여기에서 우리는 자연의 다른 수준을 가진 3개의 장소에 방문 한 후 생물 물리학 및 심리적 스트레스의 수준에 미치는 영향을 검사하는 데 사용되는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 자연스러움의 높은 수준을 가진 사이트가 참가자가 그들의 긴장 수준을 감소시키는 것을 돕는에서 더 효과적일 지 여부를 배우고 싶어합니다. 이 기술을 사용하는 것 외에도, 이 기술을 사용하는 주요 장점은 참가자 타액 샘플에서 수집 된 코티솔과 아밀라아의 수준을 분석하면 레크리에이션 사이트를 방문 한 후 우리 몸이 실제로 어떻게 반응하는지 보다 정확하게 읽고 더 잘 이해할 수 있다는 것입니다.
절차를 시연하는 것은 인디애나 대학의 교수 인 Hocevar 박사가 될 것입니다. 먼저 피사체에 자신을 소개합니다. 연구의 자발적성격, 목적 및 절차를 설명하는 서명에 동의 서를 제공합니다.
피사체에 빨간색 완장을 제공하여 향후 식별을 제공합니다. 타액 샘플을 통해 스트레스 수준의 생리적, 심리적 측정을 얻을, 레크리에이션 경험 직전에, 그리고 즉시 경험의 결론 다음. 수동 침을 사용하는 1~2밀리리터 타액 샘플을 수집합니다.
피험자에게 타액이 입에 풀을 수 있도록 지시한 다음, 2인치 빨대를 내리고 냉동 병부로 1밀리리터가 수집될 때까지 침을 흘립니다. 데이터 수집 의 타이밍을 나타내기 위해 할당된 세 자리 ID 번호와 문자로 샘플을 레이블을 지정합니다. 그런 다음, 일시적으로 2 시간 이상 건조 얼음의 전체 스테로이드 거품 상자에 샘플을 동결.
표시된 샘플을 실험실로 운반하고 분석될 때까지 섭씨 영하 80도에 보관하십시오. 마지막으로, 타액 샘플에서 알파 아밀라제를 정량화하기 위해 세트된 액체 아밀라제 시약을 사용하십시오. 이어서, 분석 중에 온도가 섭씨 37도까지 조절되는 405나노미터에서 광학 밀도를 판독할 수 있는 멀티 모드 리더기를 사용한다.
먼저, 타액 샘플에서 코티솔을 정량화하는 코티솔 효소 아미노산 키트, 광학 밀도를 판독하는 분광광계, 또는 OD, 450나노미터에서 플레이트 판독기에서 OD 레코딩을 사용할 수 있는 소프트웨어뿐만 아니라 4개의 파라미터 물류 곡선 피팅을 수행할 수 있다. 모든 시약이 섭씨 20~25도까지 최소 30분간 평형화할 수 있도록 합니다. 코티솔 분석 버퍼를 1~5개의 분해된 물을 사용한 다음, 탈이온화된 물을 사용하여 1~20개의 세척 버퍼를 희석시 희석시합니다.
다음으로, 분석하기 전에 얼음에 샘플을 해동. 그런 다음 코티솔 분석 버퍼로 1-10의 샘플을 희석시키고 준비 후 2시간 이내에 사용하십시오. 표준을 준비하기 위해 라벨 유리 테스트 튜브는 1~7개까지 튜브를 표시합니다.
이어서, 225 마이크로리터의 분석 버퍼를 튜브 번호 1로, 125마이크로리터의 완충제는 2~7번 튜브로 한다. 다음으로, 튜브 번호 1, 및 소용돌이에 코티솔 스톡 솔루션의 25 마이크로 리터를 추가합니다. 마지막으로, 튜브 번호 1에서 버퍼125 마이크로 리터를 제거하고 튜브 번호 2에 추가 한 다음 다시 소용돌이를 추가하십시오.
결과는 사이트 A, 자연 설정을 방문 한 후 타액 코티솔의 상당한 수준의 감소를 나타냈다. 사이트 B와 C.Further에서 코티솔 수준에 큰 변화가 관찰되지 않았으며, 피험자가 사이트를 방문한 후 알파 아밀라아제의 수치가 증가했습니다.3개 지점을 방문하고 자체 보고서 설문지를 사용한 후, 요구와 걱정의 요인에 상당한 감소가 관찰되었다. 세 위치 중 어느 곳에도 요인 장력에 큰 변화가 관찰되지 않았으며, 요인 기쁨에 대한 사이트 A 및 사이트 B에서 상당한 증가가 보고되었다.
일반적으로 스트레스 감소에 대한 연구의 대부분은 자체 보고서 설문지에 의존했습니다. 이 연구에서는 참가자의 타액 샘플을 수집하여 자연스러움이 다른 세 부위를 방문한 후 우리 몸이 실제로 어떻게 반응하는지 분석했습니다. 이 시각화에서는 실험실 기술과 채워진 데이터 수집의 한 가지 예를 모두 소개했습니다.
이 기술은 연구원이 다른 환경에 우리의 바디의 반응을 포착하는 것을 허용합니다. 자연 환경이 인간의 건강에 긍정적 인 영향을 미칠 수 있다는 우리의 가설을 확인합니다. 미래의 연구는 다른 자연 환경이나 진정한 실험 설계와 다른 야외 활동에 걸쳐 스트레스의 수준의 생물 물리학 측정을 적용하는 것이 좋습니다.
