Aquí presentamos un protocolo, utilizado para examinar los efectos sobre los niveles de estrés biofísico y psicológico tras una visita a tres lugares con diferentes niveles de naturaleza. Estamos interesados en saber si un sitio con mayores niveles de naturalidad será más eficaz para ayudar a los participantes a reducir sus niveles de estrés. Además de utilizar el cuestionario de autoinforjo, la principal ventaja de usar esta técnica es que analizar los niveles de cortisol y amilasa recogidos de las muestras de saliva de los participantes puede darnos una lectura más precisa y una mejor comprensión de cómo nuestro cuerpo realmente responde después de la visita a los sitios de recreación.
Demostrando el procedimiento estará el Dr. Hocevar, un profesor de la Universidad de Indiana. Comienza presentándote al tema. Proporcione un formulario de consentimiento para firmar explicando la naturaleza voluntaria, el propósito y los procedimientos del estudio.
Entregue al sujeto un brazalete rojo para su futura identificación. Obtener medidas fisiológicas y psicológicas de los niveles de estrés a través de muestras de saliva, justo antes de la experiencia recreativa, e inmediatamente después de la conclusión de la experiencia. Recoger una muestra de saliva de uno a dos mililitros usando un método de baba pasiva.
Instruya a los sujetos que permitan que la saliva se acose en la boca, luego babee por la paja de dos pulgadas y en el vial de crio hasta que se haya recogido un mililitro. Etiquete muestras con un número de ID de tres dígitos asignado y una letra para indicar el momento de la recopilación de datos. Entonces, congelar temporalmente la muestra en una caja de espuma de esteroides llena de hielo seco durante no más de dos horas.
Transportar las muestras marcadas a un laboratorio y almacenar a menos 80 grados Celsius hasta que se analicen. Por último, utilice un reactivo de amilasa líquida establecido para cuantificar la alfa amilasa en muestras de saliva. A continuación, utilice un lector multimodo capaz de leer una densidad óptica a 405 nanómetros con la temperatura controlada a 37 grados centígrados durante el ensayo.
En primer lugar, adquirir un kit de aminoácidos enzimáticos de cortisol para cuantificar el cortisol en muestras de saliva, un espectrofotómetro para leer una densidad óptica, u OD, a 450 nanómetros, así como software capaz de utilizar grabaciones OD del lector de placas para realizar un ajuste de curva logística de cuatro parámetros. Deje que todos los reactivos se equilibren a 20 a 25 grados centígrados durante un mínimo de 30 minutos. Diluir el tampón de ensayo de cortisol de uno a cinco usando agua desionizada, luego diluir el tampón de lavado del uno a 20 usando agua desionizada.
A continuación, descongele las muestras en hielo antes del análisis. Luego, diluir las muestras de uno a 10 con tampón de ensayo de cortisol y utilizar dentro de las dos horas de la preparación. Para preparar las normas, etiqueta los tubos de ensayo de vidrio del uno al siete.
Luego, pipetea 225 microlitros de tampón de ensayo en el tubo número uno, y 125 microlitros de tampón en tubos dos a siete. A continuación, agregue 25 microlitros de la solución de cortisol stock al tubo número uno y vórtice. Finalmente, retire 125 microlitros de tampón del tubo número uno y agréguelo al tubo número dos, luego vuelva a vórtice.
Los resultados indicaron una disminución en los niveles significativos de cortisol salivario después de visitar el sitio A, el entorno natural. No se observaron cambios significativos en los niveles de cortisol en el sitio B y C.Further, los niveles de alfa amilasa aumentaron después de que los sujetos visitaron el sitio C.Después de visitar los tres lugares y utilizando los cuestionarios de autoinfor informe, se observaron disminuciones significativas en los factores de demandas y preocupación. No se observaron cambios significativos en la tensión del factor para ninguno de los tres lugares y se reportaron aumentos significativos en los sitios A y en el sitio B para la alegría del factor.
Por lo general, gran parte de la investigación realizada sobre la reducción del estrés se ha basado en cuestionarios de autoinfor de informes. En este estudio, recogimos las muestras de saliva de los participantes para analizar cómo nuestro cuerpo realmente responde después de la visita a tres sitios con diferentes niveles de naturalidad. En esta visualización, presentamos tanto técnicas de laboratorio como un ejemplo de la recopilación de datos rellenado.
Esta técnica permite al investigador capturar la reacción de nuestro cuerpo a diferentes entornos. En confirma nuestra hipótesis de que el medio ambiente natural puede tener efectos positivos en la salud humana. Se sugiere que la investigación futura aplique mediciones biofísicas del nivel de estrés en diferentes entornos naturales o diferentes actividades al aire libre con un verdadero diseño experimental.
