Ici, nous présentons un protocole, utilisé pour examiner les effets sur les niveaux de stress biophysique et psychologique après une visite à trois endroits avec des niveaux différents de la nature. Nous sommes intéressés à savoir si un site avec des niveaux plus élevés de naturel sera plus efficace pour aider les participants à réduire leurs niveaux de stress. En plus d’utiliser le questionnaire d’auto-rapport, le principal avantage de l’utilisation de cette technique est que l’analyse des niveaux de cortisol et d’amylase prélevés sur les échantillons de salive participants peut nous donner une lecture plus précise et une meilleure compréhension de la façon dont notre corps réagit réellement après la visite aux sites de loisirs.
Le Dr Hocevar, professeur à l’Université de l’Indiana, démontrera la procédure. Commencez par vous présenter au sujet. Fournissez-leur un formulaire de consentement à signer expliquant la nature volontaire, l’objet et les procédures de l’étude.
Donnez au sujet un brassard rouge pour identification future. Obtenez des mesures physiologiques et psychologiques des niveaux de stress au moyen d’échantillons de salive, juste avant l’expérience récréative et immédiatement après la fin de l’expérience. Recueillir un échantillon de salive d’un à deux millilitres à l’aide d’une méthode passive de bave.
Demandez aux sujets de laisser la salive se mettre en commun dans leur bouche, puis bavez la paille de deux pouces et dans le flacon cryo jusqu’à ce qu’un millilitre ait été recueilli. Étiquetez les échantillons avec un numéro d’identification à trois chiffres et une lettre pour indiquer le moment de la collecte des données. Ensuite, congelez temporairement l’échantillon dans une boîte en mousse stéroïde pleine de glace sèche pendant au plus deux heures.
Transporter les échantillons marqués dans un laboratoire et les conserver à moins 80 degrés Celsius jusqu’à ce qu’ils soient analysés. Enfin, utilisez un reagent amylase liquide pour quantifier l’alpha amylase dans les échantillons de salive. Ensuite, utilisez un lecteur multi mode capable de lire une densité optique à 405 nanomètres avec la température contrôlée à 37 degrés Celsius pendant l’essai.
Tout d’abord, acquérir un kit d’acides aminés enzymatique cortisol pour quantifier le cortisol dans les échantillons de salive, un spectrophotomètre pour lire une densité optique, ou OD, à 450 nanomètres ainsi que des logiciels capables d’utiliser des enregistrements od du lecteur de plaque pour effectuer quatre paramètres de montage de courbe logistique. Permettre à tous les reagents d’équilibrer à 20 à 25 degrés Celsius pendant au moins 30 minutes. Diluer le tampon d’analyse de cortisol un à cinq à l’aide d’eau déionisée, puis diluer le tampon de lavage un à 20 à l’aide d’eau déionisée.
Ensuite, décongelez les échantillons sur la glace avant l’analyse. Ensuite, diluer les échantillons un à 10 avec tampon d’analyse de cortisol et utiliser dans les deux heures suivant la préparation. Pour préparer les normes, étiquetez les tubes à essai en verre un à sept.
Ensuite, pipet 225 microlitres de tampon d’essai dans le tube numéro un, et 125 microlitres de tampon dans les tubes deux à sept. Ensuite, ajoutez 25 microlitres de la solution de stock de cortisol au tube numéro un et au vortex. Enfin, retirez 125 microlitres de tampon du tube numéro un et ajoutez-les au tube numéro deux, puis vortex à nouveau.
Les résultats ont indiqué une diminution des niveaux significatifs de cortisol salivaire après visite du site A, le cadre naturel. Aucun changement significatif dans les niveaux de cortisol n’a été observé dans le site B et C.Further, les niveaux d’amylase alpha ont augmenté après que les sujets aient visité le site C.Après visite aux trois emplacements et utilisant les questionnaires d’auto-rapport, des diminutions significatives sur les facteurs des demandes et de l’inquiétude ont été observées. Aucun changement significatif dans la tension des facteurs n’a été observé pour l’un ou l’autre des trois endroits et des augmentations significatives ont été signalées aux sites A et B pour la joie du facteur.
En règle générale, une grande partie de la recherche sur la réduction du stress s’est appuyée sur des questionnaires d’autodéfaisons. Dans cette étude, nous avons recueilli des échantillons de salive des participants pour analyser comment notre corps réagit réellement après la visite à trois sites avec différents niveaux de naturel. Dans cette visualisation, nous avons présenté à la fois une techniques de laboratoire et un exemple de la collecte de données remplies.
Cette technique permet au chercheur de capturer la réaction de notre corps à différents environnements. En confirme notre hypothèse que l’environnement naturel peut avoir des effets positifs sur la santé humaine. Des recherches futures sont suggérées pour appliquer des mesures biophysiques du niveau de stress dans différents environnements naturels ou différentes activités de plein air avec une véritable conception expérimentale.
