات. ثم, تجميد العينة مؤقتا في علبة رغوة الستيرويد الكامل من الجليد الجاف لمدة لا تزيد عن ساعتين.
نقل العينات اِلَى مختبر وتخزينها عند درجة حرارة 80 درجة مئوية حتى يتم تحليلها. وأخيراً، استخدم كاشف الأميليز السائل لتحديد كمية الأميليز ألفا في عينات اللعاب. ثم، استخدام قارئ وضع متعددة قادرة على قراءة كثافة بصرية في 405 نانومتر مع درجة الحرارة التي تسيطر عليها إلى 37 درجة مئوية أثناء الفحص.
أولاً، الحصول على مجموعة من الأحماض الأمينية إنزيم الكورتيزول لقياس الكورتيزول في عينات اللعاب، مقياس طيفي لقراءة كثافة بصرية، أو OD، في 450 نانومتر، فضلا عن البرامج القادرة على استخدام تسجيلات OD من قارئ لوحة لأداء أربعة معلمة اللوجستية منحنى المناسب. السماح لجميع الكواشف لتكسير إلى 20 إلى 25 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة كحد أدنى. تمييع المخزن المؤقت للكورتيزول من واحد إلى خمسة باستخدام المياه الأيونية ، ثم تمييع عازلة الغسيل من واحد إلى 20 باستخدام المياه الأيونية.
بعد ذلك، ذاب العينات على الجليد قبل التحليل. ثم، تمييع العينات من واحد إلى 10 مع المخزن المؤقت للكورتيزول واستخدامها في غضون ساعتين من التحضير. لإعداد المعايير، تسمية أنابيب اختبار الزجاج من واحد إلى سبعة.
ثم، pipet 225 ميكرولترات من المخزن المؤقت المقايسة في أنبوب رقم واحد، و 125 ميكرولترات من العازلة في أنابيب من اثنين إلى سبعة. بعد ذلك، أضف 25 ميكرولترات من محلول مخزون الكورتيزول إلى الأنبوب رقم واحد، ودوامته. وأخيرا، إزالة 125 ميكروليتر من العازلة من أنبوب رقم واحد وإضافته إلى أنبوب رقم اثنين، ثم دوامة مرة أخرى.
وأشارت النتائج إلى انخفاض في مستويات كبيرة من الكورتيزول اللعابي بعد زيارة موقع A, الإعداد الطبيعي. لم تلاحظ أي تغييرات كبيرة في مستويات الكورتيزول في الموقع B و C.أبعد، وزادت مستويات الأميليز ألفا بعد المواضيع التي زار موقع C.After زيارة إلى المواقع الثلاثة واستخدام الاستبيانات تقرير المصير، ولوحظت انخفاضات كبيرة على عوامل المطالب والقلق. ولم تلاحظ أي تغييرات هامة في توتر العوامل في أي من المواقع الثلاثة، وأُبلغ عن زيادات كبيرة في الموقعين ألف والموقع باء بالنسبة لعوامل الفرح.
عادة، اعتمد الكثير من البحوث التي أجريت على الحد من الإجهاد على الاستبيانات التقرير الذاتي. في هذه الدراسة، قمنا بجمع عينات اللعاب للمشاركين لتحليل كيفية استجابة الجسم فعليًا بعد الزيارة إلى ثلاثة مواقع ذات مستويات مختلفة من الطبيعة. في هذا التصور، ونحن ظهرت على حد سواء تقنيات المختبر ومثال واحد من جمع البيانات في شغلها.
هذه التقنية تسمح للباحثين بالتقاط رد فعل الجسم على بيئات مختلفة. في يؤكد فرضيتنا أن البيئة الطبيعية يمكن أن يكون لها آثار إيجابية على صحة الإنسان. ويقترح البحوث المستقبلية لتطبيق القياسات البيوفيزيائية لمستوى الإجهاد عبر بيئات طبيعية مختلفة أو أنشطة مختلفة في الهواء الطلق مع التصميم التجريبي الحقيقي.
