마우스에서의 신장 이식은 급성 및 만성 동종이식편 거부반응의 기작 연구에 필수적이다. 여기에서는 마우스의 복부 신장 이식 모델에서 혈관 해부학 및 요관 이식을위한 새로운 수술 기술을 소개합니다. 전통적인 마우스 신장 이식 모델에서, 대동맥의 상부는 신장 동맥에 대략 결찰된다.
기증자의 왼쪽 신장 정맥은 베나 카바에서 횡단되고 기증자 대동맥은 신장 동맥 아래에 동등하게 나뉘어져 나중에 수혜자의 복부 대동맥에 해부학이 될 수 있습니다. 마우스 신장 이식의이 변형 된 기술에서, 기증자 왼쪽 신장 정맥은 또한 정맥 카바에서 횡단되지만, 기증자 대동맥은 신장 동맥의 자손 위로 절단되고 수혜자 복부 대동맥에 대한 해부학 적 해부학이 절단됩니다. 대동맥의 기증자 끝이 결찰되는 동안, 요관 동맥은 의도적으로 보존됩니다.
이제 우리는 수술 절차의 시연을 시작합니다. 마취의 경우, 무의식을 유도하기 위해 약 40 ~ 60 초 동안 이소플루란을 흡입하기 위해 마우스를 상자에 넣으십시오. 마우스가 마취되면 마우스의 무게를 측정하십시오.
마우스 체중에 따라, 케타민, 자일라진, 아세프로마진의 복강내 주사는 마취된 마우스에 주어진다. 마취가 효과가 있으면 복부 모피를 자르십시오. 그런 다음 작업 테이블에서 마우스를 고정하고 소독하십시오.
교차 복부 절개를 사용하여 피부를 자릅니다. 복벽의 근육을 자르십시오. 다음으로, 조심스럽게 식염수 흡수 거즈로 내장을 제거하십시오.
왼쪽 신장, 대동맥 및 열등한 정맥 카바를 노출하십시오. 왼쪽 요추 정맥을 소작하십시오., 그들의 근본적인 가지와 왼쪽 부신 혈관을 포함한 다른 작은 혈관을 포함하여주의 깊게 소작하십시오. 왼쪽과 오른쪽 신장 동맥 사이의 대동맥 영역을 약 두 밀리미터 길이로 동원하십시오.
infrarenal 열등한 정맥 카바와 대동맥을 분리하십시오. 그리고 대동맥 아래에 구부러진 포셉을 통과하여이 선박 주위에 7.06 봉합사의 느슨한 넥타이를 놓습니다. 오른쪽 신장 동맥 아래의 대동맥 영역과 열등한 정맥 카바 영역을 두 개의 다섯 밀리미터 미세 혈관 클램프를 사용하여 크로스 클램프.
베나 카바에서 왼쪽 신장 정맥을 횡단하십시오. 대동맥을 헤파린 용액 한 밀리리터로 씻어 내십시오. 합자를 조이고 대동맥을 합자 아래뿐만 아니라 근위 클램프 아래에서도자를 자릅니다.
섬세한 요관 동맥이 완전히 보존되도록 조심스럽게 준비하십시오. 왼쪽 신장과 관련 혈관을 조심스럽게 조직 주변의 모든 혈관을 소작하여 완전히 해방시킵니다. 신장을 제거하고 네 도의 세포주 용액에 보관하십시오.
초기 수술 단계는 마취 및 소독을 포함하여 기증자 마우스에 대해 이전에 표시된 것과 유사합니다. 중간 절개를 통해 복부를 연 다음 식염수를 사용하여 젖은 거즈로 복부 장기를 덮으십시오. 조심스럽게 infrarenal 대동맥을 보존하고 모든 큰 혈관 가지가 소작되었는지 확인하십시오.
전기 소작을 사용하여 신장 골반에 가까운 위치에서 왼쪽 요관을 조심스럽게 해부하십시오. 그런 다음 왼쪽 신장을 제거하십시오. 열등한 정맥 카바와 복부 대동맥을 노출시키고 길이가 약 네 밀리미터 이상인 주변 지방 조직으로부터 분리하십시오.
그런 다음 두 개의 미세 혈관 클램프로 각각 대략적으로 그리고 원거리로 교차 클램프하십시오. 마이크로 바늘 홀더를 사용하여 10/0 모노필라멘트 봉합사 바늘을 안내하십시오.이 바늘은 대동맥 벽을 통해 근위에서 원위 방식으로 배치됩니다. 약 한 밀리미터의 타원형 동맥 절제술은 봉합사의 부드러운 상향 견인에 의해 달성되며, 미세하고 구부러진 가위로 바늘의 아래쪽 얼굴 바로 아래를 절단합니다.
기증자 - 수혜자 대동맥 해부학을 종단 간 방식으로 수행하십시오. 아나스토마증의 근위 및 원위 끝을 꿰매십시오. 두 개의 분리 된 10.0 봉합사를 사용하여 마지막 스티치.
묶은 후 바늘을 포함한 두 개의 긴 봉합사를 제자리에 두십시오. 해부학의 대동맥 벽의 왼쪽을 원위 - 근위 방향으로 두 개의 고르게 이격 된 바늘로 지속적으로 바느질하십시오. 마지막 스티치 후, 상부 스테이 봉합사 타이 위의 용기 벽의 부분 두께를 통해 봉합사를 안내하고 동시에 하부 봉합사 타이의 짧은 끝까지 부드러운 견인력을 발휘하십시오.
이 새로운 매듭없는 기술에서 마지막 스티치는 상단 타이의 짧은 끝에 묶여 있지 않습니다. 이식 된 신장을 정상 위치로 뒤집으십시오. 이제 대동맥 해부학의 오른쪽 벽을 근위 내지 원위 방식으로 세 개의 스티치를 사용하여 근위 내지 원위 방식으로 지속적으로 바느질하십시오.
참고로, 종래의 수술 기술과 비교하여, 마지막 봉합사는 근처의 원위 타이와 병합된다. 하부 봉합사의 끝에 묶지 말고 자르면 대신 두세 밀리미터 정도의 자유 길이를 남겨 둡니다. 약 1.5 밀리미터의 충분한 길이로 열등한 정맥 카바 세로를 자릅니다.
이 절개를 대동맥 아래 약간 아래에 놓습니다. 앞에서 설명한 것과 동일한 봉합 절차를 사용하여 정맥 해부학을 수행하고 아나스토마증의 각 측면에 네 개에서 다섯 개의 바늘이 필요하다는 차이점이 있습니다. 최종 스티치는 위에서 설명한 대동맥 해부학과 유사한 유사한 길이의 자유 단부로 남습니다.
그리고 새로운 매듭없는 해부학 기술, 마지막 스티치는 묶이지 않고 자유롭게 남겨 둡니다. 이것은 수술 시간을 단축시키고 외과 의사가 문합증의 크기를 늘리거나 줄일 수있게합니다. 이러한 개선은 혈관 문합증의 어려움과 수술 후 합병증을 감소시킨다.
두 해부학을 모두 완료 한 후 마른 면봉을 사용하여 봉합 된 부위쪽으로 약 10 ~ 20 초 동안 부드러운 압력을 가하십시오. 그 후에 두 클램프를 모두 제거 할 수 있습니다. 10.0 봉합사가있는 직선 바늘을 사용하여 수용자의 소변 방광을 관통하고 안내를 위해 21G 바늘 루멘에 삽입하십시오.
이제 21G 바늘을 안내하여 이전 바늘 적용 위치에 구멍을 뚫고 바늘을 뽑습니다. 손질 된 요관 끝을 꿰매고 입구 위치에서이 10.0 봉합사로 방광을 천공하십시오. 10.0 필라멘트와 요관을 구성된 구멍을 통해 소변 방광으로 견인하십시오.
기증자의 요관을 수혜자의 소변 방광에 아나스토모마하십시오. 여기서 요관의 외막을 방광벽의 외막에 연결하고 서너 개의 바늘로 간헐적 봉합사를 수행하십시오. 견인 봉합사를 당겨 내십시오.
내장을 복강에 다시 넣으십시오. 두 층 봉합사를 수행하고, 먼저 복부 근육을 착용 한 다음 복부 상처를 닫는 피부를하십시오. 이식된 마우스를 수술 후 회복을 위해 산소 및 온도 조절된 챔버에 넣는다.
수술 후 나흘 연속으로 적절한 수술 후 진통제를하십시오. 이식 마취 후 오일 후에 수용자 마우스의 대측성 신장 절제술을 수행한다. 마우스의 상태를 올리고 기록합니다.
우리는 이식 된 동위 이식편 신장과 천연 수용자 대측성 신장의 조직 학적 변화를 평가함으로써 기존의 이식 기술과 변형 된 이식 기술을 비교했습니다. 신장 세뇨관과 신장 간질성 섬유증의 트로피의 정도는 각각 이식 후 4주와 12주 후에 유의하게 상이하지 않은 것으로 나타났다. 우리는 이전에이 새로운 매듭없는 기술의 결과를 조사하고 수술 간 및 수술 후 합병증의 기술적 측면에서 고전적인 접근법과 비교했습니다.
여기에 제시된 변형된 기술은 이식편내 동맥 정맥 혈전 사건의 더 낮은 발생과 관련되었다. 협착을 수행하는 시간이 현저히 적었고 우수한 신장 등이식편, 장기 생존이 달성되었다. 마우스의 신장 이식은 복잡하고 최첨단 절차입니다.
이것은 혈관 해부학 및 신장 이식을위한 새로운 수술 기술로서 전반적인 성공률을 향상시키기 위해 노력하여 신장 이식 후자가 면역 반응을 연구하기위한 신뢰할 수있는 도구입니다.
